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原文传递 NF-κB RelA/p65蛋白位点特异性磷酸化诊断试剂盒

专利名称：	NF-κB RelA/p65蛋白位点特异性磷酸化诊断试剂盒
摘要：	本发明涉及医药生物技术领域，具体地说，涉及一种NF‑κB RelA/p65蛋白位点特异性磷酸化检测的试剂盒。具体地，该试剂盒可特异性地检测NF‑κB RelA/p65蛋白Ser276与Ser536位点的磷酸化状态，用以指导NF‑κB抑制剂靶向性抗肿瘤药物治疗或RelA/p65 S276A/S536D基因治疗，具有重要的临床应用价值。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	湖南;43
申请人：	湖南莱拓福生物科技有限公司
发明人：	曹哲
专利状态：	有效
申请日期：	2019-07-06T00:00:00+0800
发布日期：	2019-10-11T00:00:00+0800
申请号：	CN201910607155.4
公开号：	CN110320365A
代理机构：	北京知本村知识产权代理事务所
代理人：	刘江良
分类号：	G01N33/577(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	410604 湖南省长沙市宁乡县金州新区金沙东路027号
主权项：	1.一种用于检测人类肿瘤组织中NF-κB RelA/p65蛋白Ser276与Ser536位点磷酸化的诊断试剂盒，其包含特异性检测人NF-κB RelA/p65蛋白之Ser276与Ser536位点磷酸化的抗体，所述抗体为鼠抗NF-κB RelA/p65单克隆抗体；兔抗NF-κB RelA/p65 Ser276单克隆抗体；鼠抗NF-κB RelA/p65 Ser536单克隆抗体。 2.根据权利要求1所述的试剂盒，其中所述试剂盒还包含：NF-κB RelA/p65位点特异性磷酸化蛋白标准品，包被有特异性捕获单克隆抗体的平板或微珠；生物素或其他标记的另一种属来源的特异性检测抗体。 3.根据权利要求2所述的试剂盒，所述试剂盒还包含：包被缓冲液：1×PBS，pH7.3±0.1；样品稀释液：1×PBS、1%BSA、0.05%NaN3，pH 7.3±0.1；封闭液：1×PBS、3% BSA；洗脱液PBST：1×PBS、0.05% Tween-20； Streptavidin-Eu/HRP/ALP； IHC与ICC封闭液； IHC与ICC底物与显色剂。 4.根据权利要求1-3中任一项所述的试剂盒，其中所述人类肿瘤是乳腺癌、肺癌、脑癌、胃癌、结直肠癌、食道癌、膀胱癌或前列腺癌。 5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于：其中所述捕获抗体来自用全长NF-κBRelA/p65蛋白抗原免疫小鼠，并进行细胞融合，分离单克隆杂交细胞株，而制备的，特异性识别NF-κB RelA/p65蛋白的单克隆抗体；检测抗体来自用Ser276或Ser536位点磷酸化NF-κB RelA/p65小肽抗原免疫兔, 并进行细胞融合，分离单克隆杂交细胞株，而制备的纯化单克隆抗体。 6.根据权利要求5中所述的试剂盒，所述试剂盒是基于夹心ELISA的免疫比浊法、酶联免疫法、时间分辨免疫荧光分析法、化学发光检测法或电化学发光检测试剂盒。 7.根据权利要求5中所述的试剂盒，其中所述试剂盒还包括免疫组织化学（IHC）及免疫细胞化学（ICC）试剂盒。 8.一种用于检测人类肿瘤组织中NF-κB RelA/p65蛋白Ser276或/与 Ser536位点磷酸化状态的方法，其特征在于：利用权利要求1-7任一项所述的试剂盒，采用基于夹心ELISA的免疫比浊法、酶联免疫法、时间分辨免疫荧光分析（TRFIA）法、化学发光法及电化学发光法进行检测人类肿瘤组织中NF-κB RelA/p65蛋白Ser276与Ser536位点磷酸化状态。 9.根据权利要求9中所述的方法，其特征在于：其中所述检测NF-κB RelA/p65Ser276或Ser536位点磷酸化包括： a) 利用所述特异性检测试剂测量来自受试者的生物学样品中NF-κB RelA/p65Ser276或/与Ser536位点磷酸化的水平； b) 将a)中测得的水平与正常样品中的相应水平比较；其中所述生物学样品为肿瘤组织，正常样品为癌旁正常组织。 10.权利要求1-7任一项所述的试剂盒在癌症的特异性靶向药物或基因抗肿瘤治疗中的应用。
所属类别：	发明专利