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原文传递透明纸基紫外-可见光吸收测定装置及纸基分析方法

专利名称：	透明纸基紫外-可见光吸收测定装置及纸基分析方法
摘要：	本发明公开透明纸基紫外‑可见光吸收测定装置，包括蛋白质检测层A、胆固醇检测层B、样品、紫外‑可见分光光度计，所述蛋白质检测层A与所述胆固醇检测层B分别设置于所述紫外‑可见分光光度计的输出端，所述样品分别被加入到所述蛋白质检测层A和所述胆固醇检测层B干燥后堆叠，然后通过所述紫外‑可见分光光度计射出光束到所述样品上实现对蛋白质和胆固醇的同时检测。本发明还公开透明纸基紫外‑可见光吸收测定装置的分析方法可以实现对蛋白质和胆固醇的同时检测，并且对蛋白质和胆固醇的检测都具有高灵敏度和良好的选择性，其检测限分别为0.09 mM和0.075μM。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	江苏;32
申请人：	南京工业大学
发明人：	于海东;韩雨锋;宗丽君;黄维
专利状态：	有效
申请日期：	2019-07-14T00:00:00+0800
发布日期：	2019-10-01T00:00:00+0800
申请号：	CN201910632652.X
公开号：	CN110296946A
代理机构：	亳州速诚知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	张辉
分类号：	G01N21/31(2006.01);G;G01;G01N;G01N21
申请人地址：	210000 江苏省南京市新模范马路5号
主权项：	1.透明纸基紫外-可见光吸收测定装置，其特征在于，包括蛋白质检测层A、胆固醇检测层B、样品、紫外-可见分光光度计，所述蛋白质检测层A与所述胆固醇检测层B分别设置于所述紫外-可见分光光度计的输出端，所述样品分别被加入到所述蛋白质检测层A和所述胆固醇检测层B干燥后堆叠，然后通过所述紫外-可见分光光度计射出光束到所述样品上实现对蛋白质和胆固醇的同时检测。 2.基于权利要求1所述的透明纸基紫外-可见光吸收测定装置的纸基分析方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤SS1：制备透明纸基；步骤SS2：制备透明纸检测装置；步骤SS3：采用紫外-可见光吸收法测定蛋白质和胆固醇。 3.根据权利要求2所述的透明纸基紫外-可见光吸收测定装置的纸基分析方法，其特征在于，所述步骤SS1具体包括：步骤SS11：制备纤维素溶解液；步骤SS12：制备纤维素溶液；步骤SS13：将所述步骤SS12所制备的纤维素溶液倾倒到玻璃板上，形成一层均匀的薄膜，然后将其置于5w%的硫酸溶液中固化形成凝胶，使用蒸馏水彻底浸泡，然后使用胶带固定，室温干燥后制成透明纸基。 4.根据权利要求3所述的透明纸基紫外-可见光吸收测定装置的纸基分析方法，其特征在于，所述步骤SS11具体包括：将氢氧化钠、尿素和水按照质量比为7:12:81的质量比例配成溶液，放入-12℃的冰箱中备用。 5.根据权利要求3所述的透明纸基紫外-可见光吸收测定装置的纸基分析方法，其特征在于，所述步骤SS12具体包括：将棉短绒加入所述步骤SS11所制备的纤维素溶解液溶液中，使用机械搅拌，搅拌时间为15 min，搅拌速度3000 rpm，之后8000 rpm搅拌速度下将溶液离心除气泡备用。 6.根据权利要求2所述的透明纸基紫外-可见光吸收测定装置的纸基分析方法，其特征在于，所述步骤SS2中的所述制备透明纸检测装置具体包括：步骤SS21：将PDMS和硅氧烷弹性体固化剂以质量比为10:1混合，室温抽真空半小时除去气泡备用；步骤SS22：设计图案，使用丝网印刷机将步骤SS21所述的溶液印刷在所述透明纸基上，使用真空干燥箱，在80℃烘烤12小时，用以固化形成透明纸基分析装置，检测区最终的孔直径为5 mm，常温储存备用。 7.根据权利要求2所述的透明纸基紫外-可见光吸收测定装置的纸基分析方法，其特征在于，所述步骤SS3具体包括：步骤SS31：蛋白质检测溶液的配制；步骤SS32：胆固醇检测溶液的配制；步骤SS33：使用紫外-可见分光光度计检测。 8.根据权利要求7所述的透明纸基紫外-可见光吸收测定装置的纸基分析方法，其特征在于，所述步骤SS31具体包括：将pH为1.8的125 mM柠檬酸盐缓冲液与用95％乙醇和5％水溶解的9 mM的四溴苯酚蓝TBPB溶液以体积比10:1的比例中混合，4℃储存备用。 9.根据权利要求7所述的透明纸基紫外-可见光吸收测定装置的纸基分析方法，其特征在于，所述步骤SS32具体包括：将酶催化活性单位为14.1 U的胆固醇酯酶、浓度为10 mg/mL的胆固醇氧化酶CO、浓度为10 mM 的4-氨基安替比林4-APP、浓度为1 mg/mL的辣根过氧化物酶HRP和浓度为1mM的 N-乙基-N-3-甲氧基苯胺钠盐二水合物ADOS以体积比1:1:1:1:1混合，放入4℃储存备用。 10.根据权利要求7所述的透明纸基紫外-可见光吸收测定装置的纸基分析方法，其特征在于，所述步骤SS33具体包括：将所述步骤SS31的蛋白质检测溶液和所述步骤SS32的胆固醇检测溶液分别加入到蛋白质检测层A和胆固醇检测层B，之后分别加入样品，常温干燥，堆叠，使用紫外-可见分光光度计检测蛋白质和胆固醇的吸收光谱。
所属类别：	发明专利