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原文传递 ABO溶血病快速检测试纸
专利名称: ABO溶血病快速检测试纸
摘要: 本发明公开了一种ABO溶血病快速检测试纸,其特征是,包括背衬、依次置于背衬上的样品垫、胶体金结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫和沿样品垫至吸水垫的方向依次设在硝酸纤维素膜上的IgG抗A抗体检测线、IgG抗B抗体检测线以及质控线。本发明可快速检测新生儿ABO溶血病,使用操作简单,检测快速且结果准确度高,可满足急诊快速检测、家庭个人、基层医院常规试验等需求。
专利类型: 发明专利
国家地区组织代码: 云南;53
申请人: 昆明市儿童医院
发明人: 屈柯暄;吕孟兴;宝福凯;奎莉越;杜廷义
专利状态: 有效
申请日期: 2019-05-09T00:00:00+0800
发布日期: 2019-08-27T00:00:00+0800
申请号: CN201910386083.5
公开号: CN110174511A
代理机构: 北京劲创知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人: 杨金贤
分类号: G01N33/558(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址: 650000 云南省昆明市西山区前兴路228号
主权项: 1.一种ABO溶血病快速检测试纸,其特征是,包括背衬、依次置于背衬上的样品垫、胶体金结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫和沿样品垫至吸水垫的方向依次设在硝酸纤维素膜上的IgG抗A抗体检测线、IgG抗B抗体检测线以及质控线; 所述IgG抗A抗体检测线是由人血型A抗原包被的胶体金颗粒喷涂于硝酸纤维素膜上形成; 所述IgG抗B抗体检测线是由人血型B抗原包被的胶体金颗粒喷涂于硝酸纤维素膜上形成; 所述质控线由葡萄球菌A蛋白(Staphylococcal Protein A,SPA)包被的胶体金颗粒喷涂于硝酸纤维素膜上形成。 2.根据权利要求1所述的ABO溶血病快速检测试纸,其特征在于:所述血型A、血型B抗原的制备方法为: ①取试剂标准红细胞或新鲜A型或B型静脉血1mL为原料; ②把原料与盐水按体积比1:1混匀,将混合物在1760g离心力下,90秒钟离心洗涤3次,末次弃上清后制备为压积红细胞; ③在压积红细胞中加入10mL,质量分数5%的十二烷基磺酸钠(SDS),室温下放置3分钟后,用RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)处理10分钟,混匀后1760g离心5分钟弃上清;加入纯水至原体积混匀1760g离心力5分钟弃上清,重复用纯水洗涤,直到上清无色透明;弃上清,利用有机溶剂处理,收集下层微白色沉淀物,即为血型抗原物质,即血型A型或B型抗原,于2~8℃储存备用。 3.根据权利要求2所述的ABO溶血病快速检测试纸,其特征在于:所述血型A抗原包被的胶体金颗粒、血型B抗原包被的胶体金颗粒和葡萄球菌A蛋白包被的胶体金颗粒的制备方法: S1:以血型A抗原或血型B抗原或葡萄球菌A蛋白为原料; S2:在电磁棒匀速搅拌下,在S1步骤原料溶液中缓慢加入0.1mol/L的K2CO3溶液,调整溶液PH值至9.0,按1:2的体积比,加入粒度大小为10nm粒径的胶体金溶液,加入完毕后继续搅拌10分钟;然后,加入10ml稳定剂以防止膜蛋白与胶体金聚合发生沉淀;溶液混匀1760g离心3分钟后弃上清液,用ABO血型反定型复溶液复溶,复溶后的试剂即为血型A抗原包被的胶体金颗粒或血型B抗原包被的胶体金颗粒或葡萄球菌A蛋白包被的胶体金颗粒,储存于2~8℃。 4.根据权利要求3所述的ABO溶血病快速检测试纸,其特征在于:所述血型A抗原包被的胶体金颗粒或血型B抗原包被的胶体金颗粒的喷涂方法为:将血型A或B抗原包被的胶体金颗粒使用0.10mol/L的PH值为9.2的PBS调节其浓度为0.5mg/mL,加入体积分数为1%Tween-20,使用划膜仪将其喷于硝酸纤维素膜表面作为IgG抗A抗体检测线或IgG抗B抗体检测线,划膜量为0.5~1.0μl/cm; 所述葡萄球菌A蛋白包被的胶体金颗粒喷涂方法为:应用0.15mol/L的PH值为6.2的PBS调节其浓度为0.1mg/mL,使用划膜仪将其喷于硝酸纤维素膜表面作为质控线,划膜量为0.1~0.5μl/cm; 每条线之间间隔为15mm,所述划膜结束后立即放入37℃烘箱中干燥过夜,8~25℃室温保存备用。
所属类别: 发明专利
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