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原文传递绞股蓝中皂苷含量的检测方法

专利名称：	绞股蓝中皂苷含量的检测方法
摘要：	本发明涉及绞股蓝中皂苷含量的检测方法。该方法只需检测一种皂苷的含量，然后通过各皂苷之间的内在关系即可推算出其余皂苷的含量，从而可以同步检测绞股蓝中各皂苷的含量。该方法节约对照品，灵敏度高，成本低，效率高，稳定性和重现性好，准确度高。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广东;44
申请人：	广州白云山和记黄埔中药有限公司
发明人：	李楚源;朱晶晶;王智民;王德勤;匡艳辉;董利华;范冬冬
专利状态：	有效
申请日期：	2018-03-06T00:00:00+0800
发布日期：	2019-09-13T00:00:00+0800
申请号：	CN201810184582.1
公开号：	CN110231412A
代理机构：	北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	赵天月
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	510515 广东省广州市白云区沙太北路389号
主权项：	1.一种绞股蓝中皂苷含量的检测方法，其特征在于，包括： (1)将对照品溶液以及待测溶液分别进行高效液相色谱检测，所述待测溶液为待测绞股蓝提取液，所述对照品溶液为绞股蓝任一皂苷对照液； (2)基于高效液相色谱检测结果，获得所述绞股蓝中与对照品种类相同的绞股蓝皂苷的含量； (3)将所述与对照品种类相同的绞股蓝皂苷的含量与相对校正因子相乘，获得所述绞股蓝中其余绞股蓝皂苷的含量；所述高效液相色谱检测的条件包括：采用乙腈-水体系进行梯度洗脱，洗脱条件为： 2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述高效液相色谱检测的条件进一步包括：检测波长为200-250nm；优选地，所述检测波长为200-210nm；优选地，所述检测波长为203nm。 3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述绞股蓝提取液是通过如下方式获得的：将待测绞股蓝依次进行过筛、与甲醇混合、超声以及过滤处理，以便获得滤液，将所述滤液依次进行蒸干、加水复溶以及离心处理，取上清液，以便获得所述绞股蓝提取液；优选地，所述离心处理后，进一步包括：将所述上清液用固相萃取柱进行除杂处理；优选地，所述除杂处理的条件包括：采用甲醇-水体系进行洗脱；优选地，所述甲醇-水体系中，所述甲醇与水的体积比为1:1。 4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述对照品溶液是通过将绞股蓝皂苷对照品与甲醇进行混合处理获得的。 5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中获得所述绞股蓝中与对照品种类相同的绞股蓝皂苷的含量是通过如下方式进行的：基于所述对照品溶液的高效液相色谱检测结果，获得对照品皂苷的浓度-峰面积标准曲线；基于所述待测溶液的高效液相色谱检测结果，将所述绞股蓝中与对照品种类相同的绞股蓝皂苷的峰面积比对所述标准曲线，获得所述绞股蓝中与对照品种类相同的绞股蓝皂苷的含量。 6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述高效液相色谱检测的条件进一步包括：高效液相色谱仪为安捷伦1260高效液相色谱仪或Shimadzu LC-20A高效液相色谱仪；任选地，色谱柱为C18色谱柱；任选地，流速为0.9～1.1mL/min；任选地，柱温为30～35℃。 7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述色谱柱为MACHERE Y-NAGEL C18色谱柱、Phenomenex C18色谱柱或Diamonsil C18色谱柱。 8.根据权利要求1～7任一项所述的方法，其特征在于，所述绞股蓝中的皂苷包括选自绞股蓝皂苷XLVI、绞股蓝皂苷LVI、人参皂苷Rd、绞股蓝皂苷B的至少之一。 9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，以所述绞股蓝皂苷XLVI为参照物，所述参照物对所述绞股蓝皂苷LVI的相对校正因子为1.107～1.117，所述参照物对所述人参皂苷Rd的相对校正因子为1.446～1.496，所述参照物对所述绞股蓝皂苷B的相对校正因子为1.057～1.089；优选地，以所述绞股蓝皂苷XLVI为参照物，所述参照物对所述绞股蓝皂苷LVI的相对校正因子为1.11，所述参照物对所述人参皂苷Rd的相对校正因子为1.48，所述参照物对所述绞股蓝皂苷B的相对校正因子为1.08。 10.一种绞股蓝中皂苷含量的检测方法，其特征在于，包括：将绞股蓝过65目筛，加入60体积％甲醇，在温度为50℃的条件下进行超声提取，过滤，将滤液在温度为50℃的条件下进行蒸干，用水溶解蒸干产物，将溶解液在6000r/min的条件下进行离心，以便获得上清液；分别用甲醇和水活化固相萃取柱，将部分所述上清液转移至所述固相萃取柱内，采用50体积％甲醇进行洗脱；将洗脱液旋干，将旋干产物用乙腈-水溶解，以便获得待测溶液；将绞股蓝皂苷对照品与甲醇进行混合处理，以便获得对照品溶液；将对照品溶液以及待测溶液分别进行高效液相色谱检测；基于所述对照品溶液的高效液相色谱检测结果，获得对照品皂苷的浓度-峰面积标准曲线；基于所述待测溶液的高效液相色谱检测结果，将所述绞股蓝中与对照品种类相同的绞股蓝皂苷的峰面积比对所述标准曲线，获得所述绞股蓝中与对照品种类相同的绞股蓝皂苷的含量；将所述与对照品种类相同的绞股蓝皂苷的含量与相对校正因子相乘，获得所述绞股蓝中其余绞股蓝皂苷的含量；其中，所述高效液相色谱检测的条件包括：高效液相色谱仪为安捷伦1260高效液相色谱仪或Shimadzu LC-20A高效液相色谱仪，色谱柱为MACHERE Y-NAGEL C18色谱柱、Phenomenex C18色谱柱或Diamonsil C18色谱柱，流速为0.9～1.1mL/min，柱温为30～35℃，采用乙腈-水体系进行梯度洗脱，检测波长为200-210nm，洗脱条件为：任选地，所述绞股蓝中的皂苷包括绞股蓝皂苷XLVI、绞股蓝皂苷LVI、人参皂苷Rd以及绞股蓝皂苷B，以所述绞股蓝皂苷XLVI为参照物，所述参照物对所述绞股蓝皂苷LVI的相对校正因子为1.11，所述参照物对所述人参皂苷Rd的相对校正因子为1.48，所述参照物对所述绞股蓝皂苷B的相对校正因子为1.08。
所属类别：	发明专利