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原文传递 一种分析Rab8调节Klotho表达在非小细胞肺癌中的作用的方法
专利名称: 一种分析Rab8调节Klotho表达在非小细胞肺癌中的作用的方法
摘要: 本发明公开了一种分析Rab8调节Klotho表达在非小细胞肺癌中的作用的方法,包括分析Rab8通过翻译后环节对调节膜表面Klotho表达的作用、分析Rab8调控Klotho膜表面表达在Wnt信号通路及EMT中的作用以及分析Rab8调控Klotho膜表面表达在非小细胞肺癌细胞功能学方面的作用。本发明首次发现,Rab8与Klotho结合,通过蛋白生物合成后途径促进其向膜表面转运,提高Klotho膜表面分布水平,抑制Wnt/β‑catenin信号激活,抑制细胞发生上皮‑间质转化,从而抑制肺癌细胞迁移、侵袭。因此,Rab8具有主动调节Klotho功能。
专利类型: 发明专利
国家地区组织代码: 江苏;32
申请人: 江苏省人民医院(南京医科大学第一附属医院)
发明人: 吴剑卿;陈波;赵卫红
专利状态: 有效
发布日期: 2019-01-01T00:00:00+0800
申请号: CN201811036353.1
公开号: CN109030835A
代理机构: 常州市夏成专利事务所(普通合伙) 32233
代理人: 沈毅
分类号: G01N33/68(2006.01)I;C12Q1/6851(2018.01)I;G;C;G01;C12;G01N;C12Q;G01N33;C12Q1;G01N33/68;C12Q1/6851
申请人地址: 210000 江苏省南京市广州路300号
主权项: 1.一种分析Rab8调节Klotho表达在非小细胞肺癌中的作用的方法,其特征在于:包括以下步骤:(1)分析Rab8通过翻译后环节对调节膜表面Klotho表达的作用,包括插入和内吞两个相反的受体转运过程的分析,利用切割表面生物素标记技术检测Klotho内化,同时利用一种基于荧光的活细胞比率循环分析方法,以测量Klotho的再循环利用,结果表明Rab8并不参与Klotho内化;(2)分析Rab8调控Klotho膜表面表达在Wnt信号通路及EMT中的作用,包括利用Western blot检测、免疫细胞化学方法和定量RT‑PCR检测分析Rab8调控Klotho膜表面表达在Wnt信号通路中的作用,利用Western blot检测分析Rab8调控Klotho膜表面表达在EMT中的作用;(3)分析Rab8调控Klotho膜表面表达在非小细胞肺癌细胞功能学方面的作用,包括CCK8检测实验、细胞集落形成实验、划痕实验、Transwell侵袭实验和移植瘤实验。
所属类别: 发明专利
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