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原文传递 3-肼基苯甲酸衍生化葡聚糖在MALDI-TOF-MS质量校准中的应用

专利名称：	3-肼基苯甲酸衍生化葡聚糖在MALDI-TOF-MS质量校准中的应用
摘要：	本发明属于质谱检测领域，具体公开了一种反应型基质3‑肼基苯甲酸衍生化葡聚糖在MALDI质谱质量校准中的应用。3‑肼基苯甲酸与还原糖末端的半缩醛发生成腙反应，该反应衍生化效率高，且利用靶板在线衍生，操作简便。利用该衍生策略，在正负离子模式下均可检测到衍生化产物。且3‑肼基苯甲酸中所带羧酸根显著提高了还原糖在负离子模式下的离子化效率。本发明用3‑肼基苯甲酸衍生化的葡聚糖作为MALDI质谱的质量校准物，相邻信号峰之间质量相差162Da，对应一个葡萄糖残基，实现了同时在正负离子模式下的精确校准。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	浙江;33
申请人：	浙江大学
发明人：	潘远江;赵晓勇;黄钰
专利状态：	有效
申请日期：	2019-05-15T00:00:00+0800
发布日期：	2019-08-09T00:00:00+0800
申请号：	CN201910406097.9
公开号：	CN110108780A
代理机构：	杭州求是专利事务所有限公司
代理人：	陈升华
分类号：	G01N27/64(2006.01);G;G01;G01N;G01N27
申请人地址：	310058 浙江省杭州市西湖区余杭塘路866号
主权项：	1.3-肼基苯甲酸作为反应型基质衍生化葡聚糖在MALDI-TOF-MS质量校准中的应用。 2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的3-肼基苯甲酸如式(1)所示： 3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，具体步骤如下： (1)试剂配制 DHB为2,5-二羟基苯甲酸，配制DHB甲醇溶液，3-HBA为3-肼基苯甲酸，将3-HBA溶于甲醇和二甲亚砜的混合溶剂中得到3-HBA溶液，然后将DHB甲醇溶液和3-HBA溶液混合得到DHB/3-HBA混合基质溶液，将葡聚糖溶于水中得到葡聚糖水溶液； (2)点样分别取等体积的葡聚糖水溶液和DHB/3-HBA混合基质溶液，依次点在MALDI-TOF-MS仪器的靶板的同一点样孔上，在靶板上直接进行吸打混匀，得到点样后的靶板； (3)靶板衍生化反应点样后的靶板在60～70℃下反应20～40min，样品点完全干燥，得到含质量校准物的靶板； (4)质谱校准将含质量校准物的靶板送入MALDI-TOF-MS质谱仪，分别在正负离子模式采集数据并进行质量校正，仪器校准后所得校正参数将自动用于校准实际样品的质谱检测结果。 4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，步骤(1)中，所述的甲醇和二甲亚砜的混合溶剂中甲醇与二甲亚砜的体积比为7.5～9.5:1。 5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，步骤(1)中，所述的DHB甲醇溶液和3-HBA溶液的体积比为1:0.5～1.5。 6.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，步骤(1)中，所述的DHB/3-HBA混合基质溶液中DHB的浓度为0.3～0.5mol/L。 7.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，步骤(1)中，所述的葡聚糖为还原性葡聚糖，所述的葡聚糖水溶液中葡聚糖的浓度为0.03～0.07mg/mL。 8.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，步骤(2)中，所述的葡聚糖水溶液的点样体积为0.5～1.0μL；所述的DHB/3-HBA混合基质溶液的点样体积为0.5～1.0μL。 9.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，步骤(2)中，在靶板上直接进行吸打混匀使用移液枪直接在靶板进行重复吸打10～20次。 10.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，步骤(3)中，点样后的靶板在65℃下反应30min。
所属类别：	发明专利