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原文传递 一种3E6单抗腹水包被ELISA板的试剂盒的建立方法
专利名称: 一种3E6单抗腹水包被ELISA板的试剂盒的建立方法
摘要: 本发明公开了一种3E6单抗腹水包被ELISA板的试剂盒的建立方法,包括以下步骤:应用方阵法确定3E6单抗腹水包被ELISA板浓度,37℃ 2小时,弃液体PBST洗3次;5%的脱脂奶粉300ul 37℃ 1小时,PBST洗3次;加小反刍兽疫Nigera75/1细胞毒(1:8),37℃ 1小时,PBST洗3次;加兔抗V蛋白血清1:100,同时设VERO细胞上清做对照,37℃ 45min,PBST洗3次;加兔二抗稀释浓度1:10000,100ul/孔,25℃ 45min,PBST洗3次;加TMB显色液100ul/孔,25℃ 3‑5min;2M硫酸终止液100ul/孔,450nm测ELISA OD值。
专利类型: 发明专利
国家地区组织代码: 新疆;65
申请人: 新疆畜牧科学院兽医研究所(新疆畜牧科学院动物临床医学研究中心)
发明人: 陆桂丽;黄炯;沙依兰·卡伊扎;苗书魁;马文戈;王杰;汪萍;夏俊
专利状态: 有效
发布日期: 2019-01-01T00:00:00+0800
申请号: CN201811046536.1
公开号: CN108957012A
代理机构: 西安研创天下知识产权代理事务所(普通合伙) 61239
代理人: 杨凤娟
分类号: G01N33/68(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N33;G01N33/68
申请人地址: 830011 新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市高新技术产业开发区工业园北区冬融街726号
主权项: 1.一种3E6单抗腹水包被ELISA板的试剂盒的建立方法,其特征在于,包括以下步骤:⑴应用方阵法确定3E6单抗腹水包被ELISA板浓度为0.5ul:2ml,37℃包被2小时,弃去液体PBST洗涤3次,3min/次;⑵5%的脱脂奶粉300ul 37℃封闭1小时,弃去封闭液PBST洗涤3次,3min/次;⑶加小反刍兽疫Nigera75/1细胞毒,筛选检测的最终浓度是1:8,37度1小时,弃去液体PBST洗涤3次,3min/次;⑷加兔抗V蛋白血清1:100,同时设VERO细胞上清做对照,37℃作用45min,弃去血清PBST洗涤3次,3min/次;⑸加抗兔二抗稀释浓度1:10000,100ul/孔,25℃作用45min,弃去液体PBST洗涤3次,3min/次;⑹加TMB显色液100ul/孔,25℃作用3‑5min;⑺2M硫酸终止液100ul/孔,450nm测定ELISAOD值。
所属类别: 发明专利
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