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原文传递 一种饲料非淀粉多糖组分分析方法
专利名称: 一种饲料非淀粉多糖组分分析方法
摘要: 本发明涉及一种饲料非淀粉多糖组分分析方法,包括如下步骤:饲料样品准备、饲料样品前处理、总非淀粉多糖组分解离、不溶性非淀粉多糖组分解离、非淀粉多糖组分解析。本发明采用乙酸酐衍生的气相色谱法解析饲料非淀粉多糖组分,准确获取饲料中总非淀粉多糖组分含量、不溶性非淀粉多糖组分含量、可溶性非淀粉多糖组分含量。
专利类型: 发明专利
国家地区组织代码: 北京;11
申请人: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
发明人: 陈亮;张宏福;黄庆华;高理想
专利状态: 有效
申请号: CN201810721793.4
公开号: CN109164175A
代理机构: 北京科迪生专利代理有限责任公司 11251
代理人: 安丽;成金玉
分类号: G01N30/02(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N30
申请人地址: 100193 北京市海淀区圆明园西路2号
主权项: 1.一种饲料非淀粉多糖组分分析方法,其特征在于,包括如下步骤:饲料样品准备、饲料样品前处理、总非淀粉多糖组分解离、不溶性非淀粉多糖组分解离、非淀粉多糖组分解析,其中:(1)饲料样品准备:选取饲料放入粉碎机中,所述饲料包括配合饲料和组成配合饲料的原料,将所述的粉碎机的转速控制在5000~6000r/min,粉碎时间为5~10min,将粉碎后的饲料过35目筛,储存备用;(2)饲料样品前处理:称取参比日粮纤维45~60mg和饲料0.15~0.30g至离心管中,加入20~30mL石油醚超声处理10~15min,3000~5000r/min室温离心5~10min,弃上清并干燥;加入80%的乙醇超声处理,弃上清并干燥;加入10~15mL乙酸缓冲液,乙酸缓冲的pH=5.0,并加入60~80μLα‑淀粉酶,沸水浴;然后加入60~80μL淀粉葡糖苷酶50~60℃恒温震荡水浴10~12h,取出离心管冷却至室温,3000~5000r/min室温离心5~10min;(3)总非淀粉多糖组分解离:在(2)处理后的离心管中加入40~50mL无水乙醇,冰浴静置1~2小时,3000~5000r/min室温离心5~10min,弃上清并干燥;加入10~15mL丙酮,3000~5000r/min室温离心5~10min,弃去上清液并烘干;(4)不溶性非淀粉多糖组分解离:在(2)处理后的离心管中加入50~60mL磷酸缓冲液,沸水浴1~2小时,3000~5000r/min室温离心5~10min,弃上清并干燥;加入10~15mL丙酮,3000~5000r/min室温离心5~10min,弃去上清液并烘干;(5)非淀粉多糖组分含量解析:将解离的非淀粉多糖组分中加入浓硫酸,30~40℃,40~50r/min恒温水浴1~2h,离心,置于‑18~‑22℃储存备用,取200~300μL水解液至离心管中,加入体积比为1:4:4:4~1:3:3:3的氨水:肌醇内标物:无水乙醇:硼氢化钠溶液,混匀;再加入体积为2:5:50~3:6:55的冰乙酸:1‑甲基咪唑:乙酸酐的溶液,混匀;经氮气吹干复溶后,气相色谱测定总非淀粉多糖组分和不溶性非淀粉多糖组分。
所属类别: 发明专利
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