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原文传递 HPLC-ECD测定益母草碱含量的方法

专利名称：	HPLC-ECD测定益母草碱含量的方法
摘要：	本方案公开了中成药药效成分的检测领域，HPLC‑ECD测定益母草碱含量的方法，该方法针对中药材中的益母草碱含量测定，液相分离流动相由体积比为30％的甲醇与70％的50mmol/L乙酸铵缓冲液组成，针对血浆中益母草碱含量测定，液相分离流动相由体积比为12.5％的乙腈与87.5％的50mmol/L乙酸铵缓冲液组成，且流动相的pH＝7.0；电化学检测条件采用安培检测时，检测电压700‑800mV；或采用库伦检测时，ECD‑1的电压设置为200～250mV；ECD‑2的电压设置为700～800mV。采用本方案检测中药或血浆中的益母草碱，益母草碱具有较好的响应效果，提高了检测的灵敏度。实施本方案涉及的仪器设备相对于质谱仪器成本低，降低企业仪器设备投入成本。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	贵州;52
申请人：	遵义医科大学
发明人：	陈荣祥;任海琼;潘礼婵;刘涛;吴小燕;单文玲
专利状态：	有效
申请日期：	2019-06-28T00:00:00+0800
发布日期：	2019-08-27T00:00:00+0800
申请号：	CN201910576141.0
公开号：	CN110174481A
代理机构：	重庆强大凯创专利代理事务所(普通合伙)
代理人：	向林
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	563000 贵州省遵义市汇川区大连路201号
主权项：	1.HPLC-ECD测定益母草碱含量的方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤一、样品处理，药材中益母草碱的提取：准备益母草药材，粉碎后称取益母草药材粉末，加入甲醇作为萃取剂，超声处理并将萃取液离心后其上清液采用有机滤膜过滤；步骤二、过滤后的上清液进行液相分离，液相分离的色谱条件为： (1)流动相：由体积比为30％的甲醇与70％的50mmol/L乙酸铵缓冲液组成，pH为7.0；或采用由磷酸盐配制的缓冲溶液，pH为7.0； (2)色谱柱：C18色谱柱，色谱柱规格为2.1100mm，填料粒径小于2.5μm； (3)洗脱方法：流速为0.2～0.5mL/min，等度洗脱，色谱柱温度为30℃；步骤三、液相分离后，采用电化学检测器进行测定，电化学检测条件：电化学检测器配置的检测池为安培检测池或库伦检测池；采用安培检测时，检测电压700-800mV；采用库伦检测时，ECD-1的电压设置为200～250mV；ECD-2的电压设置为700～800mV。 2.HPLC-ECD测定益母草碱含量的方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤一、样品处理，血浆中益母草碱的提取：200～250g的大鼠，按照20mg/kg体重灌胃益母草碱水溶液；分别于5min,15min，30min,45min，90min,120min，180min,240min后眼眶采血，向所采血液中加2倍体积且浓度为10％的三氯乙酸沉淀蛋白，离心后取上清液备用；步骤二、上清液进行液相分离，液相分离色谱条件为 (1)流动相：由体积比为12.5％的乙腈与87.5％的50mmol/L乙酸铵缓冲液组成，pH＝7.0；或采用由磷酸盐配制的缓冲溶液，pH为7.0； (2)色谱柱：C18色谱柱，色谱柱规格为2.1100mm，填料粒径小于2.5μm； (3)洗脱方法：流速为0.2～0.5mL/min，等度洗脱，色谱柱温度为30℃；步骤三、液相分离后，采用电化学检测器进行测定，电化学检测条件：电化学检测器配置的检测池为安培检测池或库伦检测池；采用安培检测时，检测电压700-800mV；采用库伦检测时，ECD-1的电压设置为200～250mV；ECD-2的电压设置为700～800mV。 3.根据权利要求1或2所述的HPLC-ECD测定益母草碱含量的方法，其特征在于：所述步骤二中ECD-1为250mV。 4.根据权利要求3所述的HPLC-ECD测定益母草碱含量的方法，其特征在于：所述步骤二中ECD-2为750mV。
所属类别：	发明专利