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原文传递猪瘟病毒E2蛋白灭活疫苗免疫效果评价方法

专利名称：	猪瘟病毒E2蛋白灭活疫苗免疫效果评价方法
摘要：	本发明公开了一种猪瘟病毒E2蛋白灭活疫苗免疫效果评价方法，第一步是在猪瘟净化达标的猪场内建立一个猪瘟病毒E2蛋白灭活疫苗免疫效果评价的基准曲线，第二步是在第一步所述的猪场内做一个猪瘟病毒E2蛋白灭活疫苗免疫效果评价的参比曲线，第三步是将参比曲线与基准曲线放在同一坐标系内做几何学初步评价和进一步的统计学评价。本发明是一种严格的血清学评价方法，具有特别高的准确性，通过猪场的猪瘟病毒E2蛋白灭活疫苗免疫效果评价，在各猪场的生物安全管理水平及猪场猪群免疫系统功能一致的状况下，可以准确的评价和判定某种猪瘟病毒E2蛋白灭活疫苗产品的优劣，从而为该种疫苗的选择提供了可靠的方法，进而可促进猪瘟净化的实施和完成。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	陕西;61
申请人：	韩永刚
发明人：	韩永刚;张智鹏;杨光敏;赵力;罗迪克;胡小宏;赵玥;刘霁霄;蒋宏伟
专利状态：	有效
发布日期：	2019-01-01T00:00:00+0800
申请号：	CN201810883855.1
公开号：	CN109061160A
分类号：	G01N33/569(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N33;G01N33/569
申请人地址：	723000 陕西省汉中市汉台区北团结街203号
主权项：	1.一种猪瘟病毒E2蛋白灭活疫苗免疫效果评价方法，其特征在于：第一步是建立一个猪瘟病毒E2蛋白灭活疫苗免疫效果评价的基准曲线，所述基准曲线的建立是按下述步骤依次完成，(1.1)在猪瘟净化达标的猪场或SPF无特定病原猪场内，对商品猪用标准的猪瘟病毒E2蛋白灭活疫苗免疫后，按0、14、28、56、84、112、140、168、196日进行血样采集，每个采样日的血样为3‑5份，血清分离后冷冻保存，(1.2)解冻血清，检测所有血清的E0抗体，剔除E0抗体为阳性的血清，(1.3)检测剩余血清样品的E2抗体，计算出每个采样日多份血清样品中E2抗体效价的平均值H，(1.4)计算出相邻两个采样日H值两点连线下的面积——Sn，计算公式为：Sn＝(Hn+Hn‑1)×L/2，式中：n为采样日，n‑1为上一个采样日，Hn为某个采样日E2抗体效价的平均值，Hn‑1为上一个采样日E2抗体效价的平均值，L为相邻两个采样日之间的间隔天数，(1.5)依据步骤(4)计算的Sn，计算出对应于各采样日猪瘟E2抗体效价‑‑时间曲线下累加面积Mn，计算式为Mn＝Sn+Sn‑1+Sn‑2+…，式中：Sn‑1为上一个采样日的E2抗体效价的平均值与它前一个采样日的E2抗体效价的平均值两点连线下的面积，Sn‑2为n‑2采样日的E2抗体效价的平均值与它前一个采样日的E2抗体效价的平均值两点连线下的面积，(1.6)以n为横坐标，Mn为纵坐标，做猪瘟E2抗体效价‑‑时间曲线下累加面积‑‑时间图，即生成基准曲线；第二步是在上述步骤(1.1)所述的猪场内做一个猪瘟病毒E2蛋白灭活疫苗免疫效果评价的参比曲线，所述参比曲线的完成步骤是：(2.1)对商品猪用待评估的猪瘟病毒E2蛋白灭活疫苗免疫后，按0、14、28、56、84、112、140、168、196日进行血样采集，每个采样日的血样为3‑5份，血清分离后冷冻保存，(2.2)与上述步骤(1.2)相同，(2.3)与上述步骤(1.3)相同，(2.4)与上述步骤(1.4)相同，(2.5)与上述步骤(1.5)相同，(2.6)以n为横坐标，Mn为纵坐标，做猪瘟E2抗体效价‑‑时间曲线下累加面积‑‑时间图，即生成参比曲线；第三步是将参比曲线与基准曲线放在同一坐标系内进行比较和评价，首先是做几何学初步评价：先看参比曲线与基准曲线的重合度，再看参比曲线是在基准曲线的左上侧还是右下侧，最后看参比曲线中免疫112天后的线段是否有相对于基准曲线向下偏离的形态，若重合度严重不好的，可以初步评价为该疫苗不合格，然后做进一步统计学评价：对于与基准曲线的重合度较好的参比曲线，而且参比曲线中免疫112天后的线段相对于基准曲线没有明显向下偏离的参比曲线，将参比曲线112天后的Mn数据与基准曲线上对应的Mn数据进行两者的统计学方差分析，若差异不显著，即P≥0.05的，可评价且判定为该猪场的猪瘟病毒E2蛋白灭活疫苗免疫效果达标，进而即可确定使用在该猪场的猪瘟病毒E2蛋白灭活疫苗合格；如果差异较大，即P≤0.05的，可评价且判定为该猪场的猪瘟病毒E2蛋白灭活疫苗免疫效果不达标，进而即可确定使用在该猪场的猪瘟病毒E2蛋白灭活疫苗不合格。
所属类别：	发明专利