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原文传递灵芝挥发性成分的HS-SPME/GC-MS特征图谱及其构建方法和应用

专利名称：	灵芝挥发性成分的HS-SPME/GC-MS特征图谱及其构建方法和应用
摘要：	本发明涉及特征图谱及其构建方法和应用，尤其涉及灵芝挥发性成分的HS‑SPME/GC‑MS特征图谱及其构建方法和应用。本发明公开了灵芝挥发性成分的HS‑SPME/GC‑MS特征图谱，如图2所示。本发明的有益效果是：通过建立灵芝的特征图谱，对共有峰进行定性分析，进而对待测灵芝或其他食用菌及其相关产品进行区分鉴别，并通过GC‑MS特征图谱分析，辨识不同品种灵芝，使用方便、快捷，鉴别准确度高，这对灵芝的开发、利用和质量评价具有很高的应用价值。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广东;44
申请人：	广东省微生物研究所(广东省微生物分析检测中心)
发明人：	陈少丹;关小莺;谢意珍;吴清平
专利状态：	有效
申请日期：	2019-06-26T00:00:00+0800
发布日期：	2019-09-20T00:00:00+0800
申请号：	CN201910560738.6
公开号：	CN110261506A
代理机构：	广州弘邦专利商标事务所有限公司
代理人：	张钇斌
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	510070 广东省广州市越秀区先烈中路100号大院
主权项：	1.灵芝挥发性成分的HS-SPME/GC-MS特征图谱，其特征在于，所述特征图谱如图2所示。 2.根据权利要求1所述的灵芝挥发性成分的HS-SPME/GC-MS特征图谱，其特征在于，所述图谱的特征峰如表1所示。 3.一种权利要求1或2所述的灵芝挥发性成分的HS-SPME/GC-MS特征图谱的构建方法，包括： (1)样品前处理：取灵芝子实体样品用粉碎机粉碎，混匀，装入固相微萃取专用顶空瓶； (2)顶空固相微萃取：将装有样品的顶空瓶在60～70℃预平衡40～60min，将老化后的萃取头插入到样品瓶顶空部分吸附30～45min； (3)灵芝GC-MS特征图谱的采集：将已吸附好的萃取头用GC-MS仪器分析，插入GC-MS进样口解析5～8min；进行色谱和质谱分析； (4)特征图谱的构建：分别测定不同的灵芝样品，通过中药色谱指纹图谱相似度评价系统进行指纹图谱分析，匹配共有峰，生成灵芝GC-MS特征图谱。 4.根据权利要求3所述的构建方法，其特征在于，包括： (1)样品前处理：取不同灵芝子实体样品用粉碎机粉碎，过50～80目筛，混匀，采用四份法称取1.00g，装入20mL固相微萃取专用顶空瓶； (2)顶空固相微萃取：将装有样品的顶空瓶在60～70℃预平衡40～60min，将老化后的萃取头插入到样品瓶顶空部分吸附30～45min； (3)灵芝GC-MS特征图谱的采集：将已吸附的萃取头用GC-MS仪器分析，插入GC-MS进样口解析5.0～8.0min，进行色谱和质谱分析； (4)特征图谱的构建：测定不同的灵芝样品，通过中药色谱指纹图谱相似度评价系统进行指纹图谱分析，匹配共有峰，生成灵芝GC-MS特征图谱，并进行相似度分析。 5.根据权利要求3或4所述的构建方法，其特征在于，所述步骤(3)中的色谱条件：HP-5DM色谱柱；升温程序：40℃保持3min，以5℃/min上升至80℃，保持3min，再以10℃/min上升至220℃，保持2min，最后以5℃/min上升至240℃，保持2min；进样口温度：260℃；进样模式：不分流；载气：氦气；流速：1mL/min；质谱条件：离子源温度：230℃；接口温度：250℃；四级杆温度：150℃；电离方式：电子轰击离子源EI+，电子能量70eV；扫描质量范围：35-450amu。 6.根据权利要求3所述的构建方法，其特征在于，所述步骤(1)中采用灵芝子实体样品为15种不同的灵芝子实体样品，命名为图1的S1-S15。 7.根据权利要求3所述的构建方法，其特征在于，所述的步骤(4)中以S1的色谱图为参照图谱，采用中位数法，设定时间窗宽度为0.4，进行多点校正，生成灵芝GC-MS特征图谱。 8.一种将上述灵芝挥发性成分的HS-SPME/GC-MS特征图谱的应用，用于灵芝及其相关产品的定性检测和/或相对定量分析。 9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述定性检测和/或相对定量分析包括：将待检测样品采用上述构建方法进行HS-SPME/GC-MS图谱构建，与灵芝挥发性成分的HS-SPME/GC-MS特征图谱(图2)比较，利用中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(2004A版)进行自动匹配生成共有峰，根据其保留时间进行定性分析，和/或通过峰面积归一化法进行相对定量分析。 10.根据权利要求8或9所述的应用，其特征在于，在构建灵芝GC-MS特征图谱后，将待测定样品的GC-MS图谱与本发明构建的灵芝特征图谱(图2)进行相似度评价及主成分分析；优选的，所述相似度分析及主成分分析包括：将灵芝挥发性成分的HS-SPME/GC-MS特征图谱(图2)与待检测样品的GC-MS图谱导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统检验版(2004B版)，自动匹配，得到相同保留时间对应的峰面积，导入到SIMCA软件中分析，进行主成分分析(PCA分析)。
所属类别：	发明专利