详情

原文传递一种HPLC-MS/MS法检测血浆中瑞卢戈利的方法

专利名称：	一种HPLC-MS/MS法检测血浆中瑞卢戈利的方法
摘要：	本发明公开了一种HPLC‑MS/MS法检测血浆中瑞卢戈利的方法。所述方法采用蛋白沉淀法进行预处理；色谱条件采用ZORBAX Eclipse XDB‑C18色谱柱，以含0.2％甲酸和5mM醋酸铵的水溶液和乙腈为流动相，进行梯度洗脱；质谱条件采用电喷雾电离源(ESI)串联质谱，并以瑞卢戈利‑d6为内标进行定量检测。本发明方法操作简便、分析速度快、灵敏度高、线性范围合适，满足临床研究大批量样品分析需求。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	江苏;32
申请人：	苏州方昆医药科技有限公司
发明人：	史中杰;陈云辉;姜金方
专利状态：	有效
申请日期：	2023-08-28T00:00:00+0800
发布日期：	2023-11-28T00:00:00+0800
申请号：	CN202311091173.4
公开号：	CN117129597A
代理机构：	北京金信知识产权代理有限公司
代理人：	李维盈
分类号：	G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72;G01N30/86;G;G01;G01N;G01N30;G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72;G01N30/86
申请人地址：	215123 江苏省苏州市苏州工业园区福泾田路68号A幢503
主权项：	1.一种HPLC-MS/MS法检测血浆中瑞卢戈利的方法，包括以下步骤： (1)预处理：在血浆样品中加入乙腈沉淀蛋白，离心后取上清液，加水稀释后，得供试品； (2)采用HPLC-MS/MS检测经过预处理的血浆样品，经内标定量法测定其中瑞卢戈利的含量，其中：色谱条件：色谱柱：ZORBAX Eclipse XDB-C18色谱柱；流动相A：含0.2％甲酸和5mM醋酸铵的水溶液，流动相B：乙腈；梯度洗脱程序：0-0.5min：流动相B为45％；0.5-1.0min：流动相B为45％→85％；1.0-1.5min：流动相B为85％；1.5-1.6min：流动相B为85％→45％；1.6-2.0min：流动相B为45％；柱温：35-45℃；质谱条件：离子源：电喷雾离子源；正离子扫描；多反应监测；喷射电压为5000V；离子源温度为500℃；所述内标物质为瑞卢戈利-d6。 2.根据权利要求1所述的HPLC-MS/MS法检测血浆中瑞卢戈利的方法，其特征在于，向血浆样品中加入内标溶液，经处理得到含内标物质的供试品；所述内标溶液为瑞卢戈利-d6经甲醇溶解后，以乙腈-水，50：50，v/v，稀释得到。 3.根据权利要求2所述的HPLC-MS/MS法检测血浆中瑞卢戈利的方法，其特征在于，内标溶液的加入量为血浆样品的0.5-2倍，优选为等体积。 4.根据权利要求1所述的HPLC-MS/MS法检测血浆中瑞卢戈利的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述血浆样品的体积为30-100μL，优选为40-60μL；血浆样品中瑞卢戈利的含量为0.100-60.0ng/mL。 5.根据权利要求1所述的HPLC-MS/MS法检测血浆中瑞卢戈利的方法，其特征在于，步骤(1)中，供试品中内标物质的含量为1.00-4.00ng/mL，优选为2.00ng/mL。 6.根据权利要求1所述的HPLC-MS/MS法检测血浆中瑞卢戈利的方法，其特征在于，步骤(1)中，血浆样品与乙腈的体积比为1∶(1-5)，优选为1∶(3-5)。 7.根据权利要求1所述的HPLC-MS/MS法检测血浆中瑞卢戈利的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述加水稀释中，加入的水量为上清液体积的0.5-2倍，优选加水的量与上清液等体积。 8.根据权利要求1所述的HPLC-MS/MS法检测血浆中瑞卢戈利的方法，其特征在于，步骤(2)中，柱温为40℃；流动相流速为0.5mL/min；进样量为5.00μL。 9.根据权利要求1所述的HPLC-MS/MS法检测血浆中瑞卢戈利的方法，其特征在于，步骤(2)的质谱条件中，气体1：50psi，气体2：50psi，气帘气体：35psi，碰撞诱导解离：6psi，驻留时间：200ms。 10.根据权利要求1所述的HPLC-MS/MS法检测血浆中瑞卢戈利的方法，其特征在于，步骤(2)的质谱条件中，瑞卢戈利定量分析离子对：m/z624.3→548.2，碰撞能量：35eV，去簇电压：100V；瑞卢戈利-d6定量分析离子对：630.3→548.2，碰撞能量：35eV，去簇电压：100V。
所属类别：	发明专利