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原文传递结核分枝杆菌蛋白诊断测定和结核病检测和诊断装置

专利名称：	结核分枝杆菌蛋白诊断测定和结核病检测和诊断装置
摘要：	本发明提供一种检测来自受试者的样品中抗体的方法，其中所述抗体于结核分枝杆菌抗原表位结合，所述方法包括:使所述样品与两种或多种分离的多肽或其抗原性片段或变体接触，其中所述多肽包含选自SEQ ID NO：1、3、5、7、9、11、13和15的多肽；和检测包含所述分离的多肽或其抗原性片段或变体的抗体‑肽复合物的形成，其中所述复合物的形成表明所述样品中存在针对结核分枝杆菌抗原表位的抗体。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	美国;US
申请人：	佩斯诊断公司
发明人：	H-H·T·阮氏
专利状态：	有效
申请日期：	2017-11-22T00:00:00+0800
发布日期：	2019-07-30T00:00:00+0800
申请号：	CN201780072214.1
公开号：	CN110073215A
代理机构：	北京骥驰知识产权代理有限公司
代理人：	唐晓峰
分类号：	G01N33/543(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	美国加利福尼亚州
主权项：	1.一种检测来自受试者样品中抗体的方法，其中所述抗体与结核分枝杆菌抗原的表位结合，包括： i.将样品与两种或多种分离的多肽或其抗原片段或变体接触，其中所述多肽包含选自SEQ ID NO：1、3、5、7、9、11、13、和15的多肽；和 ii.检测包含所述分离的多肽或其抗原片段或变体的抗体-肽复合物的形成；其中所述复合物的形成表明所述样品中存在针对结核分枝杆菌抗原表位的抗体。 2.根据权利要求1所述的方法，其中所述受试者已经感染了结核分枝杆菌。 3.根据权利要求1-2中任一项所述的方法，其中所述样品选自血液、血清、血浆、淋巴结、皮肤、唾液、尿液、脑脊髓液、和乳汁。 4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其中使所述样品与至少三种分离的多肽或其抗原片段或变体接触。 5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中使所述样品与至少四种分离的多肽或其抗原片段或变体接触。 6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法，其中使所述样品与至少五种分离的多肽或其抗原片段或变体接触。 7.根据权利要求1-6中任一项所述的方法，其中使所述样品与至少六种分离的多肽或其抗原片段或变体接触。 8.根据权利要求1-7中任一项所述的方法，其中使所述样品与至少七种分离的多肽或其抗原片段或变体接触。 9.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其中使所述样品与至少八种分离的多肽或其抗原片段或变体接触。 10.根据权利要求1-9中任一项所述的方法，其中检测来自感染结核分枝杆菌的受试者的样品中抗体-肽复合物的灵敏度为至少70％。 11.根据权利要求1-10中任一项所述的方法，其中检测来自感染结核分枝杆菌的受试者的样品中抗体-肽复合物的灵敏度为至少80％。 12.根据权利要求1-11中任一项所述的方法，其中检测来自感染结核分枝杆菌的受试者的样品中抗体-肽复合物的灵敏度为至少90％。 13.根据权利要求1-12中任一项所述的方法，其中检测来自感染结核分枝杆菌的受试者的样品中抗体-肽复合物的灵敏度为至少95％。 14.根据权利要求1-13中任一项所述的方法，其中使所述样品与SEQ ID NO：9或其抗原片段或变体接触。 15.根据权利要求1-14中任一项所述的方法，其中使所述样品与SEQ ID NO：5或其抗原片段或变体；SEQ ID NO：7或其抗原片段或变体；和SEQ ID NO：9或其抗原片段或变体接触。 16.根据权利要求1-15中任一项所述的方法，其中使样品与SEQ ID NO：1或其抗原片段或变体；SEQ ID NO：3或其抗原片段或变体；SEQ ID NO：5或其抗原片段或变体；SEQ ID NO：7或其抗原片段或变体；和SEQ ID NO：9或其抗原片段或变体接触。 17.根据权利要求1-14中任一项所述的方法，其中使所述样品与SEQ ID NO：11或其抗原片段或变体；SEQ ID NO：13或其抗原片段或变体；和SEQ ID NO：15或其抗原片段或变体接触。 18.根据权利要求1-14中任一项所述的方法，其中使所述样品与SEQ ID NO：9或其抗原片段或变体；SEQ ID NO：11或其抗原片段或变体；SEQ ID NO：13或其抗原片段或变体；和SEQ ID NO：15或其抗原片段或变体接触。 19.根据权利要求1-14中任一项所述的方法，其中使所述样品与SEQ ID NO：9或其抗原片段或变体；SEQ ID NO：11或其抗原片段或变体；SEQ ID NO：13或其抗原片段或变体；SEQID NO：15或其抗原片段或变体；SEQ ID NO：1或其抗原片段或变体；SEQ ID NO：3或其抗原片段或变体；SEQ ID NO：5或其抗原片段或变体；和SEQ ID NO：7或其抗原片段或变体接触。 20.根据权利要求1-19中任一项所述的方法，其中将所述两种或多种分离的多肽或其抗原片段或变体与亲和标签序列连接以促进纯化。 21.根据权利要求20所述的方法，其中所述亲和标签为6x-组氨酸标签。 22.根据权利要求1-21中任一项所述的方法，其中将所述两种或多种分离的多肽或其抗原片段或变体与配体缀合。 23.根据权利要求1-21中任一项所述的方法，其中所述两种或多种分离的多肽或其抗原片段或变体为生物素化的。 24.根据权利要求1-21中任一项所述的方法，其中将所述两种或多种分离的多肽或其抗原片段或变体与链霉抗生物素蛋白缀合。 25.根据权利要求1-2中任一项所述的方法，其中将两种或多种分离的多肽或其抗原片段或变体连接或固定于固体支撑物上。 26.根据权利要求25所述的方法，其中将所述两种或多种分离的多肽或其抗原片段或变体连接或固定于微珠、侧向流动免疫测定装置中的流动路径、微量滴定板中的孔、或者转子中的流动路径。 27.根据权利要求1-24中任一项所述方法，其中所述复合物的形成是通过以下一种或多种方法检测：ELISA、免疫印迹、放射免疫测定、流式细胞术、荧光偏振、乳胶凝集、侧向流动测定、免疫色谱测定、免疫芯片、浸渍棒免疫测定、和基于微珠的技术。 28.一种用于测定来自受试者的样品中抗体存在的装置，其中所述抗体与结核分枝杆菌抗原表位结合，其中所述装置包含两种或多种分离的多肽或其抗原片段或变体，其中所述多肽包含选自SEQ ID NO：1、3、5、7、9、11、13、和15的多肽。 29.根据权利要求28所述的装置，其中所述装置包含至少三种分离的多肽或其抗原片段或变体。 30.根据权利要求28-29中任一项所述的装置，其中所述装置包含至少四种分离的多肽或其抗原片段或变体。 31.根据权利要求28-30中任一项所述的装置，其中所述装置包含至少五种分离的多肽或其抗原片段或变体。 32.根据权利要求28-31中任一项所述的装置，其中所述装置包含至少六种分离的多肽或其抗原片段或变体。 33.根据权利要求28-32中任一项所述的装置，其中所述装置包含至少七种分离的多肽或其抗原片段或变体。 34.根据权利要求28-33中任一项所述的装置，其中所述装置包含至少八种分离的多肽或其抗原片段或变体。 35.根据权利要求28-34中任一项所述的装置，其中所述装置包含SEQ ID NO：9或其抗原片段或变体。 36.根据权利要求28-35中任一项所述的装置，其中所述装置包含SEQ ID NO：5或其抗原片段或变体；SEQ ID NO：7或其抗原片段或变体；和SEQ ID NO：9或其抗原片段或变体。 37.根据权利要求28-36中任一项所述的装置，其中所述装置包含SEQ ID NO：1或其抗原片段或变体；SEQ ID NO：3或其抗原片段或变体；SEQ ID NO：5或其抗原片段或变体；SEQID NO：7或其抗原片段或变体；和SEQ ID NO：9或其抗原片段或变体。 38.根据权利要求28-34中任一项所述的装置，其中所述装置包含SEQ ID NO：9或其抗原片段或变体；SEQ ID NO：11或其抗原片段或变体；SEQ ID NO：13或其抗原片段或变体；和SEQ ID NO：15或其抗原片段或变体。 39.根据权利要求28-38中任一项所述的装置，其中将所述两种或多种分离的多肽或其抗原片段或变体与亲和标签序列连接。 40.根据权利要求39所述的装置，其中所述亲和标签为6x-组氨酸标签。 41.根据权利要求28-40中任一项所述的装置，其中将所述两种或多种分离的多肽或其抗原片段或变体与配体缀合。 42.根据权利要求28-41中任一项所述的装置，其中所述两种或多种分离的多肽或其抗原片段或变体为生物素化的。 43.根据权利要求28-42中任一项所述的装置，其中将所述两种或多种分离的多肽或其抗原片段或变体与链霉抗生物素蛋白缀合。 44.根据权利要求28-43中任一项所述的装置，其中将所述两种或多种分离的多肽或其抗原片段或变体连接或固定于固体支撑物上。 45.根据权利要求28-44中任一项所述的装置，其中将所述两种或多种分离的多肽或其抗原片段或变体连接或固定于微珠、侧向流动免疫测定装置中的流动路径、微量滴定板中的孔、或者转子中的流动路径。 46.一种用于测定来自包含受试者T细胞的样品中干扰素-γ产生的方法，括： i.将包含受试者T细胞的样品与两种或多种分离的多肽或其抗原片段或变体接触，其中所述多肽包含选自SEQ ID NOs：1、3、5、7、9、11、13、和15的多肽；和 ii.检测由T细胞产生的干扰素-γ的存在。 47.根据权利要求46所述的方法，其中在检测由T细胞产生的干扰素-γ之前，将样品与两种或多种分离的多肽或其抗原片段或变体一起温育4-24小时。 48.根据权利要求46-47中任一项所述的方法，其中T细胞为新鲜分离的。 49.根据权利要求46-48中任一项所述的方法，其中T细胞为从血液中分离的。 50.根据权利要求46-49中任一项所述的方法，其中T细胞包含CD4+和CD8+T细胞。 51.根据权利要求46-49中任一项所述的方法，其中T细胞包含CD4+立即效应T细胞。 52.根据权利要求46-51中任一项所述的方法，其中受试者已被结核分枝杆菌感染。 53.根据权利要求46-52中任一项所述的方法，其中所述样品选自血液、血清、血浆、淋巴结、皮肤、唾液、尿液、脑脊髓液、和乳汁。 54.根据权利要求46-53中任一项所述的方法，其中使样品与至少三种分离的多肽或其抗原片段或变体接触。 55.根据权利要求46-54中任一项所述的方法，其中使所述样品与至少四种分离的多肽或其抗原片段或变体接触。 56.根据权利要求46-55中任一项所述的方法，其中使所述样品与至少五种分离的多肽或其抗原片段或变体接触。 57.根据权利要求46-56中任一项所述的方法，其中使所述样品与至少六种分离的多肽或其抗原片段或变体接触。 58.根据权利要求46-57中任一项所述的方法，其中使所述样品与至少七种分离的多肽或其抗原片段或变体接触。 59.根据权利要求46-58中任一项所述的方法，其中使所述样品与至少八种分离的多肽或其抗原片段或变体接触。 60.根据权利要求46-59中任一项所述的方法，其中检测来自感染结核分枝杆菌的受试者的样品中干扰素-γ的灵敏度为至少70％。 61.根据权利要求46-60中任一项所述的方法，其中检测来自感染结核分枝杆菌的受试者的样品中干扰素-γ的灵敏度为至少80％。 62.根据权利要求46-61中任一项所述的方法，其中检测来自感染结核分枝杆菌的受试者的样品中干扰素-γ的灵敏度为至少90％。 63.根据权利要求46-62中任一项所述的方法，其中检测来自感染结核分枝杆菌的受试者的样品中干扰素-γ的灵敏度为至少95％。 64.根据权利要求46-63中任一项所述的方法，其中使所述样品与SEQ ID NO：9或其抗原片段或变体接触。 65.根据权利要求46-64中任一项所述的方法，其中使所述样品与SEQ ID NO：5或其抗原片段或变体；SEQ ID NO：7或其抗原片段或变体；和SEQ ID NO：9或其抗原片段或变体接触。 66.根据权利要求46-65中任一项所述的方法，其中使所述样品与SEQ ID NO：1或其抗原片段或变体；SEQ ID NO：3或其抗原片段或变体；SEQ ID NO：5或其抗原片段或变体；SEQID NO：7或其抗原片段或变体；和SEQ ID NO：9或其抗原片段或变体接触。 67.根据权利要求46-64中任一项所述的方法，其中使所述样品与SEQ ID NO：9或其抗原片段或变体；SEQ ID NO：11或其抗原片段或变体；SEQ ID NO：13或其抗原片段或变体；和SEQ ID NO：15或其抗原片段或变体接触。 68.根据权利要求46-67中任一项所述的方法，其中将所述两种或多种分离的多肽或其抗原片段或变体与亲和标签序列连接以促进纯化。 69.根据权利要求68所述的方法，其中所述亲和标签为6x-组氨酸标签。 70.根据权利要求46-69中任一项所述的方法，其中将两种或多种分离的多肽或其抗原片段或变体连接或固定于固体支撑物上。 71.根据权利要求46-70中任一项所述的方法，其中干扰素-γ是通过以下一种或多种方法检测：ELISA、免疫印迹、放射免疫测定、流式细胞术、荧光偏振、乳胶凝集、侧向流动测定、免疫色谱测定、免疫芯片、浸渍棒免疫测定、和基于微珠的技术。
所属类别：	发明专利