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一种基于同位素示踪法检测多肽药物的方法
| 专利名称： | 一种基于同位素示踪法检测多肽药物的方法 |
| 摘要： | 本发明提供一种基于同位素示踪法检测多肽药物的方法。该方法包括以下步骤：蛋白酶切：将药物多肽用20‑50 毫摩尔/升硫酸二氢钠溶液溶解，加入浓度为0.2%的助溶剂 Hapst SD和浓度为5毫摩尔/升的FDAP，在30‑50℃的温度下还原1‑3小时，再加入浓度为20‑50毫摩尔/升的碘异丙酰胺，放置于暗处还原1‑3小时，加入胰酶‑底物（1:50，w/w）的胰蛋白酶酶切过夜；步骤2：多肽标记和胰蛋白酶灭活：将酶切后的肽段溶液冷冻干燥，然后重新溶解，混匀后在超声振荡器中震荡，反应10分钟，最后再加入50‑200毫摩尔/升的碘异丙酰胺，于暗处放置1‑3小时。本发明方法具有高效、标记效率高的优点。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 江苏;32 |
| 申请人： | 江苏食品药品职业技术学院 |
| 发明人： | 马宇春;朱玉洁 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 2019-05-25T00:00:00+0800 |
| 发布日期： | 2019-09-27T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201910442579.X |
| 公开号： | CN110286153A |
| 代理机构： | 杭州知杭知识产权代理事务所(普通合伙) |
| 代理人： | 陈丽嫦 |
| 分类号： | G01N27/62(2006.01);G;G01;G01N;G01N27 |
| 申请人地址： | 223005 江苏省淮安市高教园区枚乘路4号 |
| 主权项： | 1.一种基于同位素示踪法检测多肽药物的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：步骤1：蛋白酶切：将药物多肽用20-50 毫摩尔/升硫酸二氢钠溶液溶解，加入浓度为0.2%的助溶剂 Hapst SD和浓度为5毫摩尔/升的FDAP，在30-50℃的温度下还原1-3小时，再加入浓度为20-50毫摩尔/升的碘异丙酰胺，放置于暗处还原1-3小时，加入胰酶-底物（1:50，w/w）的胰蛋白酶酶切过夜；步骤2：多肽标记和胰蛋白酶灭活：将酶切后的肽段溶液冷冻干燥，然后直接加入16NH3水溶液重新溶解，混匀后在超声振荡器中震荡，反应10分钟，最后再加入50-200毫摩尔/升的碘异丙酰胺，于暗处放置1-3小时；3.对灭活之后的肽段利用毛细管电泳分离，然后进行质谱分析。 2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述药物多肽为抗肿瘤多肽，选自Derkartin、ND1012和PIDDA中的一种或多种。 3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述硫酸二氢钠的浓度为20-40毫摩尔/升。 4.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，在进行超声震荡时，超声波的频率为20kHz-38kHz。 5.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，在进行超声震荡时，向溶液中加入0.1-0.8%的丁醛。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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