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一种基于免疫磁分离技术和生物发光技术的大肠杆菌的检测方法
| 专利名称： | 一种基于免疫磁分离技术和生物发光技术的大肠杆菌的检测方法 |
| 摘要： | 本发明公开了一种基于免疫磁分离技术和生物发光技术的大肠杆菌的检测方法，包括如下步骤：1)将生物素与大肠杆菌抗体偶联，得到生物素化的大肠杆菌抗体；2)生物素化的大肠杆菌抗体和链霉亲和素修饰的磁性纳米颗粒混合，制备磁性纳米探针；3)使用PBS缓冲液冲洗磁性纳米探针后，将磁性纳米探针加入到大肠杆菌溶液中，使大肠杆菌被磁性纳米探针捕获；4)捕获大肠杆菌后的溶液置于离心管中，将捕获有大肠杆菌的磁性纳米探针进行富集；5)采用清洗液对富集的样品进行清洗，得到用于ATP发光的溶液，磁性纳米探针被磁性分离架富集分离；向裂解后的溶液中加入荧光素和Mg2+，通过检测溶液的荧光强度，计算得到大肠杆菌的数量。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 山东;37 |
| 申请人： | 山东师范大学 |
| 发明人： | 王春兴;张志杰;杨志政;韩旭;徐元达 |
| 专利状态： | 有效 |
| 发布日期： | 2019-01-01T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201810224936.0 |
| 公开号： | CN108507987A |
| 代理机构： | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 |
| 代理人： | 张晓鹏 |
| 分类号： | G01N21/64(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N21;G01N21/64 |
| 申请人地址： | 250014 山东省济南市历下区文化东路88号 |
| 主权项： | 1.一种基于免疫磁分离技术和生物发光技术的大肠杆菌的检测方法，其特征在于：包括如下步骤：1)将生物素与大肠杆菌抗体偶联，得到生物素化的大肠杆菌抗体；2)生物素化的大肠杆菌抗体和链霉亲和素修饰的磁性纳米颗粒混合，制备磁性纳米探针；3)使用PBS缓冲液冲洗磁性纳米探针后，将磁性纳米探针加入到大肠杆菌溶液中，培养，使大肠杆菌被磁性纳米探针捕获；4)捕获大肠杆菌后的溶液置于离心管中，在离心管的一侧放置磁性分离架，将捕获有大肠杆菌的磁性纳米探针进行富集；5)采用清洗液对步骤4)中富集的样品进行清洗，得到用于ATP发光的溶液，磁性纳米探针被磁性分离架富集分离；6)向步骤5)中得到的用于ATP发光的溶液中加入ATP擦除剂设定时间后，去除溶液中体细胞和游离ATP，再加入细菌裂解剂，对大肠杆菌进行裂解；7)向步骤6)中裂解后的溶液中加入荧光素和Mg2+，通过检测溶液的荧光强度，计算得到大肠杆菌的数量。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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