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原文传递一种粪便/血清样本中伤寒抗原检测试剂盒及其制备方法

专利名称：	一种粪便/血清样本中伤寒抗原检测试剂盒及其制备方法
摘要：	本发明提供了一种粪便/血清样本中伤寒抗原检测试剂盒及其制备方法，采用双抗体夹心法检测患者和带菌者粪便和血清样本中的伤寒杆菌及抗原，具有灵敏度高、特异性好、反应时间短、操作简便、结果易于判断等优点，实现快速准确的定性检测粪便和血清样本中的伤寒沙门氏菌，直观地判断出样本中伤寒沙门氏菌含量的高低，适用于伤寒的早期诊断，有较高的临床价值。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	浙江;33
申请人：	杭州艾策医疗技术有限公司
发明人：	潘洁;李因来
专利状态：	有效
申请日期：	2023-07-28T00:00:00+0800
发布日期：	2023-11-17T00:00:00+0800
申请号：	CN202310939353.7
公开号：	CN117074670A
代理机构：	苏州中合知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	刘召民
分类号：	G01N33/569;G01N33/58;G01N33/543;G01N33/532;G;G01;G01N;G01N33;G01N33/569;G01N33/58;G01N33/543;G01N33/532
申请人地址：	310000 浙江省杭州市钱塘区下沙街道和享科技中心9幢3层
主权项：	1.一种粪便/血清样本中伤寒抗原检测试剂盒的制备方法，包括将样品垫、伤寒抗体标记物胶体金标记垫、硝酸纤维素膜和吸水纸顺序搭接PVC底板上，并按照规格要求切割，所述样品垫通过以下方法制备：将玻璃纤维平放在网架上，将样本垫处理液均匀涂布于玻璃纤维上，将涂布好的样品垫放于湿度≤25％环境下，温度37℃干燥12～24小时，备用，所述样本垫处理液由1g/L胆酸，10g/L PVP40，10g/L S9，0.15g/L RBC，0.1％PC300和pH为8.0的0.1mol/L Tris-HCl缓冲液组成。 2.根据权利要求1所述的一种粪便/血清样本中伤寒抗原检测试剂盒的制备方法，其特征在于，将样本垫处理液按照50mL/片(2030cm)处理玻璃纤维。 3.根据权利要求1所述的一种粪便/血清样本中伤寒抗原检测试剂盒的制备方法，其特征在于，所述伤寒抗体标记物胶体金标记垫通过以下方法制备： a)烧制金水溶液； b)制备伤寒胶体金溶液，按1ml胶体金溶液为例，取步骤a)烧制的金水50ml，加入10μg的伤寒单克隆抗体，室温反应30分钟后，加入1mL 1％的酪蛋白钠盐进行封闭，室温反应30分钟后，10000rpm离心30分钟后，弃上清液，收集金标溶液，并加入保存液； c)制备伤寒胶体金喷点溶液：使用0.01M的PBS稀释液稀释金标标记物，稀释浓度为30％； d)浸泡：取聚酯膜素膜，按40mL/片(30080mm)的处理量处理聚酯膜，浸泡12～24小时后置于湿度≤25％环境下，温度37℃干燥12～24小时； e)将稀释后的伤寒胶体金溶液喷点在处理后的聚酯膜上；温度37℃干燥12～24小时。 4.根据权利要求3所述的一种粪便/血清样本中伤寒抗原检测试剂盒的制备方法，其特征在于，步骤d)采用预处理液浸泡，预处理液配方为：11.3g/L MOPSO，5g/L酪蛋白钠盐；0.5mL/L的吐温20；2mL/L的PC300。 5.根据权利要求1所述的一种粪便/血清样本中伤寒抗原检测试剂盒的制备方法，其特征在于，所述硝酸纤维素膜通过以下方法制备：用包被缓冲液稀释伤寒检测线包被抗体和质控线包被抗体制备成包被工作液，检测线包被液浓度为0.5mg/mL，质控线包被液浓度为1.0mg/mL，采用点膜仪将制备的检测线包被液和质控线包被液分别包被在硝酸纤维素膜上，形成检测线T和质控线C，得到含有检测线T和质控线C的硝酸纤维素膜。 6.根据权利要求5所述的一种粪便/血清样本中伤寒抗原检测试剂盒的制备方法，其特征在于，检测线和质控线的喷量为0.8～1.0μL/cm。 7.根据权利要求5所述的一种粪便/血清样本中伤寒抗原检测试剂盒的制备方法，其特征在于，所述质控线C至硝酸纤维素膜的底端距离为9mm，误差≤±0.5mm；所述检测线T至硝酸纤维素膜的底端距离为5mm，误差≤±0.5mm。 8.根据权利要求1所述的一种粪便/血清样本中伤寒抗原检测试剂盒的制备方法，其特征在于，所述样品垫、伤寒抗体标记物胶体金标记垫、硝酸纤维素膜和吸水纸的条宽均不小于3.0mm。 9.一种粪便/血清样本中伤寒抗原检测试剂盒，由权利要求1～8任意一项所述的一种粪便/血清样本中伤寒抗原检测试剂盒的制备方法制得。 10.根据权利要求9所述的一种粪便/血清样本中伤寒抗原检测试剂盒，其特征在于，如样本中含有伤寒抗原，在检测区T位置上会出现一条紫红色条带；若样本中不含伤寒抗原，则检测区不会出现紫红色条带；无论样本中是否含有伤寒抗原，质控区C都会出现一条紫红色条带，用来判定层析过程是否正常。
所属类别：	发明专利