专利名称: |
一种高通量免疫印迹分析的方法和装置 |
摘要: |
本发明提供了用于包括化学物质、多肽、核酸分子、或者细胞或病毒的原位释放的蛋白质分子的抗原含量的高通量免疫印迹分析的方法和装置。该方法能够提供高度敏感和准确的结果,适用于分析包括细胞和组织裂解液在内的复杂系统。 |
专利类型: |
发明专利 |
国家地区组织代码: |
山东;37 |
申请人: |
烟台康体诊医疗科技有限公司 |
发明人: |
张建棣 |
专利状态: |
有效 |
申请日期: |
2018-02-13T00:00:00+0800 |
发布日期: |
2019-08-06T00:00:00+0800 |
申请号: |
CN201880005165.4 |
公开号: |
CN110100179A |
代理机构: |
北京英赛嘉华知识产权代理有限责任公司 |
代理人: |
王达佐;洪欣 |
分类号: |
G01N33/53(2006.01);G;G01;G01N;G01N33 |
申请人地址: |
山东省烟台市莱山区港城东大街1295号百伟国际大厦 |
主权项: |
1.一种表征抗原的方法,其包括: (a)结合抗原到复数的膜单元上,其中,使每个所述膜单元附着于复数的支承体的一个上; (b)选择同所述抗原相结合的第一抗体; (c)将所述第一抗体同所述抗原相结合以形成免疫复合物从而在所述复数的膜单元的每个中具有同其相连接的所述免疫复合物; (d)使所述免疫复合物发出信号; (e)检测来自所述复数的膜单元的每个中所形成的所述免疫复合物发出的所述信号。 2.如权利要求1所述的方法,其中,所述免疫复合物通过选自于由标记酶、放射性同位素、DNA标记物、荧光标记物、电化学标记物及其混合物所构成的组中的标记物来进行标记。 3.如权利要求2所述的方法,其中, 所述标记酶包括辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶或葡萄糖氧化酶;并且所述荧光标记物包括藻红蛋白。 4.如权利要求1所述的方法,其中,所述标记物直接同所述第一抗体相接合或者间接通过针对所述第一抗体的第二抗体相接合。 5.如权利要求4所述的方法,其中,所述第一抗体或所述第二抗体或两者都预先用标记物进行标记。 6.如权利要求1所述的方法,其中,所述免疫复合物发出的所述信号为光子或放射物。 7.如权利要求1所述的方法,其中,从所述复数的膜单元的每个中的所述免疫复合物发出的所述信号是同所述信号的强度相对应的数值。 8.如权利要求7所述的方法,其中,所述信号的所述强度不是来自于图像转化。 9.如权利要求1所述的方法,其中,所述复数的支承体的每个通过连接构件来同平面结构相结合,其中所述连接构件包括第一端和第二端,所述第一端结合于所述平面结构,而所述复数的支承体中的一个同所述连接构件的所述第二端相结合,或者通过所述连接构件的所述第一端与所述第二端之间相结合。 10.如权利要求1所述的方法,其中,所述膜单元是硝酸纤维素膜或PVDF膜,或者是表面覆盖的硝酸纤维素层或PVDF层。 11.如权利要求6所述的方法,其中,所述光子通过标记物的颜色反应或者标记物的化学发光反应或者标记物的荧光发射来产生。 12.如权利要求1所述的方法,其中,来自于所述复数的膜单元的每个的所述信号之间互不干扰。 13.如权利要求1所述的方法,其中,还包括利用步骤(a)至(e)构建剂量曲线,其中所述剂量曲线使来自所述抗原的所述信号强度与样品量相关联,来自所述抗原的所述信号是从含有所述抗原的免疫复合物发出的信号。 14.如权利要求13所述的方法,其中,所述剂量曲线具有所述抗原发出的信号强度同样品量实质上呈线性关系的线性区间。 15.如权利要求14所述的方法,其中,所述样品是含有所述抗原的裂解液或者是所述抗原的标准品。 16.如权利要求15所述的方法,其还包括:测量来自于预定量的所述裂解液中所述抗原的信号强度,其中,所述裂解液的所述预定量位于所述裂解液的剂量曲线的所述线性区间。 17.如权利要求16所述的方法,其还包括:将所测量的信号强度同所述抗原的标准剂量曲线的线性区间中的所述抗原的量相关联以获得裂解液中的所述抗原的量。 18.一种用于免疫印迹分析的方法,其包括: 利用一种具有相互分离的复数的膜单元的多单元板,其中,每个膜单元含有膜; 结合含有抗原的裂解液到所述复数的膜单元的一个或多个上; 选择同抗原相结合的第一抗体; 结合所述第一抗体到所述抗原以形成附着到所述复数的膜单元的一个或多个上的免疫复合物,其中,所述第一抗体直接同标记酶相接合,或者通过一个或多个所述第二抗体间接同标记酶相接合; 从所述膜单元的一个或多个上检测免疫复合物中的所述标记酶发出的光信号。 19.如权利要求18所述的方法,其还包括:获得所述膜单元的一个或多个分别发出的所述信号并将所述信号的强度转化为数值。 20.如权利要求19所述的方法,其中,所述信号的强度并非基于所述信号形成的图像进行测量的。 21.如权利要求18所述的方法,其中,所述膜单元是硝酸纤维素膜或PVDF膜,或者是基材表面覆盖的硝酸纤维素层或者PVDF层。 22.如权利要求17所述的方法,其还包括:确立所述裂解液的剂量曲线,其中,导入所述复数的膜单元的一个或多个中的所述裂解液的量位于所述剂量曲线的线性区间。 |
所属类别: |
发明专利 |