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原文传递血清淀粉样蛋白A检测用试剂盒、其制备方法以及血清淀粉样蛋白A的检测方法

专利名称：	血清淀粉样蛋白A检测用试剂盒、其制备方法以及血清淀粉样蛋白A的检测方法
摘要：	本发明提供一种血清淀粉样蛋白A检测用试剂盒、其制备方法以及血清淀粉样蛋白A的检测方法。该试剂盒包括校准品、磁微粒试剂、标记抗体试剂、清洗液、激发物和样本稀释液。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	江苏;32
申请人：	科尼格沃斯(无锡)医学科技有限公司
发明人：	王牧;孙旭
专利状态：	有效
申请日期：	2019-07-25T00:00:00+0800
发布日期：	2019-09-17T00:00:00+0800
申请号：	CN201910675884.3
公开号：	CN110244063A
代理机构：	北京奉思知识产权代理有限公司
代理人：	邹轶鲛;石红艳
分类号：	G01N33/68(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	214125 江苏省无锡市滨湖区绣溪路58-7号
主权项：	1.一种血清淀粉样蛋白A检测用试剂盒，包括校准品、磁微粒试剂、标记抗体试剂、清洗液、激发物和样本稀释液。 2.根据权利要求1所述的试剂盒，其中，所述校准品包括在0～1000ng/mL范围内的6以上个不同浓度的血清淀粉样蛋白A校准品。 3.根据权利要求1或2所述的试剂盒，其中，所述标记抗体试剂为吖啶酯类化合物标记的血清淀粉样蛋白A检测抗体，所述吖啶酯类化合物为选自吖啶酯、吖啶酯磺酰胺、吖啶酯甲苯磺酰胺、吖啶酯对甲基磺酰胺和吖啶酯三氟甲基磺酰胺中的任意一种，并且所述吖啶酯类化合物优选为吖啶酯。 4.根据权利要求1～3任意一项所述的试剂盒，其中，所述磁微粒试剂为磁微粒包被的抗血清淀粉样蛋白A单克隆捕获抗体。 5.根据权利要求1～4任意一项所述的试剂盒，其中，所述磁微粒的粒径为1～5μm，表面电荷密度为5～50μmol/g。 6.根据权利要求1～5任意一项所述的试剂盒，其中，所述激发物包括第一激发物和第二激发物，并且所述第一激发物为硝酸过氧化氢水溶液，所述第二激发物为氢氧化钠水溶液。 7.根据权利要求1～6任意一项所述的试剂盒，其中，所述样本稀释液中包含三羟甲基氨基甲烷和牛血清白蛋白。 8.一种血清淀粉样蛋白A检测用试剂盒的制备方法，所述试剂盒包括校准品、磁微粒试剂、标记抗体试剂、清洗液、激发物和样本稀释液，该制备方法包括以下步骤：样本稀释液配置步骤：配置所述样本稀释液，校准品制备步骤：配置校准品稀释液，以所述校准品稀释液将纯化血清淀粉样蛋白A稀释为不同浓度的血清淀粉样蛋白A的校准品，标记抗体试剂制备步骤：使标记物与检测抗体偶联反应，对反应后的混合液进行透析，随后进行稀释，以获得所述标记抗体试剂，清洗液配置步骤，配制所述清洗液，磁微粒试剂制备步骤：使磁微粒活化后，加入抗血清淀粉样蛋白A单克隆捕获抗体进行包被，随后进行磁性分离，以获得所述磁微粒试剂，以及激发物制备步骤：配制所述激发物。 9.根据权利要求8所述的试剂盒制备方法，其中，在所述校准品制备步骤中，将所述纯化血清淀粉样蛋白A稀释为在0～1000ng/mL范围内的6个以上不同浓度的血清淀粉样蛋白A的校准品。 10.根据权利要求8或9所述的试剂盒制备方法，其中，在所述标记抗体试剂制备步骤中，所述标记物为吖啶酯类化合物，所述吖啶酯类化合物为选自吖啶酯、吖啶酯磺酰胺、吖啶酯甲苯磺酰胺、吖啶酯对甲基磺酰胺和吖啶酯三氟甲基磺酰胺中的一种，并且所述吖啶酯类化合物优选为吖啶酯。 11.根据权利要求8～10任意一项所述的试剂盒制备方法，其中，在所述标记抗体试剂制备步骤中，所述磁微粒的粒径为1～5μm，表面电荷密度为5～50μmol/g。 12.根据权利要求8～11任意一项所述的试剂盒制备方法，其中，在所述激发物制备步骤中，所述激发物溶液包括第一激发物溶液和第二激发物溶液，并且，所述第一激发物为硝酸过氧化氢水溶液，所述第二激发物为氢氧化钠水溶液。 13.根据权利要求8所述的试剂盒制备方法，其中，所述样本稀释液中包含三羟甲基氨基甲烷和牛血清白蛋白。 14.一种使用权利要求1～7任意一项所述的血清淀粉样蛋白A检测用试剂盒或权利要求8～13任意一项所述的制备方法所制备的血清淀粉样蛋白A检测用试剂盒来检测血清淀粉样蛋白A的方法，该检测方法包括以下步骤：样本稀释步骤：以样本稀释液对样本进行稀释；加样反应步骤：在反应管中加入校准品、稀释后的样本、标记抗体和所述磁微粒试剂，震荡混匀后，进行孵育；清洗步骤：对孵育后的混合物进行磁性分离，加入清洗液，待所述磁微粒试剂吸附完全后，弃去上清；检测步骤：加入激发物，检测并读取信号值；以及计算步骤：对所述校准品的浓度和发光值进行logistic四参数拟合，通过所述样本的RLU值计算所述样本的浓度。 15.根据权利要求14所述的检测肺炎支原体的方法，其中，在所述加样反应步骤中，孵育时间为5～15min。
所属类别：	发明专利