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原文传递蛋白抗原及其编码基因和它们在鉴别猪肺炎支原体灭活疫苗抗体和自然感染抗体中的应用

专利名称：	蛋白抗原及其编码基因和它们在鉴别猪肺炎支原体灭活疫苗抗体和自然感染抗体中的应用
摘要：	本发明涉及生物技术领域，具体涉及蛋白抗原及其编码基因和它们在鉴别猪肺炎支原体灭活疫苗抗体和自然感染抗体中的应用，所述蛋白抗原的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明的检测体系能快速、方便、高特异性、高灵敏度的鉴别猪肺炎支原体灭活疫苗免疫抗体和自然感染抗体，不需要复杂仪器，能较好的满足目前对鉴别猪肺炎支原体高免血清抗体和恢复期血清抗体的需要，易于大范围推广应用，具有广阔的市场前景和较大的经济、社会效益。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	重庆;50
申请人：	西南大学
发明人：	丁红雷;徐作波;文玉康
专利状态：	有效
申请日期：	2019-05-07T00:00:00+0800
发布日期：	2019-08-16T00:00:00+0800
申请号：	CN201910374742.3
公开号：	CN110133284A
代理机构：	重庆志合专利事务所(普通合伙)
代理人：	胡荣珲
分类号：	G01N33/68(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	400715 重庆市北碚区天生路2号
主权项：	1.一种蛋白抗原，其特征在于，所述蛋白抗原的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。 2.一种能够编码权利要求1所述的蛋白抗原的基因。 3.根据权利要求2所述的基因，其中，所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。 4.一种重组载体，其特征在于，所述重组载体含有权利要求2或3所述的基因。 5.一种重组菌株，其特征在于，所述重组菌株含有权利要求4所述的重组载体。 6.权利要求1所述的蛋白抗原、权利要求2或3所述的基因、权利要求4所述的重组载体或权利要求5所述的重组菌株在鉴别猪肺炎支原体灭活疫苗抗体和自然感染抗体中的应用。 7.一种用于鉴别猪肺炎支原体灭活疫苗抗体和自然感染抗体的试剂盒，其特征在于，该试剂盒中包括权利要求1所述的蛋白抗原，所述试剂盒中还包括：含有猪肺炎支原体灭活疫苗抗体的高免血清、含有自然感染抗体的恢复期血清、洗涤液、二抗、显色液和终止液。 8.一种用于鉴别猪肺炎支原体自然感染抗体的试剂盒，其特征在于，该试剂盒中包括权利要求1所述的蛋白抗原，所述试剂盒中还包括：含有猪肺炎支原体阴性血清、含有自然感染抗体的恢复期血清、洗涤液、二抗、显色液和终止液。 9.根据权利要求7或8所述的试剂盒，其中，所述蛋白抗原包被在ELISA板上；优选的，将所述蛋白抗原包被在ELISA板上的方法包括：将蛋白抗原以0.1-8μg/mL的包被浓度加入ELISA板的孔中，34-40℃孵育0.5-1.5h进行包被，然后加入封闭液封闭0.3-2h；其中，所述封闭液为含有0.5-10重量％脱脂奶粉的PBS缓冲液。 10.根据权利要求7或8所述的试剂盒，其中，所述洗涤液为含0.04-0.06重量％的Tween-20和0.008-0.012重量％硫柳汞的PBS缓冲液；和/或所述二抗为HRP标记的兔抗猪IgG；和/或所述显色液包括显色液A和显色液B；其中，所述显色液A中，相对于100mL的显色液A，含有2-3g的醋酸钠，0.3-0.35g的柠檬酸，以30％双氧水浓度计的0.04-0.08mL的双氧水；所述显色液B中，相对于100mL的显色液B，含有0.02-0.06g的EDTA·2Na，0.15-0.25g的柠檬酸，8-12mL的甘油，0.035-0.045g的TMB·2HCl；和/或所述终止液为1.5-2.5mol/L的硫酸溶液。
所属类别：	发明专利