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原文传递一种量子点-心肌肌钙蛋白I抗体免疫复合物的制备方法及试纸条的制备方法

专利名称：	一种量子点-心肌肌钙蛋白I抗体免疫复合物的制备方法及试纸条的制备方法
摘要：	本发明涉及一种量子点‑心肌肌钙蛋白I抗体免疫复合物的制备方法，使量子点与1‑乙基‑3‑(3‑二甲基胺丙基)碳化二亚胺盐酸盐和N‑羟基琥珀酰亚胺或其硫代物反应，控制量子点、1‑乙基‑3‑(3‑二甲基胺丙基)碳化二亚胺盐酸盐、N‑羟基琥珀酰亚胺或其硫代物的投料摩尔比为1：200~1000：5000~10000；调整反应液的pH为8~9；向反应液中加入心肌肌钙蛋白I抗体，控制量子点和心肌肌钙蛋白I抗体的投料摩尔比为1：42~54。本发明偶联效果好，制备方法简单，成本低廉。本发明制得的试纸条的标准曲线好，相关系数大于0.99，检测灵敏度高，能够实现心肌肌钙蛋白I抗原的准确定量检测。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	江苏;32
申请人：	西安交通大学苏州研究院
发明人：	胡延祯;李超
专利状态：	有效
申请日期：	2019-04-12T00:00:00+0800
发布日期：	2019-08-02T00:00:00+0800
申请号：	CN201910292990.3
公开号：	CN110082522A
代理机构：	苏州创元专利商标事务所有限公司
代理人：	周敏
分类号：	G01N33/532(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	215123 江苏省苏州市工业园区仁爱路99号C110
主权项：	1.一种量子点-心肌肌钙蛋白I抗体免疫复合物的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）、使量子点与1-乙基-3-(3-二甲基胺丙基)碳化二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺或其硫代物进行反应，控制所述的量子点、所述的1-乙基-3-(3-二甲基胺丙基)碳化二亚胺盐酸盐、所述的N-羟基琥珀酰亚胺或其硫代物的投料摩尔比为1：200~1000：5000~10000；（2）、调整步骤（1）处理后的反应液的pH为8~9；（3）、向步骤（2）处理后的反应液中加入心肌肌钙蛋白I抗体制得所述的量子点-心肌肌钙蛋白I抗体免疫复合物，控制所述的量子点和所述的心肌肌钙蛋白I抗体的投料摩尔比为1：42~54。 2.根据权利要求1所述的量子点-心肌肌钙蛋白I抗体免疫复合物的制备方法，其特征在于：步骤（1）中，所述的量子点的平均粒径为10~30nm，发射波长范围为560nm~650nm。 3.根据权利要求1所述的量子点-心肌肌钙蛋白I抗体免疫复合物的制备方法，其特征在于：步骤（1）中，所述的量子点、所述的1-乙基-3-(3-二甲基胺丙基)碳化二亚胺盐酸盐、所述的N-羟基琥珀酰亚胺或其硫代物的投料摩尔比为1：200~500：8000~10000。 4.根据权利要求1所述的量子点-心肌肌钙蛋白I抗体免疫复合物的制备方法，其特征在于：步骤（1）的反应条件为冰浴超声，反应时间为20~40min。 5.根据权利要求1所述的量子点-心肌肌钙蛋白I抗体免疫复合物的制备方法，其特征在于：步骤（1）反应完成后，采用超滤法除去过量的1-乙基-3-(3-二甲基胺丙基)碳化二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺或其硫代物，然后通过添加pH为8~9的硼酸缓冲液调整反应液的pH。 6.根据权利要求1所述的量子点-心肌肌钙蛋白I抗体免疫复合物的制备方法，其特征在于：步骤（3）中，所述的量子点和所述的心肌肌钙蛋白I抗体的投料摩尔比为1：42~50。 7.根据权利要求1所述的量子点-心肌肌钙蛋白I抗体免疫复合物的制备方法，其特征在于：步骤（3）的反应条件为冰浴超声，反应时间为2~5h。 8.一种试纸条的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）采用处理液处理样品垫和结合垫；（2）采用如权利要求1至7中任一项所述的制备方法制得的量子点-心肌肌钙蛋白I抗体免疫复合物处理步骤（1）处理后的结合垫；（3）采用心肌肌钙蛋白I抗体和羊抗鼠IgG多克隆抗体在硝酸纤维素膜上包被检测线和质控线，然后使用封闭液封闭包被后的硝酸纤维素膜；（4）将步骤（1）处理后的样品垫，步骤（2）处理后的结合垫，步骤（3）处理后的硝酸纤维素膜、吸水垫和载体依次层叠，制成所述的试纸条。 9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于：步骤（1）中，以质量分数计，所述的处理液为含有1~5%的牛血清白蛋白、1~3%的吐温20、0.5~1.5%的NaCl、1~5%的蔗糖和1~3%的聚乙二醇2000的pH为7~9的硼酸缓冲液；步骤（3）中，以质量分数计，所述的封闭液为含有质量分数为0.5~2%的牛血清白蛋白的pH值为7~9的硼酸缓冲溶液。 10. 根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于：步骤（3）中，采用浓度为0.5~2mg/ml的心肌肌钙蛋白I抗体溶液以0.5~1μl/cm的划线速度在所述的硝酸纤维素膜上制得检测线，采用浓度为0.5~1 mg/ml的羊抗鼠IgG多克隆抗体溶液以0.5~1μl/cm的划线速度在硝酸纤维素膜上制得质控线。
所属类别：	发明专利