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一种DNA结合蛋白高灵敏高通量的检测方法
| 专利名称： | 一种DNA结合蛋白高灵敏高通量的检测方法 |
| 摘要： | 本发明属于基于微阵列芯片的DNA结合蛋白检测技术，特别涉及一种超灵敏 高通量微阵列芯片的DNA结合蛋白检测技术。将双链或单链寡核苷酸固定到芯片， 将待筛选的细胞粗提取物同芯片直接温育，再将外切酶放入上述体系中进行温育。 最后将环形探针加入体系中，进行滚环扩增。芯片上能与目标蛋白结合的特定点 阵序列能作为延伸引物进行滚环扩增；而没有被蛋白结合的序列，由于被外切酶 所消化则不能进行滚环扩增，最后将扩增产物同通用荧光检测探针杂交。根据芯 片上特定阵列点信号的有无则可以检测出DNA结合蛋白的有无；通过点阵荧光的 强度则可以定量检测出目标蛋白的含量。该芯片能实现对DNA结合蛋白的超灵敏、 低成本、高特异和高通量的检测，可以广泛应用于科研和临床检测诊断之中。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 江苏;32 |
| 申请人： | 徐州医学院 |
| 发明人： | 潘志强;张励才;邵翠杰;张成标 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 2009-06-13T00:00:00+0800 |
| 发布日期： | 2019-01-01T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN200910032411.8 |
| 公开号： | CN101591705 |
| 代理机构： | 徐州市三联专利事务所 |
| 代理人： | 周爱芳 |
| 分类号： | C12Q1/68(2006.01)I |
| 申请人地址： | 221002江苏省徐州市淮海西路99号 |
| 主权项： | 1.一种DNA结合蛋白的检测方法，其特征在于其具体步骤为：首先设计寡核 苷酸DNA芯片；将待筛选的粗细胞提取液同寡核苷酸DNA芯片直接温育；再将核 酸外切酶III放入上述寡核苷酸DNA芯片体系中温育；再将环形探针加入寡核苷 酸DNA芯片体系中，进行滚环扩增，有结合蛋白的序列能进行扩增获得荧光信号， 而没有被蛋白的结合的序列，被核酸外切酶III所切割则不能进行滚环扩增，不 能获得荧光信号；最后通过微阵列荧光信号的有无来判断芯片体系中DNA结合蛋 白的有无，通过荧光强度则能够定量检测出DNA结合蛋白含量。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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