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原文传递一种基于聚合物阻碍敏感膜计时电位的检测方法

专利名称：	一种基于聚合物阻碍敏感膜计时电位的检测方法
摘要：	本发明涉及基于阻碍的敏感膜电位分析技术，具体的说是一种基于聚合物阻碍敏感膜计时电位的检测方法。以聚合物膜离子选择性电极为工作电极，以待测目标物的核酸适体、DNA或抗原/抗体作为识别分子，通过在探针基体上负载或标记酶或其类似物分子作为识别探针，采用脉冲恒电流控制的计时电位技术对待检测液中目标物进行定量/定性的检测；本发明方法具有一定的通用性，可以通过改变识别分子的适体序列或采用DNA、抗原/抗体能够实现对不同目标物的检测。在检测过程中亦可以利用含有离子交换剂的敏感膜，通过测定电极的开路电位实现目标物的检测。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	山东;37
申请人：	中国科学院烟台海岸带研究所
发明人：	丁家旺;刘淑文;秦伟
专利状态：	有效
申请日期：	2019-05-07T00:00:00+0800
发布日期：	2019-07-30T00:00:00+0800
申请号：	CN201910374232.6
公开号：	CN110068602A
代理机构：	沈阳科苑专利商标代理有限公司
代理人：	李颖
分类号：	G01N27/327(2006.01);G;G01;G01N;G01N27
申请人地址：	264003 山东省烟台市莱山区春晖路17号
主权项：	1.一种基于聚合物阻碍敏感膜计时电位的检测方法，其特征在于：以聚合物膜离子选择性电极为工作电极，以待测目标物的核酸适体、DNA或抗原/抗体作为识别分子，通过在探针基体上负载或标记酶或其类似物分子作为识别探针，采用脉冲恒电流控制的计时电位技术对待检测液中目标物进行定量/定性的检测；所述待测溶液中的目标物与识别分子结合通过三明治夹心免疫反应模式或取代模式作用，进而改变识别探针的量，通过探针上负载或标记的酶或其类似物催化底物使其在聚合物敏感膜基底上产生聚合物，聚合物阻碍指示离子的离子通量，降低电位信号，实现对待检测目标物定量/定性的检测。 2.按权利要求1所述的基于聚合物阻碍敏感膜计时电位的检测方法，其特征在于：所述探针基体为石墨烯、单壁碳纳米管、双壁碳纳米管、多壁碳纳米管、碳纳米管阵列、纳米线、富勒烯、量子点或MOF材料；所述酶分子为辣根过氧化物酶、碱性磷酸脂酶、大豆过氧化物酶、丁酰胆碱酯酶、尿酶、β-半乳糖苷酶、漆酶、胆红素氧化酶、多酚氧化酶、酪氨酸酶、G-四联体功能酶或锰卟啉-DNA螯合物；类酶分子为：氧化石墨烯、四氧化三铁、碳纳米管、金纳米、二硫化钼、MOFs、金属氧化物纳米材料或血红素。 3.按权利要求1所述的基于聚合物阻碍敏感膜计时电位的检测方法，其特征在于：所述工作电极底部附有聚合物敏感膜，聚合物敏感膜表面形成阻碍指示离子通量的阻碍聚合物；其中，所述聚合物敏感膜与工作电极底部之间为传导层。 4.按权利要求1或3所述的基于聚合物阻碍敏感膜计时电位的检测方法，其特征在于：所述阻碍指示离子通量的聚合物为底物通过探针上负载或标记的酶或其类似物分子催化在聚合物膜离子选择性电极敏感膜基底上形成的阻碍指示离子通量的聚合物，牢固附着10-120分钟；所述底物为多巴胺、儿茶酚、对叔丁基儿茶酚、苯胺、肾上腺素、去甲基肾上腺素或单宁酸。 5.按权利要求1所述的基于聚合物阻碍敏感膜计时电位的检测方法，其特征在于：所述待测目标物为抗生素、细菌、蛋白、细胞、病毒、重金属离子、氨基酸、农药、藻毒素、有机小分子或DNA；所述识别分子为与待测目标物特异性结合的序列、DNA或者抗原/抗体。 6.按权利要求1所述的基于聚合物阻碍敏感膜计时电位的检测方法，其特征在于：所述指示离子为阳离子，阴离子或聚离子；所述聚合物膜离子选择性电极的聚合物敏感膜内含指示离子的载体。 7.按权利要求1所述的基于聚合物阻碍敏感膜计时电位的检测方法，其特征在于：所述计时电位分析为以聚合物膜离子选择性电极为工作电极，采用工作电极、对电极及参比电极的三电极体系对聚合物阻碍的指示离子进行检测，得出指示离子电位响应值即可实现对待测目标物的定性检测；再根据上述产生的指示离子在聚合物阻碍前后的电位变化的差值，即可实现对待测目标物的定量检测。 8.按权利要求1所述的基于聚合物阻碍敏感膜计时电位的检测方法，其特征在于：所述对工作电极所施加的恒定的阴极脉冲电流大小为0.1-10μA，所施加的脉冲电流时间为0.1-10s；所述施加脉冲电流后，通过进一步向电极施加开路电位10-600s，实现电极复性更新。
所属类别：	发明专利