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原文传递细胞因子作为生物标志物在制备孤立性冠脉炎诊断产品中的应用

专利名称：	细胞因子作为生物标志物在制备孤立性冠脉炎诊断产品中的应用
摘要：	本发明提供了细胞因子作为生物标志物在制备诊断孤立性冠脉炎的产品中的应用。其中，细胞因子为如下至少一个：CD3、CD4、CD45RA及CCR7。将上述细胞因子应用于孤立性冠脉炎诊断，可以更为及时准确地确诊孤立性冠脉炎患者，并及时对其提供有针对性的治疗方案。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	北京;11
申请人：	中国医学科学院阜外医院
发明人：	贾镭;林章宇;高国峰;杨敏;丰雷;朱成刚;窦克非
专利状态：	有效
申请日期：	2023-04-10T00:00:00+0800
发布日期：	2023-11-17T00:00:00+0800
申请号：	CN202310377539.8
公开号：	CN117074685A
代理机构：	北京康信知识产权代理有限责任公司
代理人：	路秀丽
分类号：	G01N33/68;G01N33/577;G01N33/543;G;G01;G01N;G01N33;G01N33/68;G01N33/577;G01N33/543
申请人地址：	100037 北京市西城区北礼士路167号
主权项：	1.细胞因子作为生物标志物在制备诊断孤立性冠脉炎的产品中的应用，其特征在于，所述细胞因子为如下至少一个：CD3、CD4、CD45RA及CCR7。 2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述应用包括利用检测试剂检测所述细胞因子的含量；优选地，所述细胞因子的含量的检测方法包括：ELISPOT技术或免疫印迹实验；优选地，所述检测试剂为所述细胞因子的抗体、RNA探针或DNA探针；优选地，所述抗体设置在固相载体上；优选地，所述固相载体包括酶标板、膜载体或微球；优选地，所述膜载体选自硝酸纤维素膜、PDVF膜或尼龙膜；优选地，所述抗体为单克隆抗体；优选地，所述产品包括试剂盒或电子预测装置。 3.一种用于诊断孤立性冠脉炎的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括检测细胞因子的含量的检测试剂。 4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括CD3抗原肽、CD4抗原肽、CD45RA抗原肽或CCR7抗原肽中的一种或多种；优选地，所述试剂盒还包括所述CD3抗原肽、所述CD4抗原肽、所述CD45RA抗原肽及所述CCR7抗原肽；优选地，所述试剂盒进一步还包括：人淋巴细胞分离液、无血清细胞培养液、生物素-IFN-γ抗体、HRP-链霉亲和素、AEC稀释液、AEC底物液、无菌10×PBS、胎牛血清、植物凝集素工作液及阴性孔补充液；优选地，所述试剂盒还包括：PVDF膜条板、无菌PCR管及无菌EP管；其中，所述PVDF膜条板为已包被抗体的PVDF膜条板，所述抗体选自特异性识别如下至少一种抗原肽的抗体：所述CD3抗原肽、所述CD4抗原肽、所述CD45RA抗原肽及所述CCR7抗原肽；优选地，所述PVDF膜条板为可拆条板，更优选地，每块所述PVDF膜条板有10-11排，每排有10-11个孔；优选地，各抗原肽以液体形式存在；优选地，所述液体为各所述抗原肽的DMSO溶液或DMF溶液；优选地，所述液体中进一步包括甘油和PMSF；优选地，按体积分数计，所述甘油的含量为30-35％；优选地，按体积分数计，所述PMSF的含量为1-2％。 5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述植物凝集素工作液包括植物凝集素及溶解所述植物凝集素的无菌1×PBS组成，所述阴性孔补充液包括所述无血清细胞培养液及DMSO溶液或DMF溶液。 6.一种诊断孤立性冠脉炎的电子装置，其特征在于，所述电子装置包括：诊断模块，被设置为根据细胞因子含量的检测结果进行孤立性冠脉炎诊断；其中，所述细胞因子为如下至少一个：CD3、CD4、CD45RA或CCR7。 7.根据权利要求6所述的电子装置，其特征在于，所述电子装置还包括：获取模块，被设置为获取生物样品；检测模块，被设置为对所述生物样品中的所述细胞因子的含量进行检测，从而获得所述生物样品中的细胞因子含量；优选地，所述生物样品为血浆样品。 8.根据权利要求7所述的电子装置，其特征在于，所述生物样品的获取模块为获取培养后的外周单个核细胞；优选地，所述检测模块为ELISPOT检测模块，所述ELISPOT检测模块被设置为对在PVDF膜条板上培养后的所述外周单个核细胞中的所述细胞因子的含量进行ELISPOT检测，获得所述细胞因子含量；优选地，所述获取模块包括：样品处理模块，所述样品处理模块被设置为对所述血浆样品中的外周单个核细胞进行分离，得到外周单个核细胞悬液；细胞培养模块，所述细胞培养模块被设置为在PVDF膜条板上对所述外周单个核细胞悬液进行细胞培养，获得所述外周单个核细胞；优选地，所述样品处理模块和所述细胞培养模块处于无菌环境中。 9.根据权利要求8所述的电子装置，其特征在于，所述样品处理模块包括：稀释模块，所述稀释模块被设置为对所述血浆样品进行稀释；细胞分离模块，所述细胞分离模块被设置为利用人淋巴细胞分离液对稀释后的血浆样品进行离心分离，获得外周单个核细胞层；洗涤模块，所述洗涤模块被设置为取离心后的所述外周单个核细胞层进行洗涤，离心获得外周单个核细胞；重悬模块，所述重悬模块被设置为对洗涤后获得的所述外周单个核细胞进行重悬，并调整细胞浓度，得到所述外周单个核细胞悬液。 10.根据权利要求9所述的电子装置，其特征在于，所述细胞培养模块包括：活化模块，所述活化模块被设置为活化所述PVDF膜条板； PBMC细胞培养模块，所述PBMC细胞培养模块被设置为在活化后的所述PVDF膜条板上对所述外周单个核细胞悬液进行细胞培养。 11.根据权利要求8所述的电子装置，其特征在于，所述ELISPOT检测模块包括：细胞裂解模块，所述细胞裂解模块被设置为对PVDF膜条板上细胞培养后的细胞进行裂解；抗原抗体反应模块，所述抗原抗体反应模块被设置为对PVDF膜条板上各孔中裂解后的细胞进行抗原抗体反应；计数模块，所述计数模块被设置为对进行抗原抗体反应后的PVDF膜条板上各孔进行显色反应，后进行斑点计数，获得所述细胞因子含量。