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原文传递 25-羟基维生素D2和25-羟基维生素D3的HPLC-MS/MS非衍生检测法

专利名称：	25-羟基维生素D2和25-羟基维生素D3的HPLC-MS/MS非衍生检测法
摘要：	本发明提供一种25‑羟基维生素D2和25‑羟基维生素D3的HPLC‑MS/MS非衍生检测法。具体地，本发明的检测试剂盒包括(1)对照品、(2)质控品、(3)同位素内标提取液、(4)沉淀剂和(5)流动相添加剂。利用上述检测盒以及配备有二位六通阀、捕获色谱柱和分析色谱柱的高效液相色谱质谱联用仪对待测样品进行检测。本方法用时较短，检测效率高。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	上海;31
申请人：	上海可力梅塔生物医药科技有限公司
发明人：	朱监宝;官培龙
专利状态：	有效
申请日期：	2018-01-22T00:00:00+0800
发布日期：	2019-07-30T00:00:00+0800
申请号：	CN201810059510.4
公开号：	CN110068641A
代理机构：	上海一平知识产权代理有限公司
代理人：	徐迅;崔佳佳
分类号：	G01N30/88(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	200433 上海市杨浦区翔殷路128号上海理工大学国家大学科技园1号楼C座312-313室
主权项：	1.一种25-羟基维生素D2和25-羟基维生素D3高效液相色谱质谱联用非衍生检测试剂盒，其特征在于，包括： (1)对照品； (2)质控品； (3)同位素内标提取液； (4)沉淀剂；和 (5)流动相添加剂；所述的对照品和质控品中含有25-羟基维生素D2和25-羟基维生素D3，同位素内标提取液为25-羟基维生素D3-d6。 2.如权利要求1中所述的试剂盒，其特征在于，所述同位素内标提取液的浓度为15ng/ml～25ng/ml。 3.如权利要求1中所述的试剂盒，其特征在于，所述的沉淀剂为乙腈。 4.如权利要求1中所述的试剂盒，其特征在于，所述的流动相添加剂为饱和一元羧酸。 5.如权利要求3中所述的试剂盒，其特征在于，所述的饱和一元羧酸选自下组：甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、或其组合。 6.一种液相配件设备，其特征在于，所述的设备包括：二位六通阀、捕获色谱柱和分析色谱柱；其中，所述的二位六通阀用于连接捕获色谱柱和分析色谱柱；所述的捕获色谱柱用于目标化合物的采集并分离干扰物，所述的分析色谱柱目标化合物的色谱分离。 7.一种高效液相色谱质谱联用仪，其特征在于，其包括如权利要求6中所述的液相配件设备。 8.一种25-羟基维生素D2和25-羟基维生素D3高效液相色谱质谱联用非衍生检测方法，其特征在于，所述的方法包括步骤： (i)提供样品、沉淀剂和同位素内标提取液，所述的样品为待检测血清样品、对照品、或质控品； (ii)对所述的样品与沉淀剂和同位素内标提取液进行混合处理，混合后的溶液在2～8℃下培育10～15分钟； (iii)对步骤(ii)得到的培育后溶液进行离心处理，获取上清液； (iv)在如权利要求7所述的高效液相色谱质谱联用仪中，对上清液进行检测分析。 9.如权利要求8中所述的检测方法，其特征在于，步骤(ii)中所述的沉淀剂为乙腈，所述的同位素内标提取液为浓度为15ng/ml～25ng/ml的25-羟基维生素D3-d6溶液，并且所述的样品、沉淀剂和同位素内标提取液的体积比为2～6︰0.5～2︰6～10。 10.如权利要求9所述的检测方法，其特征在于，所述的待检测血清样品包括：人血清样品、牛血清样品、大鼠血清样品、小鼠血清样品、兔血清、牛血清。
所属类别：	发明专利