详情

原文传递津川钝绥螨剖腹卵玻片标本的制作方法

专利名称：	津川钝绥螨剖腹卵玻片标本的制作方法
摘要：	本发明涉及津川钝绥螨剖腹卵玻片标本的制作方法，其特征是采用剖腹的形式人为从津川钝绥螨雌成螨体内获取尚未产出卵并在载玻片上制备剖腹卵染色体的方法，包含待剖腹津川钝绥螨雌成螨的获得与其在载玻片上的放置、津川钝绥螨剖腹卵的获取与其存放、剖腹卵染色体玻片标本制备5个步骤。本发明可以十分巧妙的获得津川钝绥螨剖腹卵并制备染色体，剖腹卵染色体的制备能够为观察津川钝绥螨剖腹卵染色体是单倍体或二倍体及是否发生异质化提供原材料，不同时间段剖腹卵染色体的获得有利于找到最早发生染色体异质化的时间结点，能够对揭示津川钝绥螨的生殖机理提供有力证据。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	安徽;34
申请人：	合肥中保汇农生物科技有限公司
发明人：	王伯明;毕思佳
专利状态：	有效
发布日期：	2019-01-01T00:00:00+0800
申请号：	CN201710808920.X
公开号：	CN107631924A
分类号：	G01N1/30(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N1;G01N1/30
申请人地址：	230041 安徽省合肥市包河经济开发区花园大道17号互联网产业园一号楼4层
主权项：	津川钝绥螨剖腹卵玻片标本的制作方法，其特征是采用剖腹的形式人为从津川钝绥螨雌成螨体内获取尚未产出卵并在载玻片上制备剖腹卵染色体的方法，包含待剖腹津川钝绥螨雌成螨的获得与其在载玻片上的放置、津川钝绥螨剖腹卵的获取与其存放、剖腹卵染色体玻片标本制备5个步骤，除观察染色体外，所有操作均在体式显微镜下进行，具体操作方法为：（1）待剖腹津川钝绥螨雌成螨的获得：从津川钝绥螨的饲养群体中挑取津川钝绥螨的卵单独饲养至成螨，然后将一雌一雄放在饲养小室内进行配对，初羽化的雌雄津川钝绥螨会很快进行交配，待交配完成后，继续给雌成螨提供充足的猎物，12‑15小时雌成螨腹部膨大有卵后即获得待剖腹津川钝绥螨雌成螨；（2）待剖腹津川钝绥螨雌成螨在载玻片上的放置：滴一滴清水到载玻片上，挑取待解剖的雌成螨放在载玻片上的清水中，并用昆虫针和细毛笔保持雌成螨背面朝上，清水滴入量不要过多，避免雌成螨漂浮在水层上，确保雌成螨仍然能够接触到载玻片；（3）津川钝绥螨剖腹卵的获取：先用3号粗昆虫针按住津川钝绥螨雌成螨的鄂体部分，再用0号细昆虫针从津川钝绥螨头部开始向腹部轻轻挤压至腹部破裂，即可看见津川钝绥螨剖腹卵，随后用0号细毛笔尖部将卵周围的组织轻轻拨开，此步骤一定要在清水中进行，防止卵失水干瘪；（4）津川钝绥螨剖腹卵的存放：津川钝绥螨剖腹卵处于水中时间过长容易破裂，需要快速用0号细毛笔将剖腹卵从水中小心挑出后放置于100％的酒精中存放备用，即获得津川钝绥螨剖腹卵；（5）剖腹卵染色体玻片标本制备：用胶头滴管滴入一滴0.075mol/L的氯化钾溶液于载玻片的中央位置，然后用0号细毛笔将取出的津川钝绥螨剖腹卵放置于载玻片上的氯化钾溶液中，常温下放置30分钟，再用移液枪或胶头滴管将氯化钾溶液吸走或将剖腹卵用细毛笔转移到新的载玻片上，用0号昆虫针或更细的针状工具将剖腹卵轻轻弄破，并快速往载玻片上滴入一滴新配置的固定液（甲醇：冰醋酸=3:1），固定30分钟，在此过程中至少补充滴加3次固定液（因为固定液挥发速度快），待固定液干燥后，往载玻片上滴入吉姆萨染液（原液1份，PH7.2磷酸缓冲液9份稀释），常温下染色60分钟，最后用清水将染液冲洗掉，经自然干燥或用吹风机吹干后，往载玻片上被染上色的位置上面滴入一滴优巴拉尔，然后盖上盖玻片，并用记号笔对染上色的部位进行圈注以方便观察，待样品固定好后在光学显微镜下即可观察津川钝绥螨剖腹卵染色体。
所属类别：	发明专利