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原文传递 一种免疫层析试纸卡的快速定量检测方法
专利名称: 一种免疫层析试纸卡的快速定量检测方法
摘要: 本发明公开了一种免疫层析试纸卡的快速定量检测方法,包括以下步骤:(1)获取原始图像;(2)将原始图像转换成灰度图像并将灰度图像压缩成一维原始曲线;(3)对一维原始曲线进行基线校正,得到校正后曲线;(4)对校正后曲线进行特征值计算;(5)根据特征值计算待测物浓度。本发明提出的免疫层析试纸卡的快速定量检测方法,能够快速得到待测物的浓度,而且计算量非常小,无需设置参数,容易在普通的嵌入式仪器上实现,达到快速自动化定量检测免疫层析试纸卡的目的。
专利类型: 发明专利
国家地区组织代码: 湖北;42
申请人: 华中科技大学
发明人: 杨海;郭文胜;张德军;杨祥良
专利状态: 有效
申请日期: 2018-02-12T00:00:00+0800
发布日期: 2019-08-23T00:00:00+0800
申请号: CN201810145287.5
公开号: CN110161233A
代理机构: 华中科技大学专利中心
代理人: 许恒恒;李智
分类号: G01N33/558(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址: 430074 湖北省武汉市洪山区珞喻路1037号
主权项: 1.一种免疫层析试纸卡的快速定量检测方法,其特征在于,包括以下步骤: (1)将浓度未知的待测物滴加到免疫层析试纸卡上,捕获该免疫层析试纸卡的显色图像,获得原始图像; (2)将步骤(1)中所述的原始图像转换为灰度图像后,将该灰度图像压缩成一维原始曲线; (3)将步骤(2)中所述的一维原始曲线转换为导数曲线,再根据该导数曲线获得基线;通过该基线对所述一维原始曲线进行校正,获得校正后曲线; (4)根据步骤(3)中所述的校正后曲线计算滴加了浓度未知的待测物的免疫层析试纸卡T线特征值TV和C线特征值CV; (5)将浓度已知的不同浓度待测物分别滴加到与步骤(1)所述的免疫层析试纸卡相同的试纸上,每一种浓度的待测物滴加到一张试纸卡上,所述不同浓度待测物至少为2种不同浓度的待测物;经过步骤(1)-步骤(4)后,得到与浓度已知的不同浓度待测物浓度相对应的T线特征值和C线特征值;根据浓度已知的不同浓度待测物浓度和其对应的T线特征值或C线特征值,分别拟合得到待测物浓度与T线特征值或C线特征值的标准曲线和函数; (6)根据步骤(4)所述浓度未知的待测物的免疫层析试纸卡T线特征值TV和C线特征值CV,与步骤(5)中对应的函数,计算得到所述浓度未知的待测物的浓度。 2.如权利要求1所述的免疫层析试纸卡的快速定量检测方法,其特征在于,所述步骤(4)还包括将所述浓度未知的待测物的免疫层析试纸卡T线特征值TV与C线特征值CV相比,得到浓度未知的待测物的免疫层析试纸卡T线特征值TV与C线特征值CV的商值;所述步骤(5)还包括根据浓度已知的不同浓度待测物浓度和其对应的T线特征值与C线特征值的商值,拟合得到待测物浓度和T线特征值与C线特征值的商值的标准曲线和函数;所述步骤(6)还包括根据步骤(4)中所述的浓度未知的待测物的免疫层析试纸卡T线特征值TV与C线特征值CV的商值,与步骤(5)中对应的函数,计算得到所述待测物的浓度。 3.如权利要求1或2所述的免疫层析试纸卡的快速定量检测方法,其特征在于,步骤(2)所述的将原始图像转换为灰度图像的公式为:Gray=x*R+y*G+z*B,其中x+y+z=1,且y>x>z;所述公式中R、G和B分别对应原始图像中红、绿和蓝3种原色在每一个像素点的亮度,原始图像每一像素点对应的颜色亮度根据上述公式计算得到的Gray值的整数部分即为转换成灰度图像后该像素点的灰度值。 4.如权利要求3所述的免疫层析试纸卡的快速定量检测方法,其特征在于,步骤(2)所述将灰度图像压缩成一维原始曲线的公式为:其中(1≤i≤m,1≤j≤n);所述公式中m和n分别表示所述灰度图像任意一列和任意一行的像素点总数,Uij是灰度图像中第i行第j列的像素点的灰度值,Yj是灰度图像上横坐标为j的列对应的所有行的像素点的灰度值的平均值,也即是所述一维原始曲线上横坐标为j的点的纵坐标值。 5.如权利要求4所述的免疫层析试纸卡的快速定量检测方法,其特征在于,步骤(3)所述一维原始曲线转换为导数曲线的公式为: 其中,j是所述一维原始曲线上点的横坐标值,Yj是所述一维原始曲线上横坐标为j的纵坐标值,Yj+1是所述一维原始曲线上横坐标为j+1的纵坐标值,Yj-1是所述一维原始曲线上横坐标为j-1的纵坐标值,Zj是得到的导数曲线上横坐标为j的点的纵坐标值。 6.如权利要求5所述的免疫层析试纸卡的快速定量检测方法,其特征在于,步骤(3)所述获得基线的方法为:确定所述导数曲线横坐标大于等于1且小于等于[0.5*n]的部分,纵坐标值最小点对应的横坐标值s1和纵坐标值最大点对应的横坐标值t1,以及导数曲线横坐标大于等于[0.5*n]且小于等于n的部分,纵坐标值最小点对应的横坐标值s2和纵坐标值最大点对应的横坐标值t2,将s1、t1、s2和t2对所述一维原始曲线求取基线,其计算公式是: 其中,Yj、Yt1、Ys1、Yt2和Ys2分别表示所述一维原始曲线上横坐标为j、t1、s1、t2和s2的点的纵坐标值,j是所述一维原始曲线上点的横坐标值,Bj是得到的基线上横坐标为j的点的纵坐标值。 7.如权利要求6所述的免疫层析试纸卡的快速定量检测方法,其特征在于,步骤(3)所述对一维原始曲线进行校正的公式为:Pj=Bj-Yj(1≤j≤n),其中Bj是所述基线上横坐标为j的纵坐标值,Yj是一维原始曲线上横坐标为j的纵坐标值,Pj是校正后曲线上横坐标为j的点的纵坐标值。 8.如权利要求7所述的免疫层析试纸卡的快速定量检测方法,其特征在于,步骤(4)所述T线特征值TV和C线特征值CV的计算公式为: 其中,Pj是校正后曲线上横坐标为j的点的纵坐标值。 9.如权利要求1所述的免疫层析试纸卡的快速定量检测方法,其特征在于,步骤(1)所述免疫层析试纸卡为胶体金免疫层析试纸卡、乳胶免疫层析试纸卡、胶体碳免疫层析试纸卡或磁微粒免疫层析试纸卡; 优选地,步骤(5)所述不同浓度待测物至少为2-10种不同浓度的待测物。 10.如权利要求1所述的免疫层析试纸卡的快速定量检测方法,其特征在于,步骤(5)所述拟合得到待测物浓度与T线特征值、C线特征值或T线特征值与C线特征值的商值的标准曲线是采用四参数Logistic曲线或者分段线性拟合方法得到。
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