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原文传递一种非衍生化法检测试剂盒

专利名称：	一种非衍生化法检测试剂盒
摘要：	本发明涉及一种非衍生化法检测试剂盒。具体地，本发明提供一种非衍生化法检测试剂盒，所述试剂盒包括内标品、萃取剂、流动相。本发明所述的试剂盒与高效液相‑质谱联用能够准确、快速、高效和高灵敏的检测出生物样品中氨基酸和酰基肉碱的含量，从而对疾病进行筛查和预防治疗，且操作简洁快速，准确率和灵敏度高。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	上海;31
申请人：	上海可力梅塔生物医药科技有限公司
发明人：	朱监宝;官培龙
专利状态：	有效
申请日期：	2018-02-23T00:00:00+0800
发布日期：	2019-08-30T00:00:00+0800
申请号：	CN201810155366.4
公开号：	CN110187012A
代理机构：	上海一平知识产权代理有限公司
代理人：	马思敏;徐迅
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	200433 上海市杨浦区翔殷路128号上海理工大学国家大学科技园1号楼C座312-313室
主权项：	1.一种非衍生化法检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括内标品、萃取剂、流动相；其中，所述的内标品包括：同位素标记氨基酸内标品、同位素标记肉碱内标品、同位素标记酰基肉碱内标品，或其组合；所述的流动相包含甲醇、水、羧酸，其中甲醇含量为50％-100％(v/v)，羧酸浓度为0.05-1mol/L，溶剂为水。 2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述的萃取剂包括甲醇、水、羧酸混合液，其中甲醇含量为65％-95％(v/v)，优选70％-90％(v/v)，羧酸浓度为0.1-0.5mol/L，溶剂为水。 3.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述的羧酸选自下组：甲酸、乙酸、草酸，或其组合。 4.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述的同位素标记为同位素标记氨基酸内标品、同位素标记肉碱内标品和/或同位素标记酰基肉碱内标品。 5.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述的同位素标记选自下组：D标记、13C标记、15N标记，或其组合。 6.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒还包括质控品，所述质控品选自下组的一种或多种试剂：氨基酸质控品、肉碱质控品、酰基肉碱质控品。 7.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒还包括选自下组的一种或多种组件：蛋白过滤板、深孔板、透明封口膜、橡胶盖垫。 8.一种如权利要求1所述的试剂盒的用途，其特征在于，用于检测样品中氨基酸、肉碱和/或酰基肉碱的含量。 9.一种用权利要求1所述的试剂盒检测样品中氨基酸、肉碱和/或酰基肉碱的方法，其特征在于，包括步骤： (1)内标液制备提供制备得到含有同位素标记氨基酸内标液、同位素标记肉碱内标液，和/或同位素标记酰基肉碱内标液； (2)工作液准备采用萃取剂稀释所述的同位素标记氨基酸内标液、同位素标记肉碱内标液，和/或同位素标记酰基肉碱内标液分别配制同位素标记氨基酸工作液、同位素标记肉碱工作液，和/或同位素标记酰基肉碱工作液； (3)取样将待测样品和任选的质控品置于蛋白过滤板中； (4)样本萃取将蛋白过滤板对准深孔板中的孔位，将同位素标记氨基酸工作液、同位素标记肉碱工作液，和/或同位素标记酰基肉碱工作液加入到蛋白过滤板的反应孔中，震荡混匀，离心； (5)样本上机检测高效液相色谱-串联质谱仪检测深孔板中样品中氨基酸、肉碱和/或酰基肉碱的含量。 10.如权利要求9所述的方法，其特征在于，在所述的步骤(2)中：萃取剂：同位素标记氨基酸内标液为1：100-300(v/v)，优选1:150-250(v/v)，更优选为1:200(v/v)；和/或萃取剂：同位素标记肉碱内标液为1：100-300(v/v)，优选1:150-250(v/v)，更优选为1:200(v/v)；和/或萃取剂：同位素标记酰基肉碱内标液为1：100-300(v/v)，优选1:150-250(v/v)，更优选为1:200(v/v)。
所属类别：	发明专利