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原文传递一种适配体电化学传感器的应用方法

专利名称：	一种适配体电化学传感器的应用方法
摘要：	一种适配体电化学传感器的应用方法，其特征在于适配体电化学传感器用于土霉素检测；土霉素检测方法包括两个步骤：（1）制作标准曲线；（2）测定样品土霉素浓度。本发明可以实现土霉素的高灵敏高选择性检测，适配体通过共价结合的方式固定，有效提高传感器的性能，可以实现样品中土霉素的快速检测，具有很好的应用前景。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	山西;14
申请人：	山西大学
发明人：	杨钰昆;尉立刚;范三红;王小敏;郭彩霞;张国华;张锦华
专利状态：	有效
申请日期：	2019-05-31T00:00:00+0800
发布日期：	2019-09-17T00:00:00+0800
申请号：	CN201910472354.9
公开号：	CN110243903A
代理机构：	太原市科瑞达专利代理有限公司
代理人：	卢茂春
分类号：	G01N27/327(2006.01);G;G01;G01N;G01N27
申请人地址：	030006 山西省太原市小店区坞城路92号
主权项：	1.一种适配体电化学传感器的应用方法，其特征在于适配体电化学传感器用于土霉素检测；土霉素检测方法包括以下步骤：（1）制作标准曲线：制备好的适配体共价修饰电极放入不同浓度的土霉素标准品溶液中孵育1h；之后将适配体共价修饰电极取出用超纯水冲洗后置于含5.0 mmol/L [Fe(CN)6]3-/4-和0.1 mol/L KCl的水溶液中通过差分脉冲伏安法进行测定，记录下电流响应值，得到土霉素浓度的对数与电流响应值呈线性关系标准曲线；（2）测定样品土霉素浓度：利用制备好的适配体共价修饰电极放入样品溶液中孵育1h，通过DPV检测电极，记录电流响应值，然后根据步骤（1）获得的标准曲线，即可计算出样品中土霉素的浓度。 2.根据权利要求1所述的一种适配体电化学传感器的应用方法其特征在于，土霉素适配体序列为：5'-氨基-C3-GGA ATT CGC TAG CAC GTT GAC GCT GGT GCC CGG TTG TGG TGCGAG TGT TGT GTG GAT CCG AGC TCC ACG TG-3'。 3.根据权利要求1所述一种适配体电化学传感器的应用方法，其特征是所述适配体电化学传感器的制备方法，包括以下步骤：（1）玻碳电极的预处理用粒径为0.05 μm氧化铝粉末对玻碳电极抛光，用超纯水冲洗抛光的玻碳电极3~5次，通过循环伏安法在0.1 mol/L KCl和5 mmol/L [Fe(CN)6]3-/4-的混合溶液中测试玻碳电极的性能，扫描速度为100 mV/s，扫描范围为-0.2~0.6 V；如果循环伏安法中两个峰值之间的差值小于120 mV，则证明电极可以继续使用；（2）4-羧基苯基重氮盐修饰玻碳电极的制备：400 μL的0.1 mol/L NaNO2溶液加入到20mL含有2 mmol/L 4-氨基苯甲酸和0.5 mmol/L HCl的溶液中成为混合液；将该混合液充分震荡并且放置在室温下反应约5分钟，生成4-羧基苯基重氮盐溶液，然后吸取20 μL4-羧基苯基重氮盐溶液滴涂在饰玻碳电极表面，将修饰电极放置于在真空干燥箱中干燥20 min，得到4-CP/GCE；（3）act/4-CP/GCE的制备：取0.1 mol/L EDC和0.1 mol/L NHS的混合溶液20 μL，滴定在4-CP/GCE表面以活化电极表面，得到act/4-CP/GCE，反应60 min后，用超纯水冲洗act/4-CP/GCE电极表面2~3次；（4）apt/act/4-CP/GCE的制备：将20 μL2 μmol/L带氨基的土霉素适配体滴涂在电极表面，4℃下孵育12 h后，冲洗电极表面以除去未与电极表面结合的适配体，然后滴加20 μL1mol/L乙醇胺，1 h后用超纯水冲洗2~3次，滴定20 μL 浓度是1%BSA，室温下放置1 h，用超纯水冲洗电极表面，得到适配体共价修饰电极。 4.根据权利要求1所述一种适配体电化学传感器的应用方法，其特征是适配体电化学传感器，包括工作电极、参比电极、对电极，其特征在于所述工作电极为适配体共价结合修饰玻碳电极，参比电极为饱和甘汞电极，对电极为铂丝电极。 5.根据权利要求4所述一种适配体电化学传感器的应用方法，其特征在于所述适配体共价结合修饰玻碳电极的制备方法是：先在GCE表面修饰4-CP，得到4-CP/GCE；然后取20 μL0.1 mol/L EDC和0.1 mol/L NHS的混合溶液，滴定在4-CP/GCE表面反应60 min后，用超纯水冲洗4-CP/GCE表面2~3次，得到act/4-CP/GCE；将20 μL2 μmol/L带氨基的土霉素适配体滴涂在act/4-CP/GCE表面，4℃下孵育12 h，冲洗act/4-CP/GCE表面，然后滴加20 μL1 mol/L乙醇胺，1 h后用超纯水冲洗2~3次，滴定20 μL 浓度是1%的BSA，室温下放置1 h，用超纯水冲洗act/4-CP/GCE表面，得到apt/act/4-CP/GCE。 6.根据权利要求5所述一种适配体电化学传感器的应用方法，其特征在于4-CP/GCE的制备方法：将400 μL的0.1 mol/L NaNO2溶液加入到20 mL含有2 mmol/L 4-氨基苯甲酸和0.5 mmol/L HCl的溶液中成为混合液；将混合液充分震荡并且放置在室温下反应5分钟，生成4-CP溶液，然后吸取20 μL4-CP溶液滴涂在GCE表面，将修饰电极放置于真空干燥箱中干燥20 min，得到4-CP/GCE溶液；然后吸取20 μL4-CP/GCE溶液，滴涂GCE表面，将修饰电极放置于在真空干燥箱中干燥20 min，得到4-CP/GCE。
所属类别：	发明专利