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原文传递一种精浆弹性蛋白酶荧光免疫层析检测试剂盒及检测方法

专利名称：	一种精浆弹性蛋白酶荧光免疫层析检测试剂盒及检测方法
摘要：	本发明公开了一种精浆弹性蛋白酶荧光免疫层析检测试剂盒及检测方法，属于医学检验和体外诊断试剂技术领域。本发明公开的一种精浆弹性蛋白酶荧光免疫层析检测试剂盒，包括试剂卡、荧光标记抗体液和ID卡。本发明采用荧光免疫层析的方法实现了对精浆弹性蛋白酶的快速检测，将测试时间从两小时以上缩短至只需15分钟；采用液态的荧光标记抗体液，而不是传统地将荧光标记抗体涂敷在结合垫上，避免了结合垫生产工艺过程造成的精密度差的问题。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广东;44
申请人：	深圳市盛信康科技有限公司
发明人：	许墨横;欧阳春裕;袁有安;黎燕
专利状态：	有效
申请日期：	2023-08-10T00:00:00+0800
发布日期：	2023-11-10T00:00:00+0800
申请号：	CN202311004504.6
公开号：	CN117031022A
代理机构：	北京慕达星云知识产权代理事务所(特殊普通合伙)
代理人：	齐宝玲
分类号：	G01N33/573;G01N33/558;G01N33/58;G01N33/546;G01N33/543;G01N33/533;G;G01;G01N;G01N33;G01N33/573;G01N33/558;G01N33/58;G01N33/546;G01N33/543;G01N33/533
申请人地址：	518107 广东省深圳市光明区玉塘街道田寮社区东方建富怡景工业城B2栋201
主权项：	1.一种精浆弹性蛋白酶荧光免疫层析检测试剂盒，其特征在于，包括试剂卡、荧光标记抗体液和ID卡；所述试剂卡由试纸条和塑料卡壳组成，试纸条嵌入塑料卡壳的卡槽中；所述试纸条由NC膜、吸水纸、样品垫、PVC底板组成；吸水纸、NC膜、样品垫依次搭接粘贴在PVC底板上；所述NC膜上间隔设置有检测线和质控线；所述检测线包被有抗人弹性蛋白酶抗体，包被浓度为0.8-1.5mg/mL；所述质控线包被有羊抗鸡IgY抗体，包被浓度为0.3-0.8mg/mL；所述质控线设置在NC膜靠近吸水垫一侧，检测线靠近样品垫一侧；所述塑料卡壳上设有加样孔及检视窗，所述加样孔位于所述样品垫上方，所述检视窗位于所述NC膜上方；所述荧光标记抗体液由荧光微球标记抗人抗胰蛋白酶抗体、荧光微球标记鸡IgY、保护剂、表面活性剂和缓冲液组成；所述荧光微球标记抗人抗胰蛋白酶抗体和所述荧光微球标记鸡IgY的混合比例为1～3：1，荧光微球终浓度为0.01mg/mL；所述保护剂的浓度为0.5％-2％；所述表面活性剂的浓度为0.5％-2％；所述ID卡含有精浆弹性蛋白酶工作校准品标准曲线信息。 2.根据权利要求1所述的一种精浆弹性蛋白酶荧光免疫层析检测试剂盒，其特征在于，所述荧光微球标记抗人抗胰蛋白酶抗体中，荧光微球与抗人抗胰蛋白酶抗体的用量比为10：1；所述荧光微球标记鸡IgY中，荧光微球与鸡IgY的用量比为20：1。 3.根据权利要求1所述的一种精浆弹性蛋白酶荧光免疫层析检测试剂盒，其特征在于，所述保护剂为牛血清蛋白，海藻糖，蔗糖，甘氨酸，明胶，山梨糖醇中的至少一种。 4.根据权利要求1所述的一种精浆弹性蛋白酶荧光免疫层析检测试剂盒，其特征在于，所述表面活性剂为吐温20，曲拉通Triton X-100，Tetronic 1307，SILWET L7600中的至少一种。 5.根据权利要求1所述的一种精浆弹性蛋白酶荧光免疫层析检测试剂盒，其特征在于，所述缓冲液为PBS缓冲液、Tris缓冲液或BS缓冲液，pH 7.0-8.0。 6.权利要求1-5任一项所述的一种精浆弹性蛋白酶荧光免疫层析检测试剂盒的制备方法，其特征在于，具体步骤如下： (1)配制荧光标记抗体液：将荧光微球标记抗人抗胰蛋白酶抗体和荧光微球标记鸡IgY按比例混合，混合后与保护剂，表面活性剂一起加入到缓冲液中混匀，4℃下保存； (2)在NC膜上包被抗体，将抗人弹性蛋白酶抗体和羊抗鸡IgY抗体分别配制包被工作液，用划膜仪将其划到NC膜上，检测线和质控线的间隔为3-8mm； (3)组装试剂卡：将吸水纸、NC膜、样品垫依次搭接粘贴在PVC底板上，切割为3～4mm宽的试纸条，并置于塑料卡壳卡槽内，组装好塑料卡壳的上下盖，加入干燥剂封装； (4)ID卡写入标准曲线，与荧光标记抗体液、ID卡共同组成荧光免疫层析试剂盒。 7.一种精浆弹性蛋白酶荧光免疫层析检测方法，其特征在于，利用权利要求1-5任一项所述的一种精浆弹性蛋白酶荧光免疫层析检测试剂盒进行检测，具体步骤如下： S1、将所述精浆弹性蛋白酶荧光免疫层析检测试剂盒和待测样品置于室温下放置15～30min，待恢复到室温后使用； S2、取出试剂盒中的ID卡插入到检测仪中，将试剂的标准曲线信息导入仪器； S3、将试剂卡放置到平整的桌面上； S4、量取75μl待测样品加入到75μl荧光标记抗体液中，漩涡震荡混合5～10s，获得待测样品混合液； S5、量取待测样品混合液75μL加入试剂卡加样孔，室温下反应15min； S6、将试剂卡插入仪器检测槽，操作仪器对试剂卡进行测量，测量完成后仪器自动将浓度值显示在屏幕上，从检测仪上读取或打印检测结果。
所属类别：	发明专利