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原文传递以二氧化钛纳米棒复合材料为电化学示踪剂的电化学适配体传感器的构建方法

专利名称：	以二氧化钛纳米棒复合材料为电化学示踪剂的电化学适配体传感器的构建方法
摘要：	本发明涉及一种以TiO2纳米棒复合材料为电化学示踪剂的电化学适配体传感器的构建方法：通过醇还原法将Pt‑Sn双金属纳米颗粒均匀地沉积在圆柱形TiO2纳米棒的表面合成出PtSn@TiO2纳米复合材料。将其分散于壳聚糖溶液中并滴加在GCE电极表面，以BS3为双氨基交联剂将NH2‑cDNA固定在修饰的电极表面，接着通过NH2‑cDNA和适配体之间的DNA杂交将链霉素适体固定在电极上。当引入链霉素和核酸外切酶混合物时，适配体可以优先与链霉素特异性结合并与电极表面的NH2‑cDNA分离形成单链DNA结构。仅作用于单链DNA的核酸外切酶选择性地消化降解单链NH2‑cDNA、适配体‑链霉素复合物使之释放链霉素，被释放的链霉素可以循环往复地与电极表面的剩余的适配体特异性结合。该电化学适配体传感器能够快速灵敏地检测链霉素，且线性范围较大、检测限较低。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	河南;41
申请人：	河南大学
发明人：	刘小强;李乐乐;杨立威;唐云飞;张思;郑贺杰
专利状态：	有效
申请日期：	2019-05-21T00:00:00+0800
发布日期：	2019-08-23T00:00:00+0800
申请号：	CN201910422514.9
公开号：	CN110161099A
代理机构：	郑州联科专利事务所(普通合伙)
代理人：	时立新;杨海霞
分类号：	G01N27/327(2006.01);G;G01;G01N;G01N27
申请人地址：	475001 河南省开封市明伦街85号
主权项：	1.一种Pt-Sn@TiO2 /GCE电极的制备方法，其特征在于，包括如下步骤： ①TiO2纳米棒的制备： ②Pt-Sn@TiO2纳米复合材料的制备：将0.19 g K2PtCl6和0.044-0.045 g SnCl2·2H2O溶解在乙二醇中，再调节pH至11-12，然后加入0.4g TiO2纳米棒，混匀，然后在N2氛围下于150-160℃回流3-4小时，在搅拌条件下冷却至室温，洗涤至中性，收集沉淀并干燥即为Pt-Sn@TiO2纳米复合材料，备用； ③Pt-Sn@TiO2 /GCE电极的制备：将1-2 mg步骤②所得Pt-Sn @ TiO2纳米复合材料均匀分散于1mL 0.2％壳聚糖醋酸溶液中获得悬浮液，然后将悬浮液旋涂在洁净的玻碳电极上，室温下晾干，即为Pt-Sn@TiO2 /GCE电极。 2.如权利要求1所述Pt-Sn@TiO2 /GCE电极的制备方法，其特征在于，步骤①中TiO2纳米棒经下述步骤制备获得：在冰水浴0-5℃条件下，将18-20 mL超纯水、1.7-1.9 mL TiCl4 、1.7-1.9mL氯仿混合均匀，然后于160-180℃反应12-24h，冷却至室温，洗涤至中性，收集产物，干燥即得。 3. 采用权利要求1或2任一所述制备方法制备得到的Pt-Sn@TiO2 /GCE电极。 4.利用权利要求3所述Pt-Sn@TiO2 /GCE电极构建以TiO2纳米棒复合材料为电化学示踪剂的电化学适配体传感器的方法，其特征在于，包括如下步骤： 1）将含2-3 mg·mL-1 BS3的PBS缓冲液滴加到Pt-Sn@TiO2 /GCE电极表面，并在室温下孵育1 -2h； 2）将5 μL 1.5-2μM与链霉素适配体互补的氨基化DNA链固定到步骤1）制备所得电极表面，4-10℃孵育10-12h，用PBS缓冲液洗涤，再用5 μL封闭缓冲液室温孵育1-2 h，用PBS缓冲液洗涤以除去多余的封闭缓冲液，最后用5 μL 1.5-2μM链霉素适配体37℃孵育1 h，PBS缓冲液冲洗以除去多余的链霉素适配体，即获得适配体传感器。 5.如权利要求4所述构建以TiO2纳米棒复合材料为电化学示踪剂的电化学适配体传感器的方法，其特征在于，步骤2）中所用封闭缓冲液为：含3%牛血清蛋白的PBS缓冲液。 6.利用权利要求4或5所述方法构建得到的以TiO2纳米棒复合材料为电化学示踪剂的电化学适配体传感器。 7.权利要求6所述以TiO2纳米棒复合材料为电化学示踪剂的电化学适配体传感器在检测链霉素中的应用。
所属类别：	发明专利