专利名称: |
人白血病-NOD/SCID小鼠髓外浸润模型及其制备方法 |
摘要: |
本发明涉及一种人白血病-NOD/SCID小鼠髓外浸润模型的制备方法,包括
以下步骤:一、白血病人骨髓单个核细胞制备,二、NOD/SCID小鼠预处理,
三、模型建立,四、模型鉴定。本发明率先采用了尾静脉注射白血病人白血病
人骨髓单个核细胞的方式建立人白血病-NOD/SCID小鼠髓外浸润模型的方法,
且制备的白血病小鼠髓外浸润模型成功率高,存活时间长,可以为白血病髓外
浸润机制研究,白血病药物筛选,基因和分子靶向治疗提供新的动物模型。 |
专利类型: |
发明专利 |
国家地区组织代码: |
天津;12 |
申请人: |
天津中医药大学第一附属医院 |
发明人: |
杨文华 |
专利状态: |
有效 |
申请日期: |
2009-05-19T00:00:00+0800 |
发布日期: |
2019-01-01T00:00:00+0800 |
申请号: |
CN200910068942.2 |
公开号: |
CN101548909 |
分类号: |
A61B19/00(2006.01)I |
申请人地址: |
300193天津市南开区鞍山西道314号 |
主权项: |
1.一种人白血病-NOD/SCID小鼠髓外浸润模型的制备方法,包括以下步骤:
1)白血病人骨髓单个核细胞制备:选取急性白血病人或慢性粒白血病急变
病人,常规无菌采集骨髓5ml,肝素抗凝,加入5ml淋巴细胞分离液,
1800r/min水平离心10min,移入超净工作台,吸取中间白色单个核细胞
悬浮层,移入另一支离心管中,加入5mlPBS液,水平离心1000r/min,
10min;倒去上清,再次加入5mlPBS液,水平离心1000r/min,10min,弃
去上清,0.9%的生理盐水调匀细胞,2%台盼蓝计数活细胞,将活细胞终浓
度调至5×107/ml;
2)NOD/SCID小鼠预处理:SPF级NOD/SCID小鼠,5至6周龄,饲养于SPF
级层流室,标准颗粒饲养,饮水酸化处理,垫料及一切与鼠接触物品均灭
菌处理,接种前将小鼠置于无菌透气木盒中,处罩无菌消毒巾,在137cs
源环境下照射270cGy,预处理后24h内接种白血病人单个骨髓核细胞,
对小鼠所有操作均在无菌层流室内进行;
3)模型建立:将调整好浓度的白血病人白血病人骨髓单个核细胞尾静脉注
射于预处理后的NOD/SCID小鼠,每只注射剂量为0.2ml,建议人白血病
-NOD/SCID小鼠髓外浸润模型;
4)模型鉴定。 |
所属类别: |
发明专利 |