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蚕微孢子虫SYBR Green荧光定量PCR检测方法及其试剂盒和特异性引物
| 专利名称： | 蚕微孢子虫SYBR Green荧光定量PCR检测方法及其试剂盒和特异性引物 |
| 摘要： | 本发明涉及家蚕微孢子虫(Nosema bombycis，Nb)的检测方法，尤其涉及蚕微孢子虫SYBR Green荧光定量PCR检测方法及其试剂盒和特异性引物。蚕微孢子虫SYBR Green荧光定量PCR检测方法，该方法包括：(1)采集样本；(2)家蚕微孢子虫DNA的提取；(3)SYBR Green荧光定量PCR扩增法对样本进行检测；(4)扩增反应结束后根据反应的荧光强度对相应样本进行分析，从而判断所采集的样本中家蚕微孢子虫的存在，并能对其进行准确定量，实现了对家蚕微孢子虫的实时快速检测。由于该方法引入了特异性扩增引物和SYBR Green Buffer体系，使得微孢子虫检测的灵敏度和特异性得到很大程度的增强，并避免了漏检和误检。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 浙江;33 |
| 申请人： | 浙江省检验检疫科学技术研究院 |
| 发明人： | 何永强;吴姗;鲁兴萌;王素华;帅江冰;董强;张晓峰;徐国群;许赢升;黎昊雁;陈胜 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 2010-09-03T00:00:00+0800 |
| 发布日期： | 2019-01-01T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201010272224.X |
| 公开号： | CN101935707A |
| 代理机构： | 杭州丰禾专利事务所有限公司 33214 |
| 代理人： | 王从友 |
| 分类号： | C12Q1/68(2006.01)I |
| 申请人地址： | 310021 浙江省杭州市文三路2号 |
| 主权项： | 蚕微孢子虫SYBR Green荧光定量PCR检测方法，其特征在于：该方法通过从样本中提取蚕微孢子虫DNA，采用SYBR Green荧光定量PCR扩增法对样本进行检测，扩增反应结束后根据每个扩增反应的荧光强度对相应样本进行分析，从而判断所采集的样本中蚕微孢子虫的存在，并根据阳性标准品对其进行定量；所述的SYBR Green荧光定量PCR扩增法利用SYBR Green I荧光染料，检测的特异性基因为小亚单位核糖体RNA，SEQ ID N0.1所示的基因；设计的特异性引物序列为：上游引物：5’ GGAAAGAAGAAAGGCCCAAG 3’；下游引物：5’ ATCTTCCAGCGTCGTTGATT 3’。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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