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原文传递 发光细菌法快速检测海水中BOD的方法
专利名称: 发光细菌法快速检测海水中BOD的方法
摘要: 本发明涉及发光细菌法快速检测海水中BOD的方法,本发明通过发光细菌作为检验海水 BOD的受试生物,同时利用人工海水、葡萄糖、谷氨酸配制BOD标准溶液,解决了以往海 水BOD检测中由于检测限过高,给结果带来的影响。
专利类型: 发明专利
国家地区组织代码: 辽宁;21
申请人: 国家海洋环境监测中心
发明人: 刘长安;张世宇
专利状态: 有效
申请日期: 2009-02-20T00:00:00+0800
发布日期: 2019-01-01T00:00:00+0800
申请号: CN200910010425.X
公开号: CN101551335
代理机构: 大连八方知识产权代理有限公司
代理人: 高 杰
分类号: G01N21/76(2006.01)I
申请人地址: 116622辽宁省大连市凌河街42号
主权项: 1、发光细菌法快速检测海水中BOD的方法,其特征在于,该方法具体步骤如下: 一、发光细菌的培养: 菌种采用明亮发光杆菌T3变种(Photobacterium phosphoreum),制备发光细菌新鲜菌悬 液: (1)斜面菌种培养:在新鲜斜面上接出第一代斜面,25℃±0.5℃培养24h后立即转接第 二代斜面,25℃±0.5℃培养24h后再转接第三代斜面,25℃±0.5℃培养24h后备用; (2)摇瓶菌液培养:取第三代斜面菌种近一环,接种于装有30ml细菌培养液的100ml 三角烧瓶中,25℃±0.5℃,160r/min下培养24h备用; (3)将培养后的发光细菌新鲜菌悬液稀释至每毫升108个~109个细胞,初始发光度不低 于800mV,备用; 斜面和菌液的营养基为: 胰蛋白胨0.5g NaCl 3g Na2HPO4 0.5g KH2PO4 0.5g 酵母0.5g 甘油0.3g 蒸馏水100ml 固体培养基加琼脂1.69g 二、BOD标准溶液的制备: 各自称取0.15g葡萄糖和谷氨酸溶解于1L的人工海水中,人工海水的配方为: NaCl 20g MgSO4 3.6g MgCl2 7.2g 无水CaCl2 0.7g 蒸馏水 1000ml。 配得溶液的BOD值相当于220mg/L,将溶液稀为1mg/L、2mg/L、4mg/L、6mg/L、8mg/L、 10mg/L等6个梯度; 三、发光细菌发光度增加量的测定: 测定时的室温要控制在20~25℃,同一批样品在测定过程中要求温度波动不超过±1℃。 取若干试管,给每支管中加0.6ml步骤一培养的发光细菌菌液,部分作为对照管的试管中放 0.05ml人工海水,作为样品管的试管中放0.05mlBOD标准溶液,20min后放入发光光度计中 检测。 发光细菌发光度的增加量=样品管-空白管。
所属类别: 发明专利
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