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转SmGGPPS基因提高丹参毛状根丹参酮含量的方法
| 专利名称： | 转SmGGPPS基因提高丹参毛状根丹参酮含量的方法 |
| 摘要： | 本发明属于基因工程技术，一种转SmGGPPS基因提高丹参毛状根丹参酮含量的方法。现有技术丹参生长周期长；丹参酮产量低，无法满足人类医疗对丹参酮的需求。本发明从丹参中克隆SmGGPPS基因的编码序列，并构建其植物高效表达载体，遗传转化丹参叶片获得转SmGGPPS基因的丹参毛状根，半定量RT-PCR分析SmGGPPS基因在丹参转基因毛状根中的表达情况，高效液相色谱法测定丹参转基因毛状根中包括隐丹参酮，丹参酮Ⅰ，丹参酮ⅡA的总丹参酮含量，DPPH清除自由基法测定丹参转基因毛状根中丹参酮的抗氧化活性。本发明的优点是：显著提高丹参毛状根中总丹参酮含量；发明效果可靠；丹参酮成本低；生产过程无环境污染。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 上海;31 |
| 申请人： | 上海师范大学 |
| 发明人： | 开国银;许辉;廖攀;周伟;张林 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 2010-08-26T00:00:00+0800 |
| 发布日期： | 2019-01-01T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201010263570.1 |
| 公开号： | CN101962650A |
| 代理机构： | 上海伯瑞杰知识产权代理有限公司 31227 |
| 代理人： | 杨杰民 |
| 分类号： | C12N15/54(2006.01)I |
| 申请人地址： | 200234 上海市徐汇区桂林路100号 |
| 主权项： | 一种转SmGGPPS基因提高丹参毛状根丹参酮含量的方法，步骤如下：(1)从丹参中克隆牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶基因SmGGPPS；将SmGGPPS基因连于表达调控序列，形成含SmGGPPS基因的植物表达载体；(2)将含SmGGPPS基因的植物表达载体转化发根农杆菌，获得含SmGGPPS基因的发根农杆菌菌株；(3)将步骤（3）所构建的发根农杆菌菌株遗传转化丹参叶片，获得PCR检测为阳性的转基因毛状根克隆；(4)半定量RT PCR测定丹参转基因毛状根中SmGGPPS基因的表达；(5)高效液相色谱法测定丹参转基因毛状根中丹参酮含量，筛选丹参酮含量显著提高的转基因丹参毛状根株系；(6)DPPH清除自由基法测定丹参转基因毛状根中丹参酮的抗氧化活性。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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