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原文传递一种双功能生物传感器HRP@ZIF-8/DNA的制备方法及其应用

专利名称：	一种双功能生物传感器HRP@ZIF-8/DNA的制备方法及其应用
摘要：	本发明属于无机材料应用技术领域，公开了一种双功能生物传感器HRP@ZIF‑8/DNA的制备方法及其应用。本发明采用生物矿化法将辣根过氧化物酶包埋于金属有机框架ZIF‑8的孔道结构中，实现对酶的固定化；另外，富含π电子的配体和部分配位的金属离子通过π‑π堆积和静电相互作用赋予ZIF‑8对荧光团标记的单链DNA(ssDNA)的良好亲和力，使其成为优异的荧光猝灭剂。本发明首次将ZIF‑8的载体功能和荧光猝灭特性结合起来开发了HRP@ZIF‑8/DNA杂交系统，用于Hg2+的荧光检测和苯酚的可视化检测。本发明传感器对汞的检测限为0.22nM，同时，用作比色传感器，对苯酚的检测可达到微摩尔水平，是一种经济，有效，高选择性和灵敏的检测方法。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	江苏;32
申请人：	江苏大学
发明人：	智文静;练冬生;王蕾;王宇;王怡
专利状态：	有效
申请日期：	2019-04-30T00:00:00+0800
发布日期：	2019-08-09T00:00:00+0800
申请号：	CN201910362603.9
公开号：	CN110108881A
分类号：	G01N33/58(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	212013 江苏省镇江市京口区学府路301号
主权项：	1.一种双功能生物传感器HRP@ZIF-8/DNA的制备方法，其特征在于，包括如下步骤： (1)生物矿化HRP@ZIF-8：称取辣根过氧化物酶HRP加入到六水合硝酸锌的水溶液中，再向其中加入2-甲基咪唑溶液，充分混合，将混合液置于恒温水浴锅中孵育，反应结束后通过离心和反复清洗收集所得产物，将所得复合材料冷冻干燥并低温储存，备用，该复合材料记为HRP@ZIF-8； (2)HRP@ZIF-8/DNA杂交体系的制备：室温下，将步骤(1)制备的HRP@ZIF-8分散在缓冲溶液中，随后，与荧光标记的适配体溶液混合，孵育直至荧光淬火饱和，形成HRP@ZIF-8/DNA杂交体系，即双功能生物传感器HRP@ZIF-8/DNA。 2.如权利要求1所述的双功能生物传感器HRP@ZIF-8/DNA的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述六水合硝酸锌水溶液和2-甲基咪唑溶液的浓度均为50mM，体积比为1:1；混合液中，辣根过氧化物酶HRP浓度为1-5mg/mL；恒温水浴锅中的孵育温度为30℃，孵育时间为12h。 3.如权利要求2所述的双功能生物传感器HRP@ZIF-8/DNA的制备方法，其特征在于，混合液中，辣根过氧化物酶HRP浓度为2mg/mL。 4.如权利要求1所述的双功能生物传感器HRP@ZIF-8/DNA的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述缓冲溶液为Hepes缓冲液或Tris-HCl缓冲溶液，pH为7.4，浓度为20mM。 5.如权利要求4所述的双功能生物传感器HRP@ZIF-8/DNA的制备方法，其特征在于，缓冲溶液为Hepes缓冲液。 6.如权利要求1所述的双功能生物传感器HRP@ZIF-8/DNA的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，缓冲溶液中，HRP@ZIF-8的浓度为0.01-0.08mg/mL；适配体溶液的浓度为100nM；混合时，体积比为1:1；孵育温度为室温，时间为6-10min。 7.如权利要求6所述的双功能生物传感器HRP@ZIF-8/DNA的制备方法，其特征在于，缓冲溶液中，HRP@ZIF-8的浓度为0.07mg/mL；孵育时间为7min。 8.如权利要求1所述的双功能生物传感器HRP@ZIF-8/DNA的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述的适配体序列为：5′-FAM-TTCTTCTTGCCCCCCTTGTTGTT-3′。 9.将权利要求1～8任一项所述制备方法制得的双功能生物传感器HRP@ZIF-8/DNA用于同时检测低浓度的Hg2+和苯酚的用途。
所属类别：	发明专利