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原文传递一种通用型抗原修复缓冲液

专利名称：	一种通用型抗原修复缓冲液
摘要：	本发明公开了一种通用型抗原修复缓冲液，其特征在于，其包括柠康酐0.5g/L；非离子型表面活性剂5ml/L；其制作方法为：以配制一升缓冲液为例：称取柠康酐0.5g，取1000ml烧杯，将称取的0.5g柠康酐，溶解在800ml的蒸馏水中，搅拌混匀；在混匀后的溶液中加入5ml的非离子型表面活性剂，搅拌混匀；用当量浓度为1N的NaOH溶液调整pH值至7.4；然后取1000ml量筒，将PH值为7.4的溶液倒入量筒中，用蒸馏水定容至1000ml。本发明所提供的通用型的抗体修复液，则可以应用于绝大部分的使用热修复进行抗原修复的抗体，可极大的方便病理及科学研究免疫组化抗原修复方法的准确应用。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广东;44
申请人：	深圳褀氏生物医疗电子有限公司
发明人：	祁晖;张海华;廉正鑫
专利状态：	有效
申请日期：	2019-07-25T00:00:00+0800
发布日期：	2019-10-18T00:00:00+0800
申请号：	CN201910678781.2
公开号：	CN110346552A
代理机构：	北京联瑞联丰知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	郭堃
分类号：	G01N33/531(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	518000 广东省深圳市坪山区坪山街道大工业区青松路56号友利通科技工业厂区A栋903B
主权项：	1.一种通用型抗原修复缓冲液，其特征在于，其包括柠康酐0.5g/L；非离子型表面活性剂5ml/L；其制作方法为：以配制一升缓冲液为例：称取柠康酐0.5g，取1000ml烧杯，将称取的0.5g柠康酐，溶解在800ml的蒸馏水中，搅拌混匀；在混匀后的溶液中加入5ml的非离子型表面活性剂，搅拌混匀；用当量浓度为1N的NaOH溶液调整pH值至7.4；然后取1000ml量筒，将PH值为7.4的溶液倒入量筒中，用蒸馏水定容至1000ml。 2.根据权利要求1所述的通用型抗原修复缓冲液，其特征在于：所述非离子型表面活性剂为吐温20。 3.一种权利要求1所述的通用型抗原修复缓冲液修复方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：将组织切片取出，用铅笔在切片的磨砂面做好检测对应标记；将切片放入塑料染色架中置于电热恒温干燥箱，在60℃的条件下烤片1小时。步骤2：将组织切片依次置于脱蜡液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ内分别浸泡5分钟；梯度酒精(浓度由高到低100％～100％～95％～75％)各浸泡2分钟，纯水冲洗30秒。步骤3：将组织切片置于3％的过氧化氢水溶液(现配现用)中浸泡5分钟，纯水冲洗30秒。步骤4：将切片放入装有抗原修复缓冲液的修复盒中，再把修复盒放入水浴锅中，盖上水浴锅盖子，开始加热；待水沸腾后，开始计时，20分钟后，停止加热，从水浴锅中取出修复盒，自然降温30分钟。划出阻水区域：清洗液冲洗2×3分钟。甩去玻片上的液体，再用吸水纸吸干组织块边缘的液体，用免疫组化笔沿组织切片边缘划出阻水区域。步骤5：按切片上的标记，滴加一抗工作液适量使之完全覆盖标本，湿盒中室温下孵育30分钟。步骤6：清洗液浸泡2×5分钟；甩去清洗液，滴加免疫显色试剂，室温下(20～30℃)孵育20分钟。步骤7：清洗液浸泡2×5分钟；甩去清洗液,滴加DAB染色液适量使之完全覆盖标本，显色5分钟；纯水冲洗终止显色。步骤8：甩去切片表面多余的液体，滴加苏木素染色液适量使之完全覆盖标本，室温下染色3分钟，用酸洗液提拉8～10次去除多余苏木素，纯水冲洗30秒，PBS浸泡3分钟返蓝。步骤9：切片依次在梯度酒精(浓度由低到高75％～95％～100％)中各浸泡2分钟；使用封片剂进行封片，封片后的切片置于晾片板中。 4.根据权利要求3所述的通用型抗原修复缓冲液修复方法，其特征在于，所述脱蜡液为二甲苯。 5.根据权利要求3所述的通用型抗原修复缓冲液修复方法，其特征在于，所述清洗液为磷酸盐缓冲液。 6.根据权利要求3所述的通用型抗原修复缓冲液修复方法，其特征在于，所述酸洗液为1％的盐酸酒精溶液。 7.根据权利要求3所述的通用型抗原修复缓冲液修复方法，其特征在于，所述免疫显色试剂为HRP标记山羊抗鼠/兔二抗聚合物。
所属类别：	发明专利