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原文传递一种水痘-带状疱疹病毒病毒滴度的快速检测方法

专利名称：	一种水痘-带状疱疹病毒病毒滴度的快速检测方法
摘要：	本发明的目的是提供一种水痘‑带状疱疹病毒(VZV)病毒滴度的快速检测方法，该方法在传统的VZV抗原的双抗体夹心ELISA检测方法的基础上，通过增加已知滴度的VZV样品进行定量标定，绘制VZV抗原含量滴度曲线，来测定水痘‑带状疱疹病毒的病毒滴度，该检测方法操作简单快捷，相对传统的pfu测定方法，极大提高了水痘‑带状疱疹病毒滴度的检测效率，特别适用于的病毒快速测定。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	吉林;22
申请人：	长春祈健生物制品有限公司
发明人：	朱晓文;王玮;李春明;沈红杰;李海燕;梁慧颖;刘延威;刘志强;周慧;赵海波
专利状态：	有效
申请日期：	2019-07-22T00:00:00+0800
发布日期：	2019-09-13T00:00:00+0800
申请号：	CN201910662954.1
公开号：	CN110231481A
分类号：	G01N33/569(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	130000 吉林省长春市高新开发区火炬路1号
主权项：	1.一种水痘-带状疱疹病毒(VZV)病毒滴度的快速检测方法，其特征在于：在基于VZV抗原的双抗体夹心ELISA检测方法上，将已知滴度的VZV样品进行系列稀释，进行抗原定量后绘制VZV抗原含量-病毒滴度曲线，然后对待检测VZV样品的滴度测定。 2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述双抗体夹心ELISA检测方法包括如下步骤：用抗VZV单克隆抗体抗体包被ELISA板后，封闭，加VZV抗原结合，加标记的抗VZV抗体，显色，酶标仪检测；优选地，所述抗VZV单克隆抗体为单克隆抗体mAb-11，所述标记的抗VZV抗体为HRP酶标记的抗VZV单克隆抗体12-HRP。 3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，利用VZV双抗体夹心ELISA试剂盒对已知浓度的VZV样品进行抗原含量测定，确定其OD450值；再利用VZV双抗体夹心ELISA试剂盒对系列稀释的已知滴度的VZV样品进行抗原定量，确定其OD450值，根据上述OD450值与VZV抗原、VZV样品滴度关系，绘制VZV抗原含量-病毒滴度曲线。 4.一种用于水痘-带状疱疹病毒(VZV)病毒滴度的快速检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括VZV双抗体夹心ELISA试剂盒。 5.根据权利要求4所述的快速检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括系列稀释的已知滴度的VZV样品，优选地，所述VZV样品为已知滴度的VZV减毒活疫苗标准品。 6.根据权利要求4所述的快速检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒中包括抗VZV单克隆抗体mAb-11包被的ELISA检测板，优选地，还包括HRP酶标记的抗VZV单克隆抗体12-HRP。 7.根据权利要求6所述的快速检测试剂盒，其特征在于：所述抗VZV单克隆抗体mAb-11的重链氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，轻链氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。 8.根据权利要求6所述的快速检测试剂盒，其特征在于：抗VZV单克隆抗体mAb-11的重链可变区包括CDR1、CDR2和CDR3，其氨基酸序列分别如SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：4、SEQ IDNO：5所示；轻链可变区包括CDR1、CDR2和CDR3，其氨基酸序列分别如SEQ ID NO：6、SEQ IDNO：7、SEQ ID NO：8所示。 9.根据权利要求6所述的快速检测试剂盒，其特征在于：所述单克隆抗体12-HRP的重链氨基酸序列如SEQ ID NO：9所示，轻链氨基酸序列如SEQ ID NO：10所示。 10.根据权利要求6所述的快速检测试剂盒，其特征在于：所述所述单克隆抗体12-HRP的重链可变区包括CDR1、CDR2和CDR3，其氨基酸序列分别如SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：13所示；轻链可变区包括CDR1、CDR2和CDR3，其氨基酸序列分别如SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：15、SEQ ID NO：16所示。
所属类别：	发明专利