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原文传递 ZNF521基因在制备肝癌治疗药物、诊断及预后评估试剂中的应用

专利名称：	ZNF521基因在制备肝癌治疗药物、诊断及预后评估试剂中的应用
摘要：	本发明涉及ZNF521基因在制备肝癌治疗药物、诊断及预后评估试剂中的应用。发明人在实验中发现，人肝癌组织中ZNF521蛋白的表达量显著高于癌旁组织。另外，发明人还发现，相比于癌旁组织，人肝癌组织中普遍存在ZNF521蛋白的突变体S341C/T980K，且ZNF521蛋白的突变体S341C/T980K可显著降低肝癌患者的生存率。因此，ZNF521蛋白及其突变体S341C/T980K可作为肝癌的特异性分子标志物，通过检测所述蛋白在肝组织中的表达水平和/或肝组织中的上述突变体，可以有效地诊断肝癌、判断药物治疗肝癌有效性或判断肝癌患者的预后效果。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	北京;11
申请人：	中国人民解放军军事科学院军事医学研究院
发明人：	周钢桥;李元丰;张红星;贺福初;刘信燚;杜振华
专利状态：	有效
申请日期：	2019-05-30T00:00:00+0800
发布日期：	2019-09-17T00:00:00+0800
申请号：	CN201910464426.5
公开号：	CN110244056A
代理机构：	北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	赵天月
分类号：	G01N33/68(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	100850 北京市海淀区太平路27号
主权项：	1.一种蛋白质，其特征在于，与野生型ZNF521基因表达的蛋白质的氨基酸序列相比，所述蛋白质具有下列的至少一个位置突变： (1)氨基酸序列341位的丝氨酸突变为半胱氨酸，所述蛋白质的氨基酸序列如SEQ IDNO：9所示； (2)氨基酸序列980位的苏氨酸突变为赖氨酸，所述蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID NO：10所示。 2.ZNF521基因作为肝癌标志物的用途。 3.一种试剂盒，其特征在于，包括：试剂，所述试剂用于检测ZNF521蛋白，所述试剂盒用于诊断肝癌、判断药物治疗肝癌有效性或判断肝癌患者预后效果。 4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂包括选自特异性检测ZNF521蛋白的抗体、引物和探针的至少之一；任选地，针对野生型ZNF521蛋白，所述引物具有SEQ ID NO:1～2所示的核苷酸序列；任选地，针对ZNF521蛋白的突变型S341C，所述引物具有SEQ ID NO:3～4所示的核苷酸序列；任选地，针对ZNF521蛋白的突变型T980K，所述引物具有SEQ ID NO:5～6所示的核苷酸序列。 5.试剂在制备试剂盒中的用途，所述试剂用于特异性检测ZNF521蛋白，所述试剂盒用于诊断肝癌、判断药物治疗肝癌有效性或判断肝癌患者预后效果。 6.根据权利要求5所述的用途，其特征在于，所述试剂包括选自特异性检测ZNF521蛋白的抗体、引物和探针的至少之一；任选地，针对野生型ZNF521蛋白，所述引物具有SEQ ID NO:1～2所示的核苷酸序列；任选地，针对ZNF521蛋白的突变型S341C，所述引物具有SEQ ID NO:3～4所示的核苷酸序列；任选地，针对ZNF521蛋白的突变型T980K，所述引物具有SEQ ID NO:5～6所示的核苷酸序列。 7.一种肝癌细胞模型，其特征在于，与野生型肝细胞相比，所述细胞模型中ZNF521蛋白的表达水平高，所述细胞模型为肝细胞；和/或与野生型ZNF521蛋白相比，所述细胞模型中ZNF521蛋白具有选自下列的至少一种类型的突变：S341C或T980K，所述细胞模型为肝细胞。 8.一种肝癌动物模型，其特征在于，与非癌动物的肝组织相比，所述动物模型的肝组织中ZNF521蛋白的表达水平高，其中，所述非癌动物为不患任何癌症的动物；和/或与野生型ZNF521蛋白相比，所述动物模型的肝组织中ZNF521蛋白具有选自下列的至少一种类型的突变：S341C或T980K。 9.一种药物组合物，其特征在于，包括：用于降低ZNF521蛋白的表达水平的试剂，和/或用于特异性改变ZNF521蛋白的S341C和/或T980K突变的试剂，所述药物组合物用于治疗或预防肝癌。 10.根据权利要求9所述的药物组合物，其特征在于，所述用于降低ZNF521蛋白的表达水平的试剂为敲低ZNF521蛋白的shRNA；任选地，所述shRNA具有SEQ ID NO：7～8所示的核苷酸序列；任选地，所述特异性改变ZNF521蛋白的S341C和/或T980K突变的试剂为基于基因编辑或核酸合成方法的试剂。 11.ZNF521蛋白的抑制剂在制备药物中的用途，所述药物用于治疗或预防肝癌。 12.根据权利要求11所述的用途，其特征在于，所述抑制剂包括选自特异性敲低ZNF521蛋白的试剂、ZNF521蛋白的竞争性抑制剂或ZNF521蛋白的抗体的至少之一。 13.根据权利要求12所述的用途，其特征在于，所述特异性敲低ZNF521蛋白的试剂为shRNA，所述shRNA具有SEQ ID NO：7～8所示的核苷酸序列。 14.特异性改变ZNF521蛋白的S341C和/或T980K突变的试剂在制备药物中的用途，所述药物用于治疗或预防肝癌。 15.根据权利要求14所述的用途，其特征在于，所述特异性改变ZNF521蛋白的S341C和/或T980K突变的试剂为基于基因编辑或核酸合成方法的试剂。 16.一种筛选药物的方法，所述药物用于治疗或预防肝癌，其特征在于，包括：将肝癌模型与候选药物接触；比较接触前后，所述肝癌模型中ZNF521蛋白的表达水平；接触后相比于接触前，所述肝癌模型中所述ZNF521蛋白的表达水平降低，是所述候选药物为目标药物的指示。 17.一种筛选药物的方法，所述药物用于治疗或预防肝癌，其特征在于，包括：将肝癌模型与候选药物接触；比较接触前后，所述肝癌模型中ZNF521蛋白的S341C和/或T980K突变是否发生回复突变；接触后相比于接触前，所述肝癌模型中ZNF521蛋白的S341C和/或T980K突变发生回复突变，是所述候选药物为目标药物的指示。 18.一种诊断肝癌、判断药物治疗肝癌有效性或判断肝癌患者预后效果的系统，其特征在于，包括：获得装置，所述获得装置用于获得待检样本中ZNF521蛋白的表达水平和/或ZNF521蛋白的突变情况；判断装置，所述判断装置与所述获得装置相连，所述判断装置用于基于所述待检样本中ZNF521蛋白的表达水平和/或ZNF521蛋白的突变情况，诊断肝癌、判断药物治疗肝癌有效性或判断肝癌患者预后效果。 19.根据权利要求18所述的系统，其特征在于，所述待检样本中ZNF521蛋白的表达水平高于正常样本中ZNF521蛋白的表达水平，和/或所述待检样本中ZNF521蛋白具有S341C和/或T980K突变，是所述待检样本患有肝癌的指示；任选地，所述待检样本中ZNF521蛋白的表达水平与正常样本中ZNF521蛋白的表达水平相当，和/或所述待检样本中ZNF521蛋白的S341C和/或T980K突变发生回复突变，是所述肝癌患者预后效果良好的指示；任选地，药物治疗后相比于药物治疗前，所述待检样本中ZNF521蛋白的表达水平降低，和/或所述待检样本中ZNF521蛋白的S341C和/或T980K突变发生回复突变，是所述药物治疗肝癌有效性良好的指示。 20.一种调控肝癌细胞增殖能力的方法，其特征在于，包括：使培养过程中肝癌细胞的ZNF521蛋白的表达水平升高或降低，和/或使培养过程中肝癌细胞的ZNF521蛋白的341位点和/或980位点发生突变或回复突变，以便控制所述肝癌细胞的增殖能力；任选地，所述肝癌细胞为肝癌细胞系；任选地，所述肝癌细胞系为HepG2或HCCLM3。 21.根据权利要求20所述的方法，其特征在于，所述肝癌细胞的ZNF521蛋白的S341C和/或T980K突变发生回复突变，所述肝癌细胞的增殖能力下降；任选地，所述肝癌细胞中ZNF521蛋白的表达水平降低，所述肝癌细胞的增殖能力下降；任选地，所述肝癌细胞中ZNF521蛋白的表达水平降低是通过shRNA实现的；任选地，所述shRNA具有SEQ ID NO：7～8所示的核苷酸序列。 22.根据权利要求20所述的方法，其特征在于，所述肝癌细胞的ZNF521蛋白的341位点和/或980位点发生S341C和/或T980K突变，所述肝癌细胞的增殖能力增强；任选地，所述肝癌细胞中ZNF521蛋白的表达水平升高，所述肝癌细胞的增殖能力增强；任选地，所述肝癌细胞中ZNF521蛋白的表达水平升高是通过将携带有ZNF521基因的表达载体导入肝癌细胞中实现的；任选地，所述表达载体为pDsRed1-C1。
所属类别：	发明专利