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原文传递 一种5-苯基-1-(对甲基苯基)-1H-三唑与血清作用的差异蛋白检测方法
专利名称: 一种5-苯基-1-(对甲基苯基)-1H-三唑与血清作用的差异蛋白检测方法
摘要: 本发明涉及一种5‑苯基‑1‑(对甲基苯基)‑1H‑三唑与血清作用的差异蛋白检测方法,包括:将血清样品与5‑苯基‑1‑(对甲基苯基)‑1H‑1,2,3‑三唑化合物混合;除去高丰度蛋白;Bradford法定量测定蛋白浓度;进行双向电泳实验;胶片图像处理及质谱鉴定等步骤。本发明还提供一种5‑苯基‑1‑(对甲基苯基)‑1H‑三唑的制备方法。
专利类型: 发明专利
国家地区组织代码: 海南;46
申请人: 海南师范大学
发明人: 何文英;吴禄勇;陈光英;冯华杰;刘荣强;段红叶
专利状态: 有效
申请号: CN201811226159.X
公开号: CN109187403A
代理机构: 北京中济纬天专利代理有限公司 11429
代理人: 于跃
分类号: G01N21/33(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N21
申请人地址: 571158 海南省海口市龙昆南路99号
主权项: 1.一种5‑苯基‑1‑(对甲基苯基)‑1H‑1,2,3‑三唑与血清作用检测差异蛋白的方法,其特征在于包括如下步骤:(1)将血清蛋白与5‑苯基‑1‑(对甲基苯基)‑1H‑1,2,3‑三唑化合物溶液混合均匀得样品a,恒温培养得样品b;(2)去除样品b中的高丰度蛋白得样品c;(3)用Bradford法对样品c的蛋白浓度进行定量;(4)进行双向电泳实验①按每胶条蛋白质上样量1.3mg,上样总体积为455uL的标准水化上样,进行第一向等电聚焦;②第一向等电聚焦完毕后,将胶条平衡后转到聚丙烯酰胺凝胶进行第二垂直电泳实验;③电泳结束后进行考马斯亮蓝染色,脱色,保存,扫描分析;(5)胶片图像处理及质谱鉴定①凝胶图像分析,筛选出表达异常的蛋白点并做上标记;②差异蛋白点的酶解及质谱鉴定;(6)结果利用ImageMaster5.0凝胶图像分析软件获得20个差异表达蛋白质点,再通过NCBInr的Blast的检索,确定了其中1‑16、18‑20号差异表达蛋白的信息见下表,
所属类别: 发明专利
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