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原文传递 一种提高胶乳比浊试剂检测灵敏度的方法
专利名称: 一种提高胶乳比浊试剂检测灵敏度的方法
摘要: 本发明公开了一种提高胶乳比浊试剂检测灵敏度的方法,通过在偶联于羧基胶乳表面的抗体两条重链间,增加一个氨基酸支架,来增加抗体两个Fab之间的空间距离,从而减小胶乳比浊过程中抗体与抗原结合的空间位阻,提高灵敏度;本发明对采用常规羧基胶乳偶联抗体后的试剂进行改进,放大工艺成熟,利于推广。
专利类型: 发明专利
国家地区组织代码: 上海;31
申请人: 柏荣诊断产品(上海)有限公司
发明人: 王钊;王金凤;蒋欣
专利状态: 有效
申请号: CN201811426490.6
公开号: CN109521192A
代理机构: 北京慕达星云知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11465
代理人: 李冉
分类号: G01N33/53(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N33
申请人地址: 200444 上海市宝山区丰翔路1919号2幢5楼
主权项: 1.一种提高胶乳比浊试剂检测灵敏度的方法,其特征在于,具体步骤如下:(1)将双链单特异性抗体与羧基胶乳共价偶联,在封闭前的胶乳溶液中加入尿素,使胶乳溶液中尿素终浓度达到10‑20mM/L;37度恒温摇床,120rpm温和旋转混匀孵育1小时,获得胶乳试剂;(2)将中部酸性,两端含半胱氨酸的环肽的氨基酸支架,室温溶解于支架溶解液中;所述氨基酸支架的用量为:每mg抗体对应0.010‑0.020mg氨基酸支架;所述氨基酸支架序列如式Ⅰ所示,K为赖氨酸,C为半胱氨酸,X为3‑4个自由组合的酸性氨基酸;(3)对步骤(1)获得的胶乳试剂去除50%背景缓冲液,即换液50%,加入步骤(2)所述溶解有氨基酸支架的溶液,使每mg抗体对应0.010‑0.020mg氨基酸支架并混匀;向前述混合有氨基酸支架的胶乳试剂中滴加50mmol/L的过硫酸钾溶液,所述过硫酸钾的摩尔量为步骤(1)中尿素量的35‑50%;(4)将步骤(3)滴加了过硫酸钾溶液的胶乳试剂于37度恒温摇床,120rpm温和旋转混匀孵育30min;(5)将步骤(4)孵育后的胶乳试剂进行封闭并换液清洗去除残留氨基酸支架、尿素和过硫酸钾,制得成品试剂R2。
所属类别: 发明专利
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