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测定石墨烯在水稻体内亚细胞分布的方法
| 专利名称： | 测定石墨烯在水稻体内亚细胞分布的方法 |
| 摘要： | 本发明公开了一种测定石墨烯在水稻体内亚细胞分布的方法，属于纳米技术在农业领域的应用开发。其步骤为：对水稻种子进行发芽处理，发芽后的水稻进行石墨烯暴露；分别收集水稻植株的茎和叶部分，将其剪碎、液氮冷冻后充分研磨；将预冷的匀浆介质加入到研磨后的组织中制备成匀浆液；通过差速离心法将匀浆液分离出5个部分：细胞壁、叶绿体、细胞核、线粒体和可溶性部分；各组分经生物氧化仪充分燃烧，收集生成的二氧化碳，通过液体闪烁计数器测定各组分中的石墨烯含量。为了评估离心过程中细胞器与石墨烯可能存在的相互影响，设计了三个对照实验以完成该目标。本方法实现了水稻植株亚细胞内石墨烯的准确定量。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 江苏;32 |
| 申请人： | 南京大学;蜻蜓农业研究院(江苏)有限公司 |
| 发明人： | 毛亮;卢坤;吴伟 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请号： | CN201811066613.X |
| 公开号： | CN109187401A |
| 代理机构： | 江苏斐多律师事务所 32332 |
| 代理人： | 张佳妮;王长征 |
| 分类号： | G01N21/33(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N21 |
| 申请人地址： | 210093 江苏省南京市鼓楼区汉口路22号 |
| 主权项： | 1.一种测定石墨烯在水稻体内亚细胞分布的方法，其步骤包括：(1)对水稻种子进行发芽处理，待种子萌发后，挑选芽和根系发育一致的幼苗分别转移到含有石墨烯母液和不含有石墨烯母液中进行培育，其中在不含石墨烯母液中培育的幼苗为空白对照组；(2)对上述水稻幼苗培育7‑21天，培育结束后，先将其剪碎、液氮冷冻后充分研磨；待液氮蒸发完毕后加入预冷的匀浆介质继续研磨，随后将匀浆液倒入离心管中，再用匀浆介质清洗研钵数次，清洗液均汇入盛有匀浆液的离心管中，将离心管中的液体摇匀，过滤，滤液用作随后的离心；(3)通过差速离心法将步骤(2)收集的匀浆液分离出5个部分：细胞壁、叶绿体、细胞核、线粒体和可溶性部分；(4)检测步骤(3)得到的在石墨烯溶液中培育的幼苗的5个组分的石墨烯含量；(5)离心管中分别加入步骤(3)中获得的空白对照组的5个亚细胞组分，然后滴加石墨烯母液振荡摇匀，再分别按照权利要求1步骤(3)中的离心条件进行离心，最后分别测定5个亚细胞组分匀浆介质中的石墨烯含量；(6)将同样含量的石墨烯母液滴加到5份同样体积的匀浆介质不含亚细胞组分的样品中振荡摇匀，再分别按照步骤(3)中的离心条件进行离心，最后测定滴加石墨烯母液的匀浆介质中石墨烯含量；(7)将步骤(6)中得到的石墨烯含量减去步骤(5)中的得到的石墨烯含量即为细胞器吸附的石墨烯的含量；(8)石墨烯在水稻体内亚细胞的绝对含量为步骤(4)中的石墨烯含量减去步骤(7)得到的石墨烯含量。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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