原文传递
一种高性能时间分辨荧光微球的制备方法和应用
| 专利名称： | 一种高性能时间分辨荧光微球的制备方法和应用 |
| 摘要： | 本发明涉及检测技术领域，尤其是一种高性能时间分辨荧光微球的制备方法和应用，包括以下步骤：(1)高稳定性聚苯乙烯纳米微球的制备；(2)不同离子掺杂铕离子螯合物的制备；(3)高荧光强度纳米微球的制备；(4)荧光微球表面的去空间位阻效应修饰。本发明的时间分辨荧光纳米微球具有荧光强度高、空间位阻效应低、稳定性好等特点，基于该微球开发的时间分辨荧光免疫层析技术，具有检测灵敏度高、线性范围宽、精密度高、样本适用范围广等优点，可实现待测物质的超敏、快速、定量检测和分析。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 江苏;32 |
| 申请人： | 南京微测生物科技有限公司 |
| 发明人： | 肖理文;徐秀;赵皖;曹建伟 |
| 专利状态： | 有效 |
| 发布日期： | 2019-01-01T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201810217199.1 |
| 公开号： | CN108445219A |
| 代理机构： | 常州佰业腾飞专利代理事务所(普通合伙) 32231 |
| 代理人： | 高姗 |
| 分类号： | G01N33/577(2006.01)I;G01N33/558(2006.01)I;G01N21/64(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N33;G01N21;G01N33/577;G01N33/558;G01N21/64 |
| 申请人地址： | 210061 江苏省南京市江北新区新锦湖路31-号中丹生态生命科学产业园一期B座1307室 |
| 主权项： | 1.一种可提高微球稳定性和荧光强度、降低空间位阻效应的高灵敏度时间分辨荧光微球的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)高稳定性聚苯乙烯纳米微球的制备：取苯乙烯单体和丙烯酸单体溶解于含十二烷基磺酸钠和葡聚糖的去离子水中，搅拌均匀，然后用高纯氮气将空气除尽，密封加热至75℃，加入过硫酸钾，密封隔氧搅拌反应12h后，降至室温，然后将反应液用whatman 2v滤纸过滤，过Sephadex G‑200分子筛柱，收集最先洗脱下来的组分并浓缩，加入0.05％的迭氮钠4℃保存；(2)不同离子掺杂铕离子螯合物的制备：用甲醇分别配制三氯化铕、三氯化镱、三氯化镥、β‑二酮、三辛基氧化膦溶液，混匀密封保存；取一定量的三氯化铕溶液、三氯化镱溶液、三氯化镥溶液混合均匀，再加入β‑二酮和三辛基氧化膦溶液，强力混匀并静置过夜；(3)高荧光强度纳米微球的制备：取步骤(1)中制备的高稳定性聚苯乙烯纳米微球，加入去离子水和丙酮的混合液中，搅拌均匀，加入步骤(2)制备的不同离子掺杂铕离子螯合物，37℃恒温搅拌反应24h，最后通过减压蒸馏方式将溶液中的有机溶剂去除，过Sephadex G‑200分子筛柱，收集最先洗脱下来的组分并浓缩，加入0.05％的迭氮钠4℃保存；(4)荧光微球表面的去空间位阻效应修饰：取步骤(3)中制备的荧光微球，溶于硼酸缓冲液中，超声处理，然后缓慢加入碳二亚胺EDC和N‑羟基珀酰亚胺NHS，室温匀速搅拌活化后，离心，收集沉淀，用硼酸缓冲液反复洗涤离心2次；将活化的荧光微球复溶于硼酸缓冲液中，加入NH2‑PEG(N)‑COOH溶液，室温匀速搅拌，离心、清洗，最后用硼酸缓冲液复溶，加入0.05％的迭氮钠4℃避光保存。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
检索历史
应用推荐
