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原文传递 一种新鲜烟叶中内源性植物激素的检测方法
专利名称: 一种新鲜烟叶中内源性植物激素的检测方法
摘要: 本申请属于烟草代谢组学技术领域,具体涉及一种新鲜烟叶中内源性植物激素的检测方法专利申请事宜。该方法可对新鲜烟叶中的SA、IAA、IBA、JA、ABA、GA、BR中一种或任意几种组合同时进行检测,该方法包括:对预处理后新鲜烟叶进行萃取,制备待检液,液相色谱‑串联质谱检测分析等操作。本申请采用LC‑MS/MS法进行检测时,灵敏度较高,且可单独测一种、或者同时测几种、甚至同时对7种内源性植物激素进行定性或定量测定。再者,由于正负离子选择性检测模式选择性好、干扰小、效率高,尤其是检测一个样本的时间仅10 min,因此本发明能有效地提高分析效率,非常适合复杂基质中低含量目标物的分析。
专利类型: 发明专利
国家地区组织代码: 河南;41
申请人: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
发明人: 刘萍萍;周会娜;陈千思;罗朝鹏;翟妞;王晨;张慧;郑庆霞;金立锋;徐国云;卢鹏;陈霞
专利状态: 有效
发布日期: 2019-01-01T00:00:00+0800
申请号: CN201810776131.7
公开号: CN108918710A
代理机构: 郑州联科专利事务所(普通合伙) 41104
代理人: 时立新
分类号: G01N30/02(2006.01)I;G01N30/06(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N30;G01N30/02;G01N30/06
申请人地址: 450001 河南省郑州市高新区枫杨街2号
主权项: 1.一种新鲜烟叶中内源性植物激素的检测方法,其特征在于,该方法可对新鲜烟叶中的SA、IAA、IBA、JA、ABA、GA、BR中一种、两种任意组合、三种任意组合、四种任意组合、五种任意组合、六种任意组合或者七种同时进行检测;具体操作包括如下步骤:(一)对预处理后新鲜烟叶进行萃取首先,对待测新鲜烟叶进行预处理,具体而言:先用液氮速冻,冷冻干燥后,再用粉碎机打碎备用;其次,用萃取溶剂对打碎后新新鲜烟叶进行萃取;(二)制备待检液分离获得步骤(一)中含有植物激素的萃取相,冷冻、离心,取上清液过固相萃取小柱富集后收集液体,将该液体冷冻干燥;将冷冻干燥后的样品复溶后离心,取上清液备用待检;(三)液相色谱‑串联质谱检测分析液相色谱、质谱条分析时,具体参数参考设置如下:色谱柱:采用SB‑C18超高压柱,柱的规格为:2.1 mm×100 mm, 1.8 μm;色谱检测分析时:柱温30℃;流动相为:A,含0. 1%甲酸的水;B,含0. 1%甲酸的甲醇;流速:0.3 mL/ min;进样量:1μL;梯度洗脱:0 min:95% A+5% B;0.2 min:52% A+48% B;7 min:43% A+57% B;7.5 min:4% A+96% B;10 min:100% B;质谱检测分析时:离子源:电喷雾离子源,正/负离子扫描,多反应检测扫描;干燥气温度:290℃;干燥气流量:12 L/min;雾化器压力:40 psi;鞘气温度:200℃,鞘气流量:11L/min;正离子电离模式下毛细管电压:4 kV;负离子电离模式下喷雾电压:3.5 kV。
所属类别: 发明专利
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