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原文传递用于分离生物分子的方法和系统

专利名称：	用于分离生物分子的方法和系统
摘要：	提供了一种分离系统、一种在分离系统中的方法和一种待提供在分离系统中的洗脱装置，用于从细胞培养物分离生物分子。所述方法包括以下步骤：‑将来自包含所述生物分子的细胞培养物(3;103;203)的进料提供给磁力分离器(5;105;205)并向所述磁力分离器提供包含能够结合该生物分子的配体的磁珠；‑通过所述磁力分离器将所述具有结合的生物分子的磁珠与其余的进料分离；‑将所述磁珠以具有添加的缓冲液的浆料形式运送至洗脱池(7;107;207)；‑在所述洗脱池中洗脱所述结合的生物分子。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	瑞典;SE
申请人：	通用电气健康护理生物科学股份公司
发明人：	O.林德;J.阿瓦林;A.伦丁;N.诺曼;R.帕尔姆格兰;G.罗德里格
专利状态：	有效
申请日期：	2017-12-27T00:00:00+0800
发布日期：	2019-08-02T00:00:00+0800
申请号：	CN201780081042.4
公开号：	CN110088626A
代理机构：	中国专利代理(香港)有限公司
代理人：	徐晶;林毅斌
分类号：	G01N33/543(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	瑞典乌普萨拉
主权项：	1.一种在分离系统(1; 101; 201; 701; 801)中从细胞培养物分离生物分子的方法，所述方法包括以下步骤： - 将来自包含所述生物分子的细胞培养物(3; 103; 203; BP)的进料提供给磁力分离器(5; 105; 205; MS)并向所述磁力分离器提供包含能够结合该生物分子的配体的磁珠； - 通过所述磁力分离器将所述具有结合的生物分子的磁珠与其余的进料分离； - 将所述磁珠以具有添加的缓冲液的浆料形式运送至洗脱池(7; 107; 207; EC)； - 在所述洗脱池中洗脱所述结合的生物分子。 2.根据权利要求1所述的方法，所述方法还包括从所述洗脱池(7; 107; 207; EC)运送所述磁珠以在所述磁力分离器(5; 105; 205; MS)中重复使用。 3.根据权利要求1或2所述的方法，所述方法还包括以下步骤： - 在提供给所述磁力分离器(5; 105; 205; MS)之前于捕获池(9; 109; 209; CC)中混合来自所述细胞培养物的所述进料和所述磁珠，从而允许所述生物分子结合到所述磁珠。 4.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述分离步骤包括： - 向所述磁力分离器(5; 105; 205; MS)施加磁场，从而允许所述磁珠以磁性方式结合到所述磁力分离器内的磁性材料部分； - 从所述磁力分离器洗掉除以磁性方式结合到所述磁性材料部分的那些之外的其他组分；并且其中将所述磁珠运送至洗脱池(7; 107; 207; EC)的步骤包括 - 在运送所述磁珠之前释放施加给所述磁力分离器(5; 105; 205; MS)的磁场。 5.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述方法还包括以下步骤： - 在所述洗脱之后就地清洗CIP所述洗脱池(7; 107; 207; EC)和所述磁珠；和 - 在所述CIP之后和从所述洗脱池运送所述磁珠之前在所述洗脱池中平衡所述磁珠。 6.根据权利要求5所述的方法，其中所述方法还包括以下步骤： - 在洗脱之后和CIP之前解吸。 7.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中在前一份在所述洗脱池(7; 107;207; EC)中的同时向所述磁力分离器(5; 105; 205; MS)中提供新的一份来自所述细胞培养物(3; 103; 203; BP)的进料和磁珠，由此，至少两份磁珠在所述分离系统(1; 101;201; 701; 801)中循环。 8.根据权利要求7所述的方法，其中在一个前一份在所述洗脱池(7; 107)中且一个前一份在捕获池(9; 109)中的同时向所述磁力分离器(5; 105)中提供新的一份来自所述细胞培养物(3; 103)的进料和磁珠，由此，三份磁珠在所述分离系统(1; 101; 201)中循环。 9.根据前述权利要求中任一项所述的方法，所述方法还包括通过预先灭菌的柔性管和无菌连接器连接所述系统的部分的第一步骤。 10.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述方法还包括在所述洗脱池(7;107; 207)中填充所述磁珠浆料的步骤。 11.根据权利要求10所述的方法，其中所述填充在所述洗脱池(7; 107; 207)内提供空隙体积小于60%的磁珠床。 12.根据权利要求10或11所述的方法，其中所述填充通过使所述磁珠浆料流过所述洗脱池(7; 107; 207)进行，其中所述洗脱池包括保留装置(502a-c; f-h)以使所述磁珠保持在所述洗脱池内并允许过量的缓冲液从所述洗脱池排出。 13.根据权利要求10或11所述的方法，其中所述填充步骤包括在所述洗脱池(7; 107;207)内推动接合器(504)，同时由保留装置(502a-c; f-h)将所述磁珠保持在所述洗脱池内并允许缓冲液从所述洗脱池排出。 14.根据权利要求10或11所述的方法，其中所述填充步骤包括允许所述磁珠在重力和/或磁力作用下在所述洗脱池的下部中构建填充床，同时允许过量的缓冲液从所述洗脱池排出。 15.根据权利要求10或11所述的方法，其中所述填充步骤包括通过使所述磁珠浆料流入所述洗脱池(7; 107; 207)的底部入口(506)中来流动填充所述磁珠，所述洗脱池包括接合器(504)，在磁珠浆料开始充填所述洗脱池时所述接合器位于所述洗脱池中的起始位置处，所述起始位置比所述接合器的最终位置更靠近所述洗脱池的底部入口(506)，所述最终位置对应于向所述洗脱池中充填磁珠完成时所述接合器(504)的位置，所述接合器保持朝向所述浆料的流动方向的力并允许缓冲液在充填过程中通过所述接合器排出。 16.根据前述权利要求中任一项所述的方法，所述方法还包括在洗脱后释放所述洗脱池(7; 107; 207)中的保留装置(502a-e)和从所述洗脱池运送所述磁珠以可能地在所述磁力分离器(5; 105; 205)中重复使用的步骤。 17.根据权利要求16所述的方法，其中释放保留装置(502a-e)包括打开底部封闭件、移除底部过滤器或移除磁力。 18.根据权利要求16或17所述的方法，其中所述运送所述磁珠通过在所述洗脱池(7;107; 207)中朝向所述洗脱池的出口(506)推动接合器(504)来进行。 19.根据权利要求16-18中任一项所述的方法，其中所述从所述洗脱池(7; 107; 207)运送所述磁珠以可能地在所述磁力分离器(5; 105; 205)中重复使用的步骤还包括向所述洗脱池(7; 107; 207)中加入缓冲液以再悬浮所述床和从所述洗脱池泵出或推出所述磁珠的步骤。 20.根据权利要求16-19中任一项所述的方法，其中所述从所述洗脱池(7; 107; 207)运送所述磁珠以可能地在所述磁力分离器中重复使用的步骤还包括从所述洗脱池向中间池(111)运送所述磁珠的步骤，其中过量的缓冲液可被移除。 21.根据权利要求20所述的方法，其中过量的缓冲液通过由磁力将所述磁珠保持在所述中间池内同时从所述中间池排泄缓冲液来从所述中间池(111)移除。 22.一种用于从细胞培养物(3; 103; 203; BP)分离生物分子的分离系统(1; 101;201; 701; 801)，其中所述系统包含： - 磁力分离器(5; 105; 205; MS)，其包括用于接收来自包含所述生物分子的细胞培养物(3; 103; 203; BP)的进料和用于接收包含能够结合该生物分子的配体的磁珠的入口(5a; 105a; 205a)，所述磁力分离器(5; 105; 205; MS)配置为将所述具有所述结合的生物分子的磁珠与其余的进料分离；和 - 包含洗脱池(7; 107; 207; EC)的洗脱装置(8; 108; 208)，所述洗脱池包括与来自所述磁力分离器(5; 105; 205; MS)的出口(5b; 105b; 205b)连接的洗脱池入口(7a;107a; 207a)，用于接收以具有缓冲液的浆料形式来自所述磁力分离器的所述分离的磁珠，其中所述洗脱装置(8; 108; 208)配置为从所述磁珠洗脱所述生物分子。 23.根据权利要求22所述的分离系统，其中所述洗脱池(7; 107)包含配置为从所述洗脱池运送所述磁珠以在所述磁力分离器(5; 105)中重复使用的洗脱池出口(7b; 107b)。 24.根据权利要求22或23所述的分离系统，所述分离系统还包含： - 捕获池(9; 109)，其连接于所述磁力分离器(5; 105)的入口(5a; 105a)并包括用于接收来自细胞培养物(3; 103)的进料的细胞培养物入口(9a; 109a)和至少一个用于接收磁珠的磁珠入口(9b; 109b; 109c)，所述捕获池(9; 109)配置为混合来自所述细胞培养物的进料与所述磁珠，从而允许所述特定的生物分子在运送至所述磁力分离器(5; 105)之前与所述磁珠结合。 25.根据权利要求22-24中任一项所述的分离系统，其中所述磁力分离器(5; 105;205)在所述磁力分离器内包括磁性材料部分，当施加磁场时，所述部分吸引所述磁珠，并且所述磁力分离器配置为当所述磁珠待运送至所述洗脱池(7; 107; 207)时释放所述磁场，所述磁力分离器还包括洗涤装置(13; 113; 213)，所述洗涤装置(13; 113; 213)配置为从所述磁力分离器(5; 105; 205)洗掉除以磁性方式结合到所述磁性材料部分的那些之外的其他组分。 26.根据权利要求25所述的分离系统，其中所述洗涤装置(13; 113; 213)包括至少一个连接于泵并可能地经由捕获池(9; 109; 209)连接于所述磁力分离器的入口(5a; 105a;205a)的洗涤缓冲液提供装置(15; 115; 215)和连接于所述磁力分离器的出口(5b; 105b;205b)的洗涤缓冲液收集装置(17; 117; 217)，所述洗涤装置(13; 113; 213)配置为使洗涤缓冲液流过所述磁力分离器(5; 105; 205)以洗掉所述进料中除结合到所述磁性部分的那些之外的其他组分。 27.根据权利要求22-26中任一项所述的系统，其中所述洗脱装置(8; 108; 208)包括连接于洗脱池入口(7a; 107a’; 207a’)的缓冲液提供装置(8a; 108a; 208a)和连接于洗脱池出口(7b; 107b’; 207b’)的收集装置(8b; 108b; 208b)，并且其中所述洗脱装置配置为通过从所述缓冲液提供装置提供洗脱缓冲液并在所述收集装置中收集洗脱液来进行洗脱，并还可能地通过从所述缓冲液提供装置提供清洁缓冲液并在所述收集装置中收集废物来进行就地清洗CIP，并且还可能地通过从所述缓冲液提供装置提供平衡缓冲液来进行所述洗脱池中所述磁珠的平衡。 28.根据权利要求22-27中任一项所述的分离系统，其中在前一份在所述洗脱池(7;107; 207)中的同时向所述磁力分离器(5; 105; 205)中提供新的一份来自所述细胞培养物(3; 103; 203)的进料和磁珠，由此，至少两份磁珠在所述分离系统(1; 101; 201)中循环。 29.根据权利要求28所述的分离系统，其中在一个前一份在所述洗脱池(7; 107)中且一个前一份在捕获池(9; 109)中的同时向所述磁力分离器(5; 105)中提供新的一份来自所述细胞培养物(3; 103)的进料和磁珠，由此，三份磁珠在所述分离系统(1; 101; 201)中循环。 30.根据权利要求22-29中任一项所述的分离系统，其中所述细胞培养物(3; 103;203)、所述磁力分离器(5; 105; 205)和所述洗脱装置(8; 108; 208)通过预先灭菌的柔性管和无菌连接器封闭系统连接。 31.根据权利要求22-30中任一项所述的分离系统，其中所述洗脱池(107)包括洗脱池第一出口(107b)，用于运送所述磁珠以在所述磁力分离器(105)中重复使用，和洗脱池第二出口(107b’)，用于在收集装置(108b)中收集洗脱液和废物。 32.根据权利要求22-31中任一项所述的分离系统，其中所述洗脱池(107)包括洗脱池第一入口(107a)，用于从所述磁力分离器(105)接收磁珠，和洗脱池第二入口(107a’)，用于从缓冲液提供装置(108a)接收洗脱缓冲液、就地清洗CIP缓冲液和平衡缓冲液。 33.根据权利要求22-32中任一项所述的分离系统，其中所述洗脱池(7; 107; 207)包括保留装置(502a-c; f-h)以将所述磁珠保持在所述洗脱池内并允许过量的缓冲液从所述洗脱池排出。 34.根据权利要求33所述的分离系统，其中所述保留装置(502a-c; f-h)为夹管阀(pinch)、磁力或过滤器。 35.根据权利要求22-34中任一项所述的分离系统，其中所述洗脱池(7; 107; 207)包括用于在所述洗脱池中填充所述磁珠的接合器(504)和配置为将所述磁珠保持在所述洗脱池内同时允许其他缓冲液从所述洗脱池排出的保留装置(502a-c; f-h)。 36.根据权利要求35所述的分离系统，其中所述接合器(504)还配置为通过朝向所述洗脱池的出口(7b; 107b; 207b)推动所述接合器(504)并移除配置为将所述磁珠保持在所述洗脱池(7; 107; 207)内的保留装置(502a-e)而用于运送所述磁珠以在所述磁力分离器(5; 105)中重复使用。 37.根据权利要求22-36中任一项所述的分离系统，其中所述洗脱池(7; 107; 207)包括接合器(504)，在磁珠浆料开始从所述洗脱池的底部入口(506)充填所述洗脱池时所述接合器(504)位于所述洗脱池中的起始位置处，所述起始位置比最终位置更靠近所述底部入口，所述最终位置对应于向所述洗脱池中充填磁珠完成时所述接合器的位置，所述接合器保持朝向所述浆料的流动方向的力并允许缓冲液在充填过程中通过所述接合器(504)排出。 38.根据权利要求22-37中任一项所述的分离系统，所述分离系统还包括连接于洗脱池出口(107b)并配置为从所述洗脱池接收所述磁珠的中间池(111)，所述中间池(111)还配置为运送所述磁珠以可能地在所述磁力分离器(5; 105; 205)中重复使用。 39.根据权利要求38所述的分离系统，其中所述中间池(111)包括排泄装置以从所述中间池(111)去除过量的缓冲液。 40.根据权利要求39所述的分离系统，其中所述排泄装置包括磁体，用于由磁力将所述磁珠保持在所述中间池(111)内同时从所述中间池排泄缓冲液。 41.一种配置为连接在根据权利要求22-41中任一项所述的分离系统中的洗脱装置(8;108; 208)，所述洗脱装置包括洗脱池(7; 107; 207)，所述洗脱池包括洗脱池入口(7a;107a; 207a)，其配置为连接于磁力分离器(5; 105; 205)的出口(5b; 105b; 205b)以接收以具有缓冲液的浆料形式的来自所述磁力分离器的磁珠，其中所述洗脱装置(8; 108;208)配置为从所述磁珠洗脱生物分子。 42.根据权利要求41所述的洗脱装置，其中所述洗脱池(7; 107; 207)包括洗脱池出口(7b; 107b; 207b)，其配置为从所述洗脱池运送所述磁珠以在所述磁力分离器(5; 105;205)中重复使用。 43.根据权利要求41-42中任一项所述的洗脱装置，其中所述洗脱装置(8; 108; 208)包括连接于洗脱池入口(7a; 107a’; 207a’)的缓冲液提供装置(8a; 108a; 208a)和连接于洗脱池出口(7b; 107b’; 207b’)的收集装置(8b; 108b; 208b)，并且其中所述洗脱装置配置为通过从所述缓冲液提供装置提供洗脱缓冲液并在所述收集装置中收集洗脱液来进行洗脱，并还可能地通过从所述缓冲液提供装置提供清洁缓冲液并在所述收集装置中收集废物来进行就地清洗CIP，并且还可能地通过从所述缓冲液提供装置提供平衡缓冲液来进行所述洗脱池中所述磁珠的平衡。 44.根据权利要求41-43中任一项所述的洗脱装置，其中所述洗脱池(107)包括洗脱池第一出口(107b)，用于运送所述磁珠以在所述磁力分离器(105)中重复使用，和洗脱池第二出口(107b’)，用于在收集装置(108b)中收集洗脱液和废物。 45.根据权利要求41-44中任一项所述的洗脱装置，其中所述洗脱池(107)包括洗脱池第一入口(107a)，用于从所述磁力分离器(105)接收磁珠，和洗脱池第二入口(107a’)，用于从缓冲液提供装置(108a)接收洗脱缓冲液、就地清洗CIP缓冲液和平衡缓冲液。 46.根据权利要求41-45中任一项所述的洗脱装置，其中所述洗脱池(7; 107; 207)包括保留装置(502a-c; f-h)以将所述磁珠保持在所述洗脱池内并允许过量的缓冲液从所述洗脱池排出。 47.根据权利要求46所述的洗脱装置，其中所述保留装置(502a-e)为夹管阀(pinch)、磁力或过滤器。 48.根据权利要求41-47中任一项所述的洗脱装置，其中所述洗脱池(7; 107; 207)包括用于在所述洗脱池中填充所述磁珠的接合器(504)和配置为将所述磁珠保持在所述洗脱池内同时允许其他缓冲液从所述洗脱池排出的保留装置(502a-c; f-h)。 49.根据权利要求48所述的洗脱装置，其中所述接合器(504)还配置为通过朝向所述洗脱池的出口(7b; 107b; 207b)推动所述接合器(504)并移除配置为将所述磁珠保持在所述洗脱池(7; 107; 207)内的保留装置(502a-c; f-h)而用于运送所述磁珠以在所述磁力分离器(5; 105)中重复使用。 50.根据权利要求41-49中任一项所述的洗脱装置，其中所述洗脱池(7; 107; 207)包括接合器(504)，在磁珠浆料开始从所述洗脱池的底部入口(506)充填所述洗脱池时所述接合器位于所述洗脱池中的起始位置处，所述起始位置比最终位置更靠近所述底部入口，所述最终位置对应于向所述洗脱池中充填磁珠完成时所述接合器的位置，所述接合器保持朝向所述浆料的流动方向的力并允许缓冲液在充填过程中通过所述接合器(504)排出。
所属类别：	发明专利