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原文传递一种纳米酶基比色/表面增强拉曼散射检测食品中砷的方法

专利名称：	一种纳米酶基比色/表面增强拉曼散射检测食品中砷的方法
摘要：	本发明公开了一种纳米酶基比色/表面增强拉曼散射检测食品中砷的方法，该方法基于铜掺杂二硫苏糖醇(DTT)基碳点及葡萄糖碳点改性金银纳米(Au,AgNPs)具有的模拟酶及拉曼增加的双重活性，在双氧水存在下氧化无色3,3',5,5'‑四甲基联苯胺(TMB)为蓝色具有表面增强拉曼光谱活性的oxTMB，而砷的加入抑制了金银纳米的过氧化酶活性，当As3+或As5+存在时，能竞争性地螯合DTT中的巯基，导致Au,AgNPs纳米酶的重新组装，而重新组装的纳米酶具有更低的类过氧化酶活性，使TMB反应受到明显抑制。基于这一原理，实现了对As的高灵敏检测，其线检出限达到0.5μg/L。将建立的方法应用于食品样品中砷的测定，具有好的加标回收率，方法具有操作简单、灵敏度高、快速等特点。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	云南;53
申请人：	云南伦扬科技有限公司
发明人：	杨亚玲;李秋兰;杨德志
专利状态：	有效
申请日期：	2023-09-09T00:00:00+0800
发布日期：	2023-11-14T00:00:00+0800
申请号：	CN202311159027.0
公开号：	CN117054395A
分类号：	G01N21/65;G;G01;G01N;G01N21;G01N21/65
申请人地址：	650101 云南省昆明市高新区科园路101号细胞产业集群创新园第5层B区B5-01
主权项：	1.一种纳米酶基比色/表面增强拉曼散射检测食品中砷的方法，其特征在于，包括以下步骤： (1)以铜掺杂二硫苏糖醇(DTT)碳点Cu,DTT-CDs、H2O2、葡萄糖及葡萄糖碳点为还原剂及稳定剂，制备Cu,DTT-CDs改性金银纳米Au,AgNPs； (2)在TMB及H2O2溶液中加入Cu,DTT-CDs改性金银纳米Au,AgNPs溶液，反应5-10min，生成oxTMB，然后加入As3+标准溶液，反应5-10min；在654nm波长测定吸光度，同时使用便携式拉曼仪对混合物进行拉曼光谱检测，根据oxTMB分子结构和拉曼峰位归属，确定1605cm-1处的特征峰作为表面增强拉曼散射光谱检测As3+的判别依据，并确定As3+浓度与吸光度及特征峰的峰面积的线性关系； (3)取含As3+的待测样品液与铜掺杂二硫苏糖醇(DTT)碳点Cu,DTT-CDs混合反应，然后加入TMB及H2O2反应后，在654nm波长测定吸光度，使用便携拉曼仪进行拉曼光谱检测，根据吸光度及特征峰的峰面积计算待测样品液中As3+浓度。 2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，Cu,DTT-CDs改性金银纳米Au,AgNPs的制备如下： (1)将60mg/mLPVP 1-2mL和0.1M DTT溶液混合，加入0.5-1mL 0.1M CuCl2溶液，搅拌10-15min，用0.1M NaOH调节pH 5-6，8000rpm离心10-15min，得到白色沉淀DTT-Cu，将DTT-Cu分散于2.5-3.0mL纯水中，为A液；称取0.52-0.60g柠檬酸纳、0.60-0.65g尿素加入10-15mL纯水中，混合形成透明溶液B；将A液与B液混合均匀，转入聚四氟乙烯罐中，180℃恒温加热8-10h，反应完成后自然冷却至室温，得棕色溶液；将棕色溶液用0.22μm滤膜除去大颗粒杂质，再经8000-10000rpm离心10-15min，上清液真空干燥，得到铜掺杂DTT碳点Cu,DTT-CDs； (2)50mM AgNO31mL与40mM HAuCl41mL加入40-50mL纯水中，搅拌均匀后，加入15-20mg的Cu,DTT-CDs，加热至70-75℃搅拌2h形成金银种子，加入15mg葡萄糖与5mL金银种子溶液混合，800w微波加热8-10min，混合液溶解10-15mL纯水中，12,000rpm离心10min，得到铜掺杂DTT碳点改性金银纳米Au,AgNPs。 3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：As3+标准溶液的浓度为1.25-107.75μg/L；Cu,DTT-CDs改性金银纳米Au,AgNPs溶液的浓度为0.1mg/mL，添加量为50-100μL；TMB溶液浓度为100mmol/L，添加量为10-20μL；H2O2的浓度为100mmol/L，用量为20-50μL。 4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：拉曼光谱检测是在785nm激发光、激光功率500mW条件下扫描10s。
所属类别：	发明专利