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原文传递一种人源视网膜色素上皮细胞注射液中二甲基亚砜残留的测定方法

专利名称：	一种人源视网膜色素上皮细胞注射液中二甲基亚砜残留的测定方法
摘要：	本发明公开了一种人源视网膜色素上皮细胞注射液中二甲基亚砜残留的测定方法，包括：(1)人源视网膜色素上皮细胞注射液前处理：注射液离心后取上清液进行检测；(2)取一定量上清液加入适量稀释液后混匀；(3)将混合液用气相色谱与质谱联用技术进行残留分析，寻找最优的色谱条件进行方法学验证；(4)使用验证通过的方法进行注射液中二甲基亚砜残留的测定。本发明提供了一种简单、快速有效、结果准确可靠，且为控制人源视网膜色素上皮细胞注射液中二甲基亚砜残留量提供切实可行的方法。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	江苏;32
申请人：	江苏艾尔康生物医药科技有限公司
发明人：	戴舒春;方攀峰;王志刚;冷晓燕;刘辉;王云娟
专利状态：	有效
申请日期：	2019-05-27T00:00:00+0800
发布日期：	2019-08-30T00:00:00+0800
申请号：	CN201910444295.4
公开号：	CN110187024A
代理机构：	上海麦其知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	董红曼
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	214028 江苏省无锡市新吴区长江路34号地块科技创业园一区502号
主权项：	1.一种人源视网膜色素上皮细胞注射液中二甲基亚砜残留的测定方法，其特征在于，所述测定方法中，以人源视网膜色素上皮细胞注射液离心后取得的离心上清液作为待测样品，以二甲基亚砜对照品作为外标，用有机类试剂作为稀释剂将所述待测样品和对照品分别进行稀释，经滤膜过滤后，利用气相色谱与质谱联用技术进行分析检测。 2.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述测定方法包括以下步骤： (1)待测样品的制备：将人源视网膜色素上皮细胞注射液转移至离心管中，离心，取离心后的上清液，加稀释剂进行稀释即得待测样品； (2)对照品溶液的制备：称取二甲基亚砜对照品至容量瓶中，加稀释剂梯度稀释，得到对照品溶液； (3)分析检测：首先，将步骤(2)得到的对照品溶液经滤膜过滤，然后利用气相色谱与质谱联用技术进行测定，得到标准校准曲线；然后将步骤(1)得到的待测样品经滤膜过滤后，利用气相色谱与质谱联用技术进行分析检测，然后通过所述的标准校准曲线及计算公式计算待测样品中二甲基亚砜的残留量；若测定过程中，所述待测样品的浓度超出所述对照品溶液的线性范围，则需要对所述待测品进行稀释。 3.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述稀释剂为甲醇、乙腈、乙醇中的一种或几种。 4.根据权利要求1或2所述的测定方法，其特征在于，所述待测样品中含有无机盐，包括氯化镁、氯化钙、醋酸钠、柠檬酸钠。 5.根据权利要求2所述的测定方法，其特征在于，步骤(1)中，所述离心的条件为500g-1500g离心2分钟-15分钟；和/或，步骤(2)中，所述稀释剂为甲醇、乙腈、乙醇中的一种或几种。 6.根据权利要求2所述的测定方法，其特征在于，所述计算公式如下：式中：WSTD＝对照品中DMSO质量mg， WSPL＝待测样品的质量mg， BSTD＝对照品中DMSO的平均峰面积， ASPL＝待测样品中DMSO的峰面积， VSPL＝待测样品稀释体积ml， VSTD＝对照品稀释体积ml， PSTD＝对照品的含量％。 7.根据权利要求1或2所述的测定方法，其特征在于，所述气相色谱与质谱联用技术进行分析检测的条件为：气相色谱的条件：在毛细管色谱柱中，进样量为0.5μl-2μl，进样口温度为160℃-260℃，流速为0.5ml/min-1.5ml/min，分流比为15-25：1，载气为氦气，采用程序升温；检测仪为质谱检测仪：采集模式为SIM模式，定量离子为61/65/78，溶剂延迟1分钟-5分钟，检测器关闭时间为6分钟-20分钟。 8.根据权利要求7所述的测定方法，其特征在于，所述程序升温的条件为：70℃-120℃运行3分钟-10分钟，然后以20℃-35℃每分钟升至170℃-240℃，运行1-5分钟；然后在200℃-280℃下运行2分钟-6分钟。 9.根据权利要求2所述的测定方法，其特征在于，步骤(3)中，所述滤膜包括尼龙膜、聚四氟乙烯膜、聚偏二氟乙烯膜中的一种或几种；所述滤膜的孔径为0.22μm、0.3μm、0.45μm或0.65μm。 10.如权利要求1所述的测定方法在测定细胞类产品中二甲基亚砜残留中的应用。
所属类别：	发明专利