详情

原文传递一种基于桑葚状Au@PtPd介孔棒标记的电化学传感器的制备方法及应用

专利名称：	一种基于桑葚状Au@PtPd介孔棒标记的电化学传感器的制备方法及应用
摘要：	本发明属于新型功能材料与生物传感检测技术领域，提供了一种基于桑葚状Au@PtPd介孔棒标记的电化学传感器的制备方法及应用；具体是采用Au@PtPd MNs作为检测抗体标记物，实现了黄曲霉毒素的检测，具有特异性强，灵敏度高，检测限低，对黄曲霉毒素的早期检测具有重要的科学意义和应用价值。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	山东;37
申请人：	山东理工大学
发明人：	李月云;贾翌雷;张春燕;禹晓东;李新进;徐振;董云会
专利状态：	有效
申请日期：	2019-04-27T00:00:00+0800
发布日期：	2019-07-30T00:00:00+0800
申请号：	CN201910346855.2
公开号：	CN110068601A
分类号：	G01N27/327(2006.01);G;G01;G01N;G01N27
申请人地址：	255086 山东省淄博市高新技术开发区高创园A座313室
主权项：	1.一种基于桑葚状Au@PtPd介孔棒标记的电化学传感器的制备方法，其特征在于，步骤如下：（1）将直径为4 mm的玻碳电极用Al2O3抛光粉打磨成镜面，超纯水清洗干净；（2）将6 µL、0.5 ~ 2.5 mg/mL的MoS2/CuS-Au溶液滴涂于上述电极表面，室温下晾干，超纯水冲洗电极表面，晾干；（3）继续将6 µL、8 ~ 12 µg/mL的黄曲霉毒素捕获抗体Ab1滴加到电极表面，超纯水冲洗，4 °C冰箱中干燥；（4）继续将3 µL、0.5 ~ 1.5 mg/mL、质量分数为1%的牛血清白蛋白BSA溶液滴加到电极表面，用以封闭电极表面的非特异性活性位点，超纯水冲洗电极表面，除去未结合的BSA，4°C冰箱中晾干；（5）继续滴加6 µL、10 pg/mL ~ 50 ng/mL的一系列不同浓度的黄曲霉毒素抗原Ag溶液，超纯水冲洗电极表面，4 °C冰箱中晾干；（6）继续滴加6 µL、1.0 ~ 3.0 mg/mL的检测抗体孵化物Au@PtPd MNs-Ab2溶液于电极表面，置于4 °C冰箱中孵化40 min，超纯水冲洗、晾干，制得一种Au@PtPd MNs标记的电化学传感器。 2.如权利要求1所述的一种基于桑葚状Au@PtPd介孔棒标记的电化学传感器的制备方法，所述MoS2/CuS-Au溶液的制备，其特征在于，步骤如下：（1）金纳米粒子溶液的制备将1 ~ 3 mL、质量分数为1%氯金酸和99 mL超纯水混合，在100 °C下回流15 min，然后加入1 ~ 3 mL、10 mg/mL的柠檬酸钠溶液，并保持搅拌10 ~ 30 min，制得均匀分散的酒红色金纳米粒子溶液；（2）MoS2/CuS的制备在搅拌下将2 g四水合钼酸铵和0.7 ~ 2.8 g硝酸铜溶于20 mL超纯水中，然后加入1 g升华硫超声分散1 h；在搅拌下缓慢滴加10 ~ 30 mL水合肼，搅拌均匀后转移至50 mL聚四氟乙烯高压反应釜，200 °C下反应24 h；自然冷却至室温后，离心，分别用无水乙醇和超纯水洗涤三次，50 °C真空干燥箱中干燥8 ~ 12 h，制得MoS2/CuS；（3）MoS2/CuS-Au的制备将10 mg MoS2/CuS分散在5 ~ 15 mL的金纳米粒子溶液中，超声分散1 h，离心，分别用无水乙醇和超纯水洗涤三次，于30 °C的真空干燥箱中干燥8 ~ 12 h，制得MoS2/CuS-Au。 3.如权利要求1所述的一种基于桑葚状Au@PtPd介孔棒标记的电化学传感器的制备方法，所述检测抗体孵化物Au@PtPd MNs-Ab2溶液的制备，其特征在于，步骤如下：（1）Au纳米棒的制备种子溶液的制备：在搅拌下将3 ~ 7 mL、0.5 mmol/L氯金酸溶液，0.3 ~ 0.9 mL、0.01mol/L硼氢化钠加入到5 mL、0.2 mol/L十六烷基三甲基溴化铵中，完全溶解后静置2 h，得到棕黄色的种子溶液；生长溶液的制备：将0.5 ~ 0.9 g十六烷基三甲基溴化铵和0.1234 g油酸钠溶解在25mL、50 °C的超纯水中；待溶液冷却至30 °C时，加入1.5 ~ 2.0 mL、4 mmol/L硝酸银溶液反应15 min，继续加入25 mL、1 mmol/L氯金酸溶液并搅拌90 min，溶液的颜色变为无色后，加入0.10 ~ 0.30 mL的HCl溶液；搅拌15 min后，加入0.1 ~ 0.2 mL、64 mmol/L抗坏血酸并剧烈搅拌30 s，得到生长溶液； Au纳米棒的制备：将0.04 ~ 0.12 mL种子溶液加入到上述生长溶液中温和搅拌至均匀，室温下静置过夜；超纯水离心洗涤三次，重新超声分散于1 mL超纯水中，制得Au纳米棒备用；（2）Au@PtPd MNs的制备依次将0.2 ~ 1.0 mL、20 mmol/L NaPdCl4，0.5 ~ 0.9 mL、20 mmol/L K2PtCl4，1.0 ~1.5 mL、20 mmol/L H2PtCl6，0.06 mL、6 mol/L HCl和40 ~ 80 mg F127混合；在F127完全溶解后，继续加入1 mL上述制备的Au纳米棒、1 ~ 5 mL、0.1 mol/L抗坏血酸；将混合后的溶液在水浴中连续超声3 ~ 5 h；用体积比1：1的无水乙醇和超纯水混合液离心洗涤三次，50 °C真空干燥箱中干燥8 ~ 12 h，制得Au@PtPd MNs；（3）检测抗体孵化物Au@PtPd MNs-Ab2溶液的制备将1 ~ 3 mL、2 mg/mL的Au@PtPd MNs分散液加入到1.0 mL、10 μg/mL的检测抗体Ab2溶液中，4 °C恒温振荡箱中震荡孵化12 h；离心洗涤后，重新分散至1 ~ 3 mL的pH=7.38的磷酸缓冲溶液中，制得检测抗体孵化物Au@PtPd MNs-Ab2溶液，4 °C保存备用。 4.如权利要求1所述的制备方法制备的一种基于桑葚状Au@PtPd介孔棒标记的电化学传感器，用于黄曲霉毒素的检测，步骤如下：（1）使用电化学工作站以三电极体系进行测试，饱和甘汞电极为参比电极，铂丝电极为辅助电极，所制备的传感器为工作电极，在10 mL、50 mmol/L的pH 5.10 ~ 8.10磷酸盐缓冲溶液中进行测试；（2）用时间-电流法对黄曲霉毒素进行检测，选择-0.4 V作为电流测量的输入电压，取样间隔0.1 s，运行时间300 s；（3）当背景电流趋于稳定后，每隔50 s向10 mL、50 mmol/L的pH=7.38磷酸盐缓冲溶液中注入10 μL、5 mol/L的双氧水溶液，记录电流变化。 5.如权利要求1、2、3、4所述的黄曲霉毒素，其特征在于，所述黄曲霉毒素选自下列之一：黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素G2。
所属类别：	发明专利