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原文传递 一种快速检测乳制品中青霉素/β‑内酰胺酶的试剂盒的制备方法
专利名称: 一种快速检测乳制品中青霉素/β‑内酰胺酶的试剂盒的制备方法
摘要: 本发明公开了一种快速检测乳制品中青霉素/β‑内酰胺酶的试剂盒的制备方法,用于检测乳制品中的青霉素/β‑内酰胺酶,具体制备方法如下:首先采用碳二亚胺法将青霉素与牛血清蛋白(BSA)偶联合成包被原,用紫外扫描鉴定偶联效果;优化胶体金标记的最适抗体浓度及最适pH值,低温高速离心制备金标抗体(抗青霉素单克隆抗体),优化金标抗体的制备过程;确定检测线和质控线上包被抗原及二抗的稀释倍数;试纸条的组装、划线、烘干处理;制备青霉素样品瓶,先用制备好的试纸条确定青霉素的最低检测线,从而合理选择样品瓶中青霉素的含量,优化保护剂的添加量,检测试纸条的灵敏度检测及稳定性,确定最低检测限及保存时间。
专利类型: 发明专利
国家地区组织代码: 黑龙江;23
申请人: 东北农业大学
发明人: 于国萍;范美婧;岳崇慧;孙琪;董良伟
专利状态: 有效
发布日期: 2019-01-01T00:00:00+0800
申请号: CN201710604785.7
公开号: CN107561263A
分类号: G01N33/531(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N33;G01N33/531
申请人地址: 150030 黑龙江省哈尔滨市香坊区木材街59号
主权项: 一种快速检测乳制品中青霉素/β‑内酰胺酶的试剂盒的制备方法,其特征在于所述方法步骤如下:步骤一:碳二亚胺法将青霉素与牛血清蛋白(BSA)偶联合成包被原;步骤二:金标抗体的制备与紫外鉴定;步骤三:包被抗原及二抗的稀释倍数;步骤四:用市售的牛奶配制浓度为0‑1.0μg/mL的牛奶样品,用制备好的试纸条确定青霉素的最低检测线;步骤五:制备青霉素样品瓶,根据最低检测限选择样品瓶中青霉素(0‑100μg/mL)的含量,优化脱脂乳粉的添加量(1%‑50%),用市售的牛奶配制β‑内酰胺酶酶活力为0.005‑1IU的牛奶样品,确定最低检测限及保存时间。
所属类别: 发明专利
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