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原文传递卡马西平化学发光检测试剂盒及其制备方法

专利名称：	卡马西平化学发光检测试剂盒及其制备方法
摘要：	本发明涉及一种卡马西平化学发光检测试剂盒及其制备方法，属于化学发光体外诊断技术领域。解决了现有技术中卡马西平检测试剂盒存在测试耗时长，重复性差，稳定性差，空白高，灵敏度差，准确度差的技术问题。本发明的试剂盒，包括R1试剂、R2试剂和R3试剂；其中，R1试剂包括链霉亲和素磁颗粒和缓冲液Ⅰ；R2试剂包括偶联标记物标记的卡马西平类似物和缓冲液Ⅱ；R3试剂包括化学发光标记物标记的卡马西平单克隆抗体和缓冲液Ⅲ。该试剂盒线性范围宽、检测时间短、空白低、灵敏度高、稳定性好、准确度高、重复性好。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	吉林;22
申请人：	迪瑞医疗科技股份有限公司
发明人：	唐仁陶;高阳;胡雪凇;高威;孙成艳;何浩会
专利状态：	有效
申请日期：	2019-07-11T00:00:00+0800
发布日期：	2019-10-08T00:00:00+0800
申请号：	CN201910624180.3
公开号：	CN110308290A
代理机构：	长春众邦菁华知识产权代理有限公司
代理人：	王莹
分类号：	G01N33/94(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	130103 吉林省长春市高新区宜居路3333号
主权项：	1.卡马西平化学发光免疫定量检测试剂盒，其特征在于，包括R1试剂、R2试剂和R3试剂；所述R1试剂包括链霉亲和素磁颗粒和缓冲液Ⅰ，R1试剂中链霉亲和素磁颗粒的浓度＞0.03％；所述R2试剂包括偶联标记物标记的卡马西平类似物和缓冲液Ⅱ，R2试剂中偶联标记物标记的卡马西平类似物的浓度≥0.5μg/ml；所述R3试剂包括化学发光标记物标记的卡马西平单克隆抗体和缓冲液Ⅲ，R3试剂中化学发光标记物标记的卡马西平单克隆抗体的浓度≥0.05μg/ml。 2.根据权利要求1所述的卡马西平化学发光免疫定量检测试剂盒，其特征在于，所述链霉亲和素磁颗粒的粒径为1-3μm。 3.根据权利要求1所述的卡马西平化学发光免疫定量检测试剂盒，其特征在于，所述偶联标记物标记的卡马西平类似物中，卡马西平类似物与偶联标记物的标记摩尔比为1:(1-10)；偶联标记物为生物素、长臂生物素或长长臂生物素；卡马西平类似物为卡马西平偶联人血清白蛋白、卡马西平偶联牛γ球蛋白或卡马西平偶联鸡卵清蛋白。 4.根据权利要求1所述的卡马西平化学发光免疫定量检测试剂盒，其特征在于，所述化学发光标记物标记的卡马西平单克隆抗体中，卡马西平单克隆抗体与化学发光标记物的标记的摩尔比为1:(1-10)；化学发光标记物为吖啶酯或吖啶酯的NHS酯。 5.根据权利要求1所述的卡马西平化学发光免疫定量检测试剂盒，其特征在于，缓冲液Ⅰ为含有20mmol/L PB、150mmol/L NaCl和0.1％ProClin300的pH7.2的缓冲液，缓冲液Ⅱ为含有20mmol/L PB、150mmol/L NaCl、0.05％Tween20、1％BSA和0.1％ProClin300的pH6.0的缓冲液，缓冲液Ⅲ为含有20mmol/L PB、150mmol/L NaCl、0.05％Tween20、1％BSA和0.1％ProClin300的pH6.0的缓冲液。 6.根据权利要求1所述的卡马西平化学发光免疫定量检测试剂盒，其特征在于，该试剂盒中还包括卡马西平校准品L、卡马西平校准品H、卡马西平质控品C1和卡马西平质控品C2；卡马西平校准品L、卡马西平校准品H、卡马西平质控品C1和卡马西平质控品C2均为含卡马西平的缓冲液，卡马西平校准品L中卡马西平的浓度为2μg/ml，卡马西平校准品H中卡马西平的浓度为15μg/ml，卡马西平质控品C1中卡马西平的浓度为5μg/ml，卡马西平质控品C2中卡马西平的浓度为10μg/ml。 7.权利要求1-5任何一项所述的卡马西平化学发光免疫定量检测试剂盒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、制备R1试剂将链霉亲和素磁颗粒溶液加入TBST溶液中，充分混匀后，放置于磁分离器上，直至上清无混浊，弃上清，留取磁颗粒，使用缓冲液Ⅰ清洗磁颗粒后，再用缓冲液Ⅰ配成磁颗粒浓度＞0.03％的固相试剂，即为R1试剂；步骤二、制备R2试剂取卡马西平类似物，用离心管进行超滤离心，将缓冲液置换为标记缓冲液；按照偶联标记物：卡马西平类似物摩尔比为(1-10)：1加入偶联标记物原液，混匀，37℃，标记4h；标记反应结束后，加入封闭缓冲液，封闭1h，封闭后用离心管进行超滤离心，除去未偶联的偶联标记物，用缓冲液Ⅱ配制成偶联标记物标记的卡马西平类似物的浓度≥0.5μg/ml的R2试剂；步骤三、制备R3试剂取卡马西平单克隆抗体，用离心管进行超滤离心，将缓冲液置换为标记缓冲液；按照化学发光标记物：卡马西平单克隆抗体摩尔比为(1-10)：1加入化学发光标记物原液，混匀，37℃，标记4h；标记反应结束后，加入封闭缓冲液，封闭1h；封闭后用30KDa超滤离心管进行超滤离心，除去未偶联的化学发光标记物，用缓冲液配Ⅲ制成化学发光标记物标记的卡马西平单克隆抗体的浓度≥0.05μg/ml的R3试剂。 8.权利要求7所述的卡马西平化学发光免疫定量检测试剂盒的制备方法，其特征在于，所述步骤二和步骤三中，离心管均为30KDa超滤离心管，离心机转速为9000rpm，离心时间为30min。 9.权利要求7所述的卡马西平化学发光免疫定量检测试剂盒的制备方法，其特征在于，所述步骤二和步骤三中，所述标记缓冲液均为含有20mmol/L PB和150mmol/L NaCl，pH为8.0的缓冲液。 10.权利要求7所述的卡马西平化学发光免疫定量检测试剂盒的制备方法，其特征在于，所述步骤二和步骤三中，所述封闭缓冲液均为含有20mmol/L PB、150mmol/L NaCl和10％赖氨酸，pH为8.0的缓冲液。
所属类别：	发明专利