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原文传递精液细胞快速分型检测试剂盒及检测方法

专利名称：	精液细胞快速分型检测试剂盒及检测方法
摘要：	本发明公开了一种精液细胞快速分型检测试剂盒，包括PBS溶液、无钙HBSS缓冲液、固定液、染色试剂及质控品；所述PBS溶液和无钙HBSS缓冲液中均包括牛血清白蛋白、胎牛血清、甘油血清、蛋白、甘油中的一种或多种；所述染色试剂包括细胞通透剂和荧光标记抗体。本发明还提供了一种利用上述试剂盒进行精液细胞快速分型检测的方法。本发明可用于精液细胞中生精细胞类型及数量快速判断，进而用于梗阻性还是非梗阻性无精子症的判别，改变我国目前临床上对针对目前精液细胞学的临床评估缺乏快速准确检测试剂的问题，为临床医生进行治疗方案选择时提供指导，切实解决病人的问题。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	江苏;32
申请人：	中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
发明人：	殷建;尹焕才;田晶晶;陈名利;刘荻;茹静
专利状态：	有效
申请日期：	2018-10-25T00:00:00+0800
发布日期：	2019-09-27T00:00:00+0800
申请号：	CN201811250704.9
公开号：	CN110286080A
代理机构：	北京远大卓悦知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	韩飞
分类号：	G01N15/14(2006.01);G;G01;G01N;G01N15
申请人地址：	215163 江苏省苏州市高新区科技城科灵路88号
主权项：	1.一种精液细胞快速分型检测试剂盒，其特征在于，包括PBS溶液、无钙HBSS缓冲液、固定液、染色试剂及质控品；所述PBS溶液和无钙HBSS缓冲液中均包括牛血清白蛋白、胎牛血清、甘油血清、蛋白、甘油中的一种或多种；所述染色试剂包括细胞通透剂和荧光标记抗体。 2.根据权利要求1所述的精液细胞快速分型检测试剂盒，其特征在于，所述PBS溶液还包括磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、氯化钠、氯化钾和去离子水。 3.根据权利要求2所述的精液细胞快速分型检测试剂盒，其特征在于，所述无钙HBSS缓冲液还包括氯化钾、磷酸二氢钾、碳酸氢钠、氯化钠、磷酸氢二钠、葡萄糖、乙二胺四乙酸和去离子水。 4.根据权利要求3所述的精液细胞快速分型检测试剂盒，其特征在于，所述无钙HBSS缓冲液中还包括氢氧化钠或盐酸。 5.根据权利要求4所述的精液细胞快速分型检测试剂盒，其特征在于，所述荧光标记抗体为经荧光染料标记后的抗体，用于鉴别细胞类型；其中，所述抗体包括：用于识别白细胞的CD45、用于识别上皮细胞的EpCAM、CK18或CK19及用于识别精原细胞的SCA、DAZL或TRA98；其中，所述荧光染料包括APC、FITC、PerCP、PI中的一种或多种，所述荧光染料与抗体可任意匹配。 6.根据权利要求5所述的精液细胞快速分型检测试剂盒，其特征在于，所述质控品为鸡红细胞。 7.根据权利要求1所述的精液细胞快速分型检测试剂盒，其特征在于，所述固定液为经-20℃过夜处理后的冰乙醇。 8.根据权利要求7所述的精液细胞快速分型检测试剂盒，其特征在于，所述固定液中还包括牛血清白蛋白、胎牛血清、甘油血清、蛋白、甘油中的一种或多种。 9.根据权利要求2所述的精液细胞快速分型检测试剂盒，其特征在于，所述PBS溶液中还包括5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮、2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮、季铵盐、TritonX-100和二甲亚砜。 10.一种利用如权利要求1-9中任意一项所述的试剂盒进行精液细胞快速分型检测的方法，其特征在于，包括以下步骤： 1)获取新鲜精子样品，离心，去上清，加入无钙HBSS缓冲液或含EDTA的PBS溶液，再离心备用，不能立即使用的固定于固定液中； 2)步骤1)处理后的精子样品，经无钙HBSS缓冲液洗涤后，在无钙HBSS缓冲液中调整终细胞浓度，再加入染色试剂，进行细胞染色； 3)采用流式细胞仪进行检测，以对精子样品中的细胞类型进行识别，其中采用鸡红细胞作为质控品。
所属类别：	发明专利